【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及醫(yī)藥、食品、化學(xué)，具體涉及一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法。
技術(shù)介紹
1、在生物醫(yī)學(xué)和化學(xué)領(lǐng)域，化合物的純度評(píng)估是至關(guān)重要的一步。準(zhǔn)確的純度分析方法是確保產(chǎn)品符合fda和ema等監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求的基石，這凸顯了準(zhǔn)確定量分析的重要性。采用先進(jìn)的定量純度分析方法將繼續(xù)推動(dòng)化學(xué)領(lǐng)域的創(chuàng)新和卓越發(fā)展。這些方法包括質(zhì)量平衡法、定量核磁共振(qnmr)和差示掃描量熱法(dsc)。質(zhì)量平衡法利用各種儀器測(cè)定各類雜質(zhì)，工作繁瑣，分析時(shí)間長(zhǎng)，而且需要大量樣品。對(duì)于低純度化合物的測(cè)定，應(yīng)采用質(zhì)量平衡法對(duì)主要雜質(zhì)進(jìn)行定性，直至未知雜質(zhì)的總量不超過1％。然而，許多雜質(zhì)難以鑒定、獲取或合成，相關(guān)的測(cè)定成本可能過高。因此，可能需要進(jìn)行大量的研究工作來鑒定這些雜質(zhì)，如果一些主要雜質(zhì)無法鑒定或無法獲得純品，分析工作可能會(huì)失敗。dsc主要適用高純度化合物，而針對(duì)低純度化合物的簡(jiǎn)便檢測(cè)方法相對(duì)有限。
2、在這些測(cè)定純度的分析方法中，qnmr被公認(rèn)為最有前途的方法之一。使用高效液相色譜(hplc)從低純度有機(jī)化合物中收集少量目標(biāo)分析物的洗脫液，可以分離低純度化合物中的大部分雜質(zhì)，無需對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行表征，同時(shí)解決了雜質(zhì)干擾的問題。與傳統(tǒng)方法相比，使用hplc純化可以大大降低檢測(cè)成本。因此，許多新的hplc-qnmr方法應(yīng)運(yùn)而生。
3、saito等人采用兩種氚代試劑作為流動(dòng)相，直接進(jìn)行hplc-qnmr在線偶聯(lián)分析，但這需要大量的氚代試劑，成本極高。huang等人利用兩種非氚代溶劑(ch3cn和h2o)作
4、為了提高加快了樣品純度分析的速度，有效解決定量核磁共振中因雜質(zhì)存在而導(dǎo)致純度評(píng)估過高，進(jìn)而提高定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，專利技術(shù)人針對(duì)相關(guān)理論和技術(shù)進(jìn)行大量的分析和研究。
5、基于這一技術(shù)背景，本專利技術(shù)研究了一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本專利技術(shù)提供一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，通過雙信號(hào)抑制可有效消除核磁共振光譜中的溶劑信號(hào)干擾，而內(nèi)標(biāo)校正策略則可將樣品制備和分析過程中的變量降至最低，從而省去了現(xiàn)有技術(shù)中耗時(shí)的凍干步驟，大大加快了樣品純度分析的速度，有效解決了定量核磁共振中因雜質(zhì)存在而導(dǎo)致純度評(píng)估過高的問題。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，包括：
3、利用非氘代溶劑作為流動(dòng)相，通過高效液相色譜從低純度有機(jī)化合物中分離并收集目標(biāo)分析物的洗脫液；
4、向所述洗脫液中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)形成溶液b，對(duì)所述溶液b進(jìn)行定量核磁共振分析和雙信號(hào)抑制得到所述目標(biāo)分析物和內(nèi)標(biāo)的核磁共振定量峰面積；
5、利用待測(cè)樣品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)制備溶液a；
6、對(duì)所述溶液a和溶液b分別進(jìn)行高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器分析，得到各自的目標(biāo)分析物和內(nèi)標(biāo)的高效液相色譜峰面積；
7、基于所述定量峰面積和高效液相色譜峰面積計(jì)算得到樣品純度值。
8、本專利技術(shù)的有益效果包括：
9、(1)本專利技術(shù)提出的一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，通過雙信號(hào)抑制可有效消除核磁共振光譜中的溶劑信號(hào)干擾，而內(nèi)標(biāo)校正策略則可將樣品制備和分析過程中的變量降至最低，從而省去了現(xiàn)有技術(shù)中耗時(shí)的凍干步驟，大大加快了樣品純度分析的速度，有效解決了定量核磁共振中因雜質(zhì)存在而導(dǎo)致純度評(píng)估過高的問題。
10、(2)本專利技術(shù)提出的一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振(tss-isc-hplc-qnmr)將isc-hplc-qnmr的內(nèi)標(biāo)方法校正機(jī)制也被應(yīng)用到了tss-hplc-qnmr分析中，從而有效地減少了相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，提高了定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
11、(3)本專利技術(shù)提出的一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，與isc-hplc-qnmr定量方法相比，采用tss-isc-hplc-qnmr聯(lián)合測(cè)量方法，hplc采集、溶液a的hplc、溶液b的hplc和qnmr的時(shí)間分別為1小時(shí)、1小時(shí)、1小時(shí)和1小時(shí)，共耗時(shí)4小時(shí)，由于取消了凍干步驟，大大節(jié)省了測(cè)定時(shí)間。
12、(4)本專利技術(shù)提出的一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，與tss的hplc-qnmr相比，tss-isc-hplc-qnmr不需要收集目標(biāo)分析物的100％回收率，而且回收率的偏差可通過內(nèi)標(biāo)校正法進(jìn)行校正，tss的hplc-qnmr結(jié)果偏差約為0.93％，而tss-isc-hplc-qnmr結(jié)果偏差僅為0.01％，此外，該方法無需采集內(nèi)標(biāo)物，操作簡(jiǎn)單快捷。
13、(5)本專利技術(shù)提出的一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，tss-isc-hplc-qnmr采用雙信號(hào)抑制，抑制nmr圖譜中過大的溶劑信號(hào)，同時(shí)增強(qiáng)目標(biāo)樣品中內(nèi)標(biāo)定量信號(hào)的信號(hào)強(qiáng)度，大大提高了信噪比，一致的結(jié)果表明，該方法中的tss抑制程序既不會(huì)產(chǎn)生信號(hào)偏差，也不會(huì)產(chǎn)生明顯的信號(hào)失真，不需要額外的偏差校正。
14、本專利技術(shù)的其它特征和優(yōu)點(diǎn)將在隨后具體實(shí)施方式部分予以詳細(xì)說明。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，基于所述定量峰面積和高效液相色譜峰面積計(jì)算得到待測(cè)純度值所用的公式為：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過高效液相色譜從低純度有機(jī)化合物中分離并收集目標(biāo)分析物的洗脫液包括：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，向所述洗脫液中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)形成溶液B包括：
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，對(duì)該溶液進(jìn)行定量核磁共振分析和雙信號(hào)抑制得到所述目標(biāo)分析物和內(nèi)標(biāo)的核磁共振定量峰面積包括：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，配置特定的所述定量核磁共振分析參數(shù)包括
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述實(shí)驗(yàn)參數(shù)包括循環(huán)計(jì)數(shù)器、掃描次數(shù)和弛豫延遲；
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，創(chuàng)建并應(yīng)用了具有相應(yīng)參數(shù)的抑制宏所用的命令為：
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述命令的最后五位數(shù)字從前至后依次表示為：(a)抑制
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述非氘代溶劑為水或乙腈；
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種雙信號(hào)抑制-內(nèi)標(biāo)校正-高效液相色譜-定量核磁共振數(shù)字化測(cè)量方法，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，基于所述定量峰面積和高效液相色譜峰面積計(jì)算得到待測(cè)純度值所用的公式為：
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過高效液相色譜從低純度有機(jī)化合物中分離并收集目標(biāo)分析物的洗脫液包括：
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，向所述洗脫液中加入內(nèi)標(biāo)物質(zhì)形成溶液b包括：
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，對(duì)該溶液進(jìn)行定量核磁共振分析和雙信號(hào)抑制得到所述目標(biāo)分析物和內(nèi)標(biāo)的核磁共振定量峰面積包括：
6.根據(jù)權(quán)利...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：吳華鑫，黃挺，張偉，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京化工大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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