【技術實現步驟摘要】
本申請屬于分子生物學檢測，具體涉及一種核酸組合產品、檢測羅爾斯頓菌的試劑盒及檢測方法。
技術介紹
1、羅爾斯頓菌屬（ralstonia）是1995年由日本學者yabuuchi等提議成立的新菌屬，于1996年《國際細菌分類與進化雜志》正式公布有效。羅爾斯頓菌屬在分類學上隸屬于β-變形菌門（betaproteobacteria）的伯克霍爾德菌科（burkholderiales）。目前羅爾斯頓菌屬包括6個種，包括：皮氏羅爾斯頓菌（ralstonia?pickettii）、解甘露醇羅爾斯頓菌（ralstonia?mannitolilytica）、譎詐羅爾斯頓菌（ralstonia?insidiosa）、茄科羅爾斯頓菌（ralstonia?solanacearum）、假茄科羅爾斯頓菌（ralstonia?pseudosolanacearum）和蒲桃羅爾斯頓菌（ralstonia?syzygii）。其他的一些原屬于羅爾斯頓菌屬的菌種，如少見羅爾斯頓菌，目前已重新分類為親銅菌屬（cupriavidus）。
2、羅爾斯頓菌屬，為需氧的非發酵革蘭陰性桿菌，具有非常寬闊的生態境，廣泛分布于環境的水和土壤中，能夠在缺乏營養的潮濕環境中生長繁殖，是人類的機會致病菌和重要的植物致病菌。
3、皮氏羅爾斯頓菌是羅爾斯頓菌屬的代表菌種，是嚴格需氧的非發酵革蘭陰性桿菌；有動力或無動力，有動力菌株具有極生單鞭毛或周鞭毛，不形成芽孢。皮氏羅爾斯頓菌已從多種臨床標本中發現，包括血液、尿液、痰液和腦脊液等。該細菌還從許多水源中分離出來，包括飲用水
4、目前，暫未有針對皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌、譎詐羅爾斯頓菌進行三種細菌的聯檢的相關報道。
技術實現思路
1、基于此，本申請一實施例提供一種核酸組合產品，該核酸組合產品能夠對皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌、譎詐羅爾斯頓菌進行三種細菌的聯檢，并且具有較高的靈敏度與特異性。
2、本申請一方面提供一種核酸組合產品，所述核酸組合產品包括：
3、序列如seq?id?no.1所示的上游引物，和序列如seq?id?no.2所示的下游引物；
4、序列如seq?id?no.4所示的上游引物，和序列如seq?id?no.5所示的下游引物；
5、序列如seq?id?no.7所示的上游引物，和序列如seq?id?no.8所示的下游引物。
6、在其中一個實施例中，所述核酸組合產品還包括：
7、序列如seq?id?no.3所示的檢測探針；
8、序列如seq?id?no.6所示的檢測探針；
9、序列如seq?id?no.9所示的檢測探針。
10、在其中一個實施例中，所述核酸組合產品還包括內參引物對與內參檢測探針。
11、在其中一個實施例中，所述內參引物對包括：序列如seq?id?no.10所示的上游引物，和序列如seq?id?no.11所示的下游引物。
12、在其中一個實施例中，所述內參檢測探針的序列如seq?id?no.12所示。
13、在其中一個實施例中，所述檢測探針的兩端分別標記有熒光報告基團和熒光淬滅基團。
14、在其中一個實施例中，所述檢測探針的5’端標記有熒光報告基團，3’端標記有熒光淬滅基團。
15、在其中一個實施例中，所述熒光報告基團包括fam、rox、hex、cy5、vic、tet、joe、cy3、cy7、red610、texas?red、red670和ned中一種或多種。
16、在其中一個實施例中，所述熒光淬滅基團包括tamra、bhq和結合分子溝的非熒光淬滅劑中的一種或多種。
17、本申請另一方面提供所述的核酸組合產品在制備皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌和譎詐羅爾斯頓菌的檢測試劑盒中的應用。
18、本申請另一方面提供一種檢測皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌和譎詐羅爾斯頓菌的試劑盒，包括所述的核酸組合產品。
19、在其中一個實施例中，所述試劑盒還包括：核酸釋放試劑、核酸提取試劑、核酸擴增試劑中的一種或多種。
20、在其中一個實施例中，所述核酸擴增試劑包括dna聚合酶、dntp、ung酶、pcr緩沖液和mg2+中的一種或多種。
21、本申請另一方面提供一種檢測皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌和譎詐羅爾斯頓菌的方法，包括：提供待測核酸樣本，使用所述的核酸組合產品對所述待測核酸樣本進行pcr擴增反應。本申請的一個或多個實施例細節在下面的描述中提出，本申請的其他特征、目的和優點將從說明書及其權利要求書變得明顯。
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1.一種核酸組合產品，其特征在于，所述核酸組合產品包括：
2.根據權利要求1所述的核酸組合產品，其特征在于，所述核酸組合產品還包括：
3.根據權利要求1所述的核酸組合產品，其特征在于，所述核酸組合產品還包括內參引物對與內參檢測探針；
4.根據權利要求2~3中任一項所述的核酸組合產品，其特征在于，所述檢測探針的兩端分別標記有熒光報告基團和熒光淬滅基團；
5.根據權利要求4所述的核酸組合產品，其特征在于，所述熒光報告基團包括FAM、ROX、HEX、CY5、VIC、TET、JOE、Cy3、Cy7、RED610、Texas?Red、RED670和NED中一種或多種。
6.根據權利要求4所述的核酸組合產品，其特征在于，所述熒光淬滅基團包括TAMRA、BHQ和結合分子溝的非熒光淬滅劑中的一種或多種。
7.權利要求1~6中任一項所述的核酸組合產品在制備皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌和譎詐羅爾斯頓菌的檢測試劑盒中的應用。
8.一種檢測皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌和譎詐羅爾斯頓菌的試劑盒，其特征在于，所述
9.根據權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括：核酸釋放試劑、核酸提取試劑、核酸擴增試劑中的一種或多種；
10.一種檢測皮氏羅爾斯頓菌、解甘露醇羅爾斯頓菌和譎詐羅爾斯頓菌的方法，其特征在于，包括：
...【技術特征摘要】
1.一種核酸組合產品，其特征在于，所述核酸組合產品包括：
2.根據權利要求1所述的核酸組合產品，其特征在于，所述核酸組合產品還包括：
3.根據權利要求1所述的核酸組合產品，其特征在于，所述核酸組合產品還包括內參引物對與內參檢測探針；
4.根據權利要求2~3中任一項所述的核酸組合產品，其特征在于，所述檢測探針的兩端分別標記有熒光報告基團和熒光淬滅基團；
5.根據權利要求4所述的核酸組合產品，其特征在于，所述熒光報告基團包括fam、rox、hex、cy5、vic、tet、joe、cy3、cy7、red610、texas?red、red670和ned中一種或多種。
6.根據權利要求...
【專利技術屬性】
技術研發人員：孫青芝，許麗媛，譚德勇，許思瑤，王海嘯，戴立忠，
申請(專利權)人：圣湘生物科技股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
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