【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于免疫工程，具體涉及一種靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、cd155(也稱為pvr、nectin-2或necl-5)是一種具有多功能性的單次跨膜蛋白，在多種生物過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。其在免疫調(diào)節(jié)中扮演雙重角色。一方面，作為dnam-1的配體，cd155可以激活nk細(xì)胞和t細(xì)胞，促進(jìn)免疫細(xì)胞的殺傷作用；另一方面，通過(guò)與tigit和cd96等免疫檢查點(diǎn)受體的結(jié)合，cd155又能夠抑制免疫細(xì)胞的活化和功能，形成免疫抑制性腫瘤微環(huán)境。
2、現(xiàn)有研究表明，在多種類型的腫瘤中，cd155的表達(dá)通常顯著上調(diào)，成為許多類型腫瘤的共同特征之一。cd155的高表達(dá)通過(guò)影響細(xì)胞增殖、遷移和黏附等過(guò)程，調(diào)控腫瘤進(jìn)展；具體地，它可以通過(guò)激活特定的信號(hào)通路(如ras-raf-mek-erk信號(hào)通路)來(lái)促進(jìn)細(xì)胞增殖；同時(shí)，它還能與生長(zhǎng)因子受體相互作用，進(jìn)一步影響細(xì)胞增殖過(guò)程；在影響細(xì)胞遷移方面，cd155可通過(guò)參與多種腫瘤相關(guān)信號(hào)通路，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞遷移。此外，cd155通過(guò)與tigit和cd96等免疫檢查點(diǎn)受體的結(jié)合，抑制nk細(xì)胞和t細(xì)胞的活化和功能，降低免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷能力。此外，它還能促進(jìn)免疫抑制性細(xì)胞的募集和活化(如mdscs、tregs等)，進(jìn)一步加劇腫瘤免疫逃逸。
3、鑒于cd155在腫瘤免疫逃逸中的重要作用，它已成為腫瘤免疫治療的重要靶點(diǎn)之一。目前，開(kāi)發(fā)特異性針對(duì)cd155的抗體，阻斷其與免疫檢查點(diǎn)受體的結(jié)合，恢復(fù)免疫細(xì)胞的活性和功能是針對(duì)cd
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)開(kāi)發(fā)了一種靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，該抗體包括經(jīng)過(guò)人源化改造后的抗體，對(duì)cd155有較強(qiáng)的結(jié)合能力，基于該抗體構(gòu)建的cat-t細(xì)胞對(duì)部分腫瘤細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞殺傷能力。
2、為了達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)可以采用以下技術(shù)方案：
3、本專利技術(shù)一方面提供一種靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，包括重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，重鏈可變區(qū)包括hcdr1、hcdr2和hcdr3，輕鏈可變區(qū)包括lcdr1、lcdr2和lcdr3；hcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:1所示，hcdr2的氨基酸序列如seq?id?no:2所示，hcdr3的氨基酸序列如seq?id?no:3所示；lcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:4所示，lcdr2的氨基酸序列如seq?id?no:5所示，lcdr3的氨基酸序列如seq?id?no:6所示。
4、優(yōu)選地，上述靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段中，重鏈可變區(qū)還包括：與seq?idno:7所示序列具有至少80％同一性的hfr1和/或與seq?id?no:8所示序列具有至少80％同一性的hfr2和/或與seq?id?no:9所示序列具有至少80％同一性的hfr3和/或與seq?id?no:10所示序列具有至少80％同一性的hfr4；和/或輕鏈可變區(qū)還包括：與seq?id?no:11所示序列具有至少80％同一性的lfr1和/或與seq?id?no:12所示序列具有至少80％同一性的lfr2和/或與seq?id?no:13所示序列具有至少80％同一性的lfr3和/或與seq?id?no:14所示序列具有至少80％同一性的lfr4。
5、優(yōu)選地，上述靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段中，重鏈可變區(qū)還包括：與seq?idno:15所示序列具有至少80％同一性的hfr1和/或與seq?id?no:16所示序列具有至少80％同一性的hfr2和/或與seq?id?no:17所示序列具有至少80％同一性的hfr3和/或與seq?idno:18所示序列具有至少80％同一性的hfr4；和/或輕鏈可變區(qū)還包括：與seq?id?no:19所示序列具有至少80％同一性的lfr1和/或與seq?id?no:20所示序列具有至少80％同一性的lfr2和/或與seq?id?no:21所示序列具有至少80％同一性的lfr3和/或與seq?id?no:22所示序列具有至少80％同一性的lfr4。
6、優(yōu)選地，上述靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段選自以下任一抗體中的一種：(a)靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段包括：與seq?id?no:23所示序列具有至少70％同一性的重鏈可變區(qū)和與seq?id?no:24所示序列具有至少70％同一性的輕鏈可變區(qū)；(b)靶向cd155的抗體包括：與seq?id?no:25所示序列具有至少70％同一性的重鏈可變區(qū)和與seq?id?no:26所示序列具有至少70％同一性的輕鏈可變區(qū)。
7、優(yōu)選地，上述靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段還包含重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)，重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)的至少一部分來(lái)自于人源抗體、靈長(zhǎng)目源抗體或其突變體的至少之一。
8、優(yōu)選地，上述重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)均來(lái)自于人源igg抗體或其突變體。
9、優(yōu)選地，上述重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)均來(lái)自于人源igg1抗體、人源igg4抗體或其突變體。
10、優(yōu)選地，上述重鏈恒定區(qū)包含與seq?id?no:34所示序列具有至少70％同一性序列，輕鏈恒定區(qū)包含與seq?id?no:35所示序列具有至少70％同一性序列。
11、本專利技術(shù)再一方面提供一種car結(jié)構(gòu)，其包括本專利技術(shù)中的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段。
12、優(yōu)選地，上述car結(jié)構(gòu)還包括：與由seq?id?no:27所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的鉸鏈區(qū)和/或與由seq?id?no:28所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的跨膜區(qū)和/或胞內(nèi)信號(hào)結(jié)構(gòu)域；胞內(nèi)信號(hào)結(jié)構(gòu)域包括與由seq?id?no:29所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的胞內(nèi)共刺激結(jié)構(gòu)域和與由seq?id?no:30所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。
13、本專利技術(shù)再一方面提供以下任一物質(zhì)：
14、(i)核酸分子，其編碼本專利技術(shù)中的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段或編碼本專利技術(shù)中的car結(jié)構(gòu)；
15、(ii)表達(dá)載體，其包括(i)中的核酸分子；
16、(iii)工程細(xì)胞，其包括(i)中的核酸分子和/或(ii)中的表達(dá)載體；
17、(iv)檢測(cè)cd155的產(chǎn)品，其包括本專利技術(shù)中的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段；
18、(v)藥物組合物，其包括本專利技術(shù)中的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段和/或本專利技術(shù)中的car結(jié)構(gòu)和/或(i)中的核酸分子和/或(ii)中的表達(dá)載體和/或(iii)中的工程細(xì)胞；
19、(vi)藥物制劑，其包括本專利技術(shù)中的靶向cd155的抗體和/或本專利技術(shù)中的抗原結(jié)合片段和/或本專利技術(shù)中的car結(jié)構(gòu)和/或(i)中的核酸分子和/或(ii)中的表達(dá)載體和/或(iii)中的工程細(xì)胞和/或(v)中的藥物組合物。
20、優(yōu)選地，上述藥物組合物為雙抗本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，包括重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，重鏈可變區(qū)包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，輕鏈可變區(qū)包括LCDR1、LCDR2和LCDR3；其特征在于，HCDR1的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，HCDR2的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示，HCDR3的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:3所示；LCDR1的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:4所示，LCDR2的氨基酸序列如SEQ?IDNO:5所示，LCDR3的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:6所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段選自以下任一抗體中的一種：
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4所述的的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段還包含重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)，重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)均來(lái)自于人源IgG抗體或其突變體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)均來(lái)自于人源IgG1抗體、人源IgG4抗體或其突變體。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，重鏈恒定區(qū)包含與SEQ?ID?NO:34所示序列具有至少70％同一性序列，輕鏈恒定區(qū)包含與SEQ?ID?NO:35所示序列具有至少70％同一性序列。
9.CAR結(jié)構(gòu)，其特征在于，包括權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的CAR結(jié)構(gòu)，其特征在于，CAR結(jié)構(gòu)還包括：與由SEQ?ID?NO:27所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的鉸鏈區(qū)和/或與由SEQ?ID?NO:28所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的跨膜區(qū)和/或胞內(nèi)信號(hào)結(jié)構(gòu)域；胞內(nèi)信號(hào)結(jié)構(gòu)域包括與由SEQ?ID?NO:29所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的胞內(nèi)共刺激結(jié)構(gòu)域和與由SEQ?ID?NO:30所示序列編碼的氨基酸序列具有至少80％同一性的胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域。
11.以下任一物質(zhì)：
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其特征在于，藥物組合物為雙抗、多抗、ADC或融合蛋白。
13.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段在制備檢測(cè)CD155水平的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
14.權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的靶向CD155的抗體或抗原結(jié)合片段和/或權(quán)利要求9至10中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的CAR結(jié)構(gòu)和/或權(quán)利要求11所述的核酸分子和/或表達(dá)載體和/或工程細(xì)胞在制備藥物中的應(yīng)用，藥物用于預(yù)防和/或治療CD155相關(guān)疾病。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的應(yīng)用，其特征在于，CD155相關(guān)疾病為癌癥、自身免疫病、移植排斥或感染性疾病。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的應(yīng)用，其特征在于，癌癥包括急性髓性白血病、單核細(xì)胞白血病、黑色素瘤、肺癌、肝癌、卵巢癌、宮頸癌、胰腺癌、皮膚癌、膀胱癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腎癌、胃癌、食道癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌和頭頸癌中的至少一種。
17.根據(jù)權(quán)利要求14至16中任一項(xiàng)權(quán)利要求所述的應(yīng)用，應(yīng)用包括以下應(yīng)用中的一種或多種組合：
...【技術(shù)特征摘要】
1.靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，包括重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，重鏈可變區(qū)包括hcdr1、hcdr2和hcdr3，輕鏈可變區(qū)包括lcdr1、lcdr2和lcdr3；其特征在于，hcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:1所示，hcdr2的氨基酸序列如seq?id?no:2所示，hcdr3的氨基酸序列如seq?id?no:3所示；lcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:4所示，lcdr2的氨基酸序列如seq?idno:5所示，lcdr3的氨基酸序列如seq?id?no:6所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段選自以下任一抗體中的一種：
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4所述的的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段還包含重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)，重鏈恒定區(qū)和/或輕鏈恒定區(qū)的至少一部分來(lái)自于人源抗體、靈長(zhǎng)目源抗體或其突變體的至少之一。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)均來(lái)自于人源igg抗體或其突變體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，重鏈恒定區(qū)和輕鏈恒定區(qū)均來(lái)自于人源igg1抗體、人源igg4抗體或其突變體。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的靶向cd155的抗體或抗原結(jié)合片段，其特征在于，重鏈恒定區(qū)包含與seq?id?no:34所示序列具有至少70％同一性序列，輕鏈恒定區(qū)包含與seq?id?no:35所示序列具有至少70％同一性序列。
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：趙婷婷，余鵬，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：重慶國(guó)際免疫創(chuàng)新中心有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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