【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種檢測方法，更具體的是涉及一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法。
技術介紹
1、四君子湯是一種經典的中藥復方，其由黨參、白術、茯苓、甘草四味藥材組成，常用于治療脾胃虛弱、氣短乏力等癥狀，具有健脾益氣之功效。傳統中藥復方的藥效物質基礎及其體內代謝研究，長期以來受到中藥研究領域的關注。隨著現代藥理學和分析化學技術的發展，中藥血清藥物化學為研究中藥復方的藥效物質基礎和體內藥代動力學提供了重要的研究手段。
2、中藥血清藥物化學是一門基于現代分離與分析技術的應用科學，其核心思想是通過制備含藥血清，結合指紋圖譜和現代分析手段，解析血清中的化學成分，包括原型藥物、代謝產物及應激性成分，以推斷中藥復方發揮藥效的物質基礎及其代謝機制。與傳統的中藥化學研究方法相比，中藥血清藥物化學在靈敏度、分離效果及分析效率方面具有顯著優勢，特別是其能夠揭示藥物在體內代謝過程中的動態變化，為研究中藥復方的配伍規律及藥效成分提供了關鍵技術支持。
3、以四君子湯為代表的傳統中藥復方，其化學成分復雜，涉及多種生物過程，包括腸道菌群代謝、肝藥酶代謝及跨膜轉運吸收等。在此過程中，各種化學成分相互作用，并通過代謝轉化生成活性成分，從而實現治療作用。然而，目前對四君子湯體內代謝過程的研究仍較為有限。
4、因此，開發一種針對四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，對于深入理解其藥效物質基礎及藥代動力學特征具有重要意義，同時也為中藥復方的現代化研究提供了新的技術路徑。
技術實現思路
1
2、一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，所述的檢測方法包括以下步驟：
3、s1、四君子湯水煎藥的制備：按四君子湯處方，取人參、白術、茯苓各9克，炙甘草6克制備水煎藥：
4、s2、含藥血清的制備：選用雄性sd大鼠灌胃濃縮的四君子湯水煎藥，劑量為1ml/100g，連續7天，每天1次；靜置后離心，取上層血清，用0.22μm微孔濾膜除菌，-80℃保存；
5、s3、樣品的處理：將含藥血清與甲醇混合，超聲提取、離心后取上清液，加熱濃縮蒸干，加入甲醇溶解，經0.45μm濾膜過濾后進樣分析；
6、s4、分析條件如下：
7、色譜條件：使用betasil?c18色譜柱4.6mm×250mm，5μm，流動相為水和乙腈，流速0.4ml/min，進樣量20μl；
8、質譜條件：電噴霧離子源esi，負離子模式，噴霧電壓3.5kv，毛細管溫度300℃，全離子掃描范圍m/z：100-1200；
9、s5、采用hplc-ms-ms對四君子湯水煎藥及含藥血清的化學成分進行定性分析。
10、進一步的，s1還包括以下子步驟：
11、s101：將四種原料加水10倍浸泡0.5小時后，加熱煮沸煎煮1小時，過濾分離濾液和殘渣；
12、s102：殘渣加水6倍煮沸，煎煮1小時后過濾；
13、s103：再將殘渣加水煮沸1小時后過濾，合并三次濾液；
14、s104：濃縮至藥液濃度為0.125g/ml，低溫4℃保存。
15、進一步的，s2中末次給藥后禁食12小時以上，末次給藥后2小時麻醉取血。
16、進一步的，s2中離心速率為3000轉/分鐘，時間為10min。
17、進一步的，梯度洗脫條件如下：
18、
19、進一步的，色譜柱柱溫為35℃。
20、進一步的，s5中對四君子湯水煎藥及含藥血清的化學成分進行定性分析時，檢測波長為210nm、240nm、280nm。
21、進一步的，檢測結果為四君子湯水煎藥中10種化學物質，包括皂苷類7種和黃酮類3種；含藥血清中5種代謝成分。
22、有益效果：
23、本專利技術提供了一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，通過高效液相色譜-質譜聯用技術(hplc-ms)對四君子湯水煎藥及其含藥血清的化學成分進行定性分析。該方法包括以下步驟：按四君子湯處方比例制備水煎藥，經大鼠灌胃連續給藥7天后，采集血清并處理，通過betasil?c18色譜柱和梯度洗脫條件，結合負離子模式下的電噴霧離子化質譜，對水煎藥和血清中化學成分進行分離與鑒定。實驗結果表明，水煎藥中檢測到10種化學成分，包括7種皂苷類化合物和3種黃酮類化合物；含藥血清中檢測到5種化學成分，包括3種原型成分人參皂苷rb1、re和甘草酸及2種代謝產物甘草次酸和甘草素葡萄糖醛酸。本方法具有靈敏度高、分離效果優異的特點，能夠精確揭示四君子湯的藥效物質基礎及其代謝機制，為中藥復方的現代化研究與質量控制提供科學依據，并具有廣泛的應用價值。
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1.一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，S1還包括以下子步驟：
3.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，S2中末次給藥后禁食12小時以上，末次給藥后2小時麻醉取血。
4.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，S2中離心速率為3000轉/分鐘，時間為10min。
5.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，梯度洗脫條件如下：
6.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，色譜柱柱溫為35℃。
7.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，S5中對四君子湯水煎藥及含藥血清的化學成分進行定性分析時，檢測波長為210nm、240nm、280nm。
8.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，檢測
...【技術特征摘要】
1.一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，所述的檢測方法包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，s1還包括以下子步驟：
3.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，s2中末次給藥后禁食12小時以上，末次給藥后2小時麻醉取血。
4.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎藥及含藥血清的檢測方法，其特征在于，s2中離心速率為3000轉/分鐘，時間為10min。
5.根據權利要求1所述的一種四君子湯水煎...
【專利技術屬性】
技術研發人員：尚如霞，姚尚文，
申請(專利權)人：鎮江市食品藥品監督檢驗中心，
類型：發明
國別省市：
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