【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于生物，具體涉及一種能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7及應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、引起手足口病（hand，foot?and?mouth?disease，簡稱hfmd）的病毒屬于小rna病毒科（picornavirus）腸道病毒屬（enteroviruse），包括柯薩奇病毒a組的2、4、5、6、7、9、10、16型等，b組的1、2、3、4、5、6、13型等，腸道病毒a組71型（enterovirus?a71，ev-a71），埃可病毒（echoviruses）等。早期研究發(fā)現(xiàn)ev-a71和cv-a16是hfmd的主要致病原，近年來，hfmd腸道病毒病原譜發(fā)生了改變，近幾年的流行病學(xué)資料顯示，cv-a6和cv-a10引起的hfmd發(fā)病率正逐年持續(xù)升高，特別是2012年后，cv-a10在我國北京、廣東、福建等多個城市或地區(qū)成為引起hfmd暴發(fā)的主要病原體之一。因此cv-a10已成為繼ev-a71和cv-a16后，另一種值得人們關(guān)注的引起hfmd的腸道病毒病原體。
2、構(gòu)象中和抗體檢測更能反映病毒的含量和功能。因此，開發(fā)靶向構(gòu)象表位、特異性識別cv-a10的中和活性單克隆抗體對疫苗研發(fā)的質(zhì)控、臨床樣本的檢測和實驗室病毒鑒別，cv-a10基礎(chǔ)功能的研究具有重要意義。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、鑒于此，本專利技術(shù)提供了一種能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7及應(yīng)用，可以特異性識別cv-a10，不識別其他的腸道病毒。
2、為達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)采用以下
3、第一方面，本專利技術(shù)提供了一種能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的重鏈可變區(qū)包括互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr1、互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr2和互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr3，所述互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:1所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr2的氨基酸序列如seq?id?no:2所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr3的氨基酸序列如seq?id?no:3所示；
4、所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的輕鏈可變區(qū)包括互補(bǔ)決定區(qū)vlcdr1、互補(bǔ)決定區(qū)vlcdr2和互補(bǔ)決定區(qū)vlcdr3，所述互補(bǔ)決定區(qū)vlcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:4所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)vlcdr2的氨基酸序列如seq?id?no:5所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)vlcdr3的氨基酸序列如seq?id?no:6所示。
5、優(yōu)選地，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.7所示；和/或，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.9。
6、優(yōu)選地，所述單克隆抗體為igm亞型抗體。
7、優(yōu)選地，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7靶向構(gòu)象表位。
8、第二方面，本專利技術(shù)提供了一種編碼所述的能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的多核苷酸分子。
9、優(yōu)選地，編碼所述重鏈的核酸分子為以下幾種中的任一種：
10、a、具有如seq?id?no.8所示的核苷酸序列；
11、b、與seq?id?no.8所示的核苷酸序列互補(bǔ)核苷酸序列；
12、c、與a和b的核苷酸序列編碼相同蛋白質(zhì)，但因遺傳密碼的簡并性而與其不同的核苷酸序列；和/或
13、編碼所述輕鏈的核酸分子為以下幾種中的任一種：
14、e、具有如seq?id?no.10所示的核苷酸序列；
15、f、與seq?id?no.10所示的核苷酸序列互補(bǔ)的核苷酸序列；
16、g、與e和f的核苷酸序列編碼相同的蛋白質(zhì)，但因遺傳密碼的簡并性而與其不同的核苷酸序列。
17、第三方面，本專利技術(shù)提供了一種表達(dá)載體，含有編碼所述的單克隆抗體707的核酸分子。
18、第四方面，本專利技術(shù)提供了一種宿主細(xì)胞，含有所述的多核苷酸分子，或含有所述的表達(dá)載體。
19、第五方面，本專利技術(shù)提供了一種所述的單克隆抗體707，或所述的多核苷酸分子編碼的單克隆抗體707在制備檢測cv-a10試劑或試劑盒中的應(yīng)用。
20、第六方面，本專利技術(shù)提供了一種所述的單克隆抗體707，或所述的多核苷酸分子編碼的單克隆抗體707在制備抑制、預(yù)防和治療cv-a10藥物中的應(yīng)用。
21、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)的有益效果為：
22、（1）本專利技術(shù)所提供的單克隆抗體是以純化后的柯薩奇病毒a組10型（cv-a10）病毒免疫小鼠，制備篩選雜交瘤細(xì)胞，從而制備得到的，其為igm亞型的中和抗體，可以特異性識別cv-a10，不識別其他的腸道病毒。
23、（2）本專利技術(shù)該單克隆抗體可與偶聯(lián)物（辣根過氧化酶或異硫氰酸熒光素等）結(jié)合用于直接或間接檢測、快速診斷，如可用于開發(fā)檢測由cv-a10感染引起的臨床樣品的檢測試劑或試劑盒，也可用于臨床病毒分離株實驗室鑒定抗體，同時還可用于制備預(yù)防性疫苗生產(chǎn)中間品及產(chǎn)品含cv-a10抗原的定量檢測試劑。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點】
1.一種能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7，其特征在于，所述能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7的重鏈可變區(qū)包括互補(bǔ)決定區(qū)VHCDR1、互補(bǔ)決定區(qū)VHCDR2和互補(bǔ)決定區(qū)VHCDR3，所述互補(bǔ)決定區(qū)VHCDR1的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)VHCDR2的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)VHCDR3的氨基酸序列如SEQ?IDNO:3所示；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7，其特征在于，所述能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.7所示；和/或，所述能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ?IDNO.9。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7，其特征在于，所述單克隆抗體為IgM亞型抗體。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7，其特征在于，所述能夠識別和中和CV-A10的單克隆抗體7H7靶向構(gòu)象表位。<...
【技術(shù)特征摘要】
1.一種能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7，其特征在于，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的重鏈可變區(qū)包括互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr1、互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr2和互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr3，所述互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr1的氨基酸序列如seq?id?no:1所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr2的氨基酸序列如seq?id?no:2所示，所述互補(bǔ)決定區(qū)vhcdr3的氨基酸序列如seq?idno:3所示；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7，其特征在于，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.7所示；和/或，所述能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?idno.9。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7，其特征在于，所述單克隆抗體為igm亞型抗體。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的能夠識別和中和cv-a10的單克隆抗體7h7，其特征在于，所述能夠識別和中和...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：申碩，馬正邦，哈迪熱亞·熱合木吐拉，楊東升，游磊，郭靖，孟勝利，王澤鋆，
申請(專利權(quán))人：武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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