【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于多肽制備，具體涉及一種蛋白核小球藻高f值寡肽及其制備方法和應用。
技術介紹
1、高f值寡肽是支鏈氨基酸含量與芳香族氨基酸含量的比值超過20，由3-9個氨基酸組成的寡肽體系。高f值寡肽因其獨特的氨基酸組成而具備多種功能活性，如抗氧化、抗疲勞、抗醉酒和肝保護活性等，因此在緩減酒精性和化學性肝損傷方面具有重要的應用潛力。目前，國內外研究學者對高f值寡肽產品的開發涉及三種不同原料來源的蛋白質，有植物源蛋白，如玉米、火麻仁和松仁；水產源蛋白，如南極磷蝦、牡蠣和貽貝等；乳源性蛋白，如羊乳和牛乳等。
2、高f值肽制備技術的重點就是最大程度的將芳香族氨基酸分離出來，同時盡可能保留支鏈氨基酸。目前，蛋白酶解法是制備高f值肽的主要途徑，分為單一酶水解法和復合酶水解法。其中復合酶水解法由于效率高而更受歡迎。復合酶水解首先通過中性蛋白酶、胃蛋白酶、堿性蛋白酶等內切酶將原料中分子質量大的肽鏈鍵斷裂，暴露芳香族氨基酸，之后選用風味蛋白酶等外切酶釋放芳香族氨基酸。芳香族氨基酸的脫除是提高f值的一個關鍵點，主要有活性炭、樹脂吸附，而活性炭由于易于操作、成本低，吸附性好而作為芳香族氨基酸吸附的一種常用材料。然而，在高f值肽的制備過程中存在酶切位點廣泛、水解過程難以控制，支鏈和芳香族氨基酸釋放率低，蛋白回收率低等問題，如何選擇專一性酶切芳香族氨基酸的酶，實現定向制備和水解控制是亟需解決的問題；同時在芳香族氨基酸吸附過程中，差異性吸附手段有限。
3、蛋白核小球藻(chlorella)是微藻的一種，蛋白質含量高達50-60％，同時
技術實現思路
1、為解決上述問題，本專利技術提供了一種蛋白核小球藻高f值肽及其制備方法，本專利技術采用特定內切酶和外切酶結合酶解蛋白核小球藻，避免了因酶切位點廣泛而造成的酶消耗量大，節約了成本，制備高效穩定且重復性好。同時，以小球藻為原料成功制備的高f值肽，解決了目前制備高f值肽原料來源匱乏的問題，本專利技術可用于制備具有醒酒護肝功效的藥品、保健品和食品。
2、本專利技術所提供的蛋白核小球藻高f值肽，是將蛋白核小球藻進行粉碎，然后與水混合后，凍融并超聲處理制成勻漿液；加入堿性蛋白酶進行酶解，然后再加入風味蛋白酶進行酶解；酶解產物用活性炭吸附后，上清液經過冷凍干燥即得到蛋白核小球藻高f值肽。
3、所述的將蛋白核小球藻進行粉碎，作為實施例的一種記載，是將蛋白核小球藻通過氣流碰撞來粉碎。
4、作為本專利技術的一種優選方案，蛋白核小球藻與蒸餾水是按照重量體積比1:20-1:30(g/ml)進行混合的；
5、作為本專利技術的一種優選方案，所述的堿性蛋白酶酶解的ph為8.0-9.0，溫度為50℃。
6、所述的風味蛋白酶的酶解體系ph為7.0-8.0，溫度為50℃，酶解時間2.5-3.5h。
7、作為本專利技術的一種優選方案，所述的活性炭是采用一種粒徑為200目、木質和椰殼混合的活性炭(thx-200a)進行脫除芳香族氨基酸處理的。
8、本專利技術再一個方面還提供所述的蛋白核小球藻高f值肽的一種用途，是在制備醒酒或護肝制品中的應用。
9、本專利技術還提供一種解酒或護肝的制品，其中包含有所述的蛋白核小球藻高f值肽。
10、本專利技術嚴格控制酶解和吸附過程中的參數，內切酶和外切酶酶解不僅高效水解小球藻蛋白質，產生更多具有生物活性的肽段，而且解決了因酶切位點廣泛而造成工業化生產的成本高和穩定性差的特性。本專利技術所制備的蛋白核小球藻高f值肽達到36.90±8.18，與蛋白核小球藻原料相比(2.90±0.07)，其f值提高了12.72倍，除此之外，高f值寡肽分子量<1000da的肽占95-99.40％，符合寡肽的特征，分子量小，易消化吸收。本專利技術制得的高f值寡肽可以加速乙醇在肝臟內的代謝，保護酒精對肝臟的損傷，具有醒酒護肝的功效。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種蛋白核小球藻高F值肽，其特征在于，所述的蛋白核小球藻高F值肽是將蛋白核小球藻進行粉碎，然后與水混合后，凍融并超聲處理制成勻漿液；加入堿性蛋白酶進行酶解，然后再加入風味蛋白酶進行酶解；酶解產物用活性炭吸附后，上清液經過冷凍干燥制備的。
2.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高F值肽，其特征在于，所述的將蛋白核小球藻進行粉碎，是將蛋白核小球藻通過氣流碰撞來粉碎。
3.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高F值肽，其特征在于，所述的蛋白核小球藻與蒸餾水按照重量體積比1:20-1:30進行混合。
4.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高F值肽，其特征在于，所述的堿性蛋白酶酶解的pH為8.0-9.0，溫度為50℃。
5.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高F值肽，其特征在于，所述的風味蛋白酶的酶解體系pH為7.0-8.0，溫度為50℃，酶解時間2.5-3.5h。
6.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高F值肽，其特征在于，所述的活性炭是采用一種粒徑為200目、木質和椰殼混合的活性炭進行脫除芳香族氨基酸處理。
7.權利要求1所述的蛋白
8.一種解酒或護肝的制品，其特征在于，所述的制品中包含有權利要求1所述的蛋白核小球藻高F值肽。
...【技術特征摘要】
1.一種蛋白核小球藻高f值肽，其特征在于，所述的蛋白核小球藻高f值肽是將蛋白核小球藻進行粉碎，然后與水混合后，凍融并超聲處理制成勻漿液；加入堿性蛋白酶進行酶解，然后再加入風味蛋白酶進行酶解；酶解產物用活性炭吸附后，上清液經過冷凍干燥制備的。
2.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高f值肽，其特征在于，所述的將蛋白核小球藻進行粉碎，是將蛋白核小球藻通過氣流碰撞來粉碎。
3.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高f值肽，其特征在于，所述的蛋白核小球藻與蒸餾水按照重量體積比1:20-1:30進行混合。
4.如權利要求1所述的蛋白核小球藻高f值肽，其...
【專利技術屬性】
技術研發人員：侯虎，孫艷，楊亭亭，樊燕，楊霞，趙雪，
申請(專利權)人：中國海洋大學，
類型：發明
國別省市：
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