【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物，具體涉及到一種微藻的提取方法。
技術介紹
1、
2、微藻肥是一種化學肥料的替代品之一，是從微藻中提取的有效生物活性物質，能夠促進植物生長，改善農產品外觀和口感，解除不利自然條件或化學藥劑對植物造成的傷害。與傳統化學肥料相比，微藻肥富含氨基酸、多肽、微藻多糖和天然植物激素等活性成分，能夠調節農作物的營養平衡，增強其抗逆抗病性，實現農作物在產量和品質上的有效提升，且不會出現污染水源、破壞土壤等環境問題，是當前綠色環保肥料的熱門產品之一。基于以上優勢，微藻的提取一直是微藻生物能源產業中的關鍵技術。微藻的提取技術有：索氏抽提、有機溶劑提取、超聲波提取、滲透壓破壁提取、機械破壁提取、超臨界二氧化碳提取等。目前這些提取技術多停留在實驗室階段，工藝路線繁瑣，提取率低，成本高，能耗高，限制了其工業化的應用。
3、因此，如果開發一種新的有效提取微藻的方法并將其應用在生物肥料中，將具有廣闊的市場應用前景。
技術實現思路
1、本部分的目的在于概述本專利技術的實施例的一些方面以及簡要介紹一些較佳實施例。在本部分以及本申請的說明書摘要和專利技術名稱中可能會做些簡化或省略以避免使本部分、說明書摘要和專利技術名稱的目的模糊，而這種簡化或省略不能用于限制本專利技術的范圍。
2、鑒于上述和/或現有技術中存在的問題，提出了本專利技術。
3、因此，本專利技術的目的是，克服現有技術中的不足，提供一種微藻的提取方法。
4、為解決上述技術問題，
5、s2.酶解反應：將步驟s1制得的藻粉加入去離子水，向其中添加復合酶反應，反應后粗孔過濾得到酶解混合物；
6、s3.復配后處理：將步驟s2制得的酶解混合物加入熱解生物炭、膨潤土和生物質焦油進行混合，粉碎化處理后烘干，得到微藻-生物炭。
7、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s1中所述葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、檸檬酸鐵銨、抗壞血酸、硅酸鈉、維生素b12、碳酸氫鈉、碳酸氫銨和去離子水的質量比為10~25:1~5:1~2:0.1~2:0.1~2:1~3:0.0001~0.001:2~5:0.1~2:1000；所述裂殖壺藻菌種種子液的接種量為12~15v/v%，所述光照的強度為2500~3000lx，所述培養的條件為o2通氣量為2~4l/min，22~24℃，100~200r/min，培養3~5d，所述處理劑處理為在培養條件下處理10~24h。
8、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s1中所述處理劑包括對羥基苯甲酸和磷酸二銨，其中對羥基苯甲酸和磷酸二銨的質量比為1~5:20~30。
9、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s1中處理劑和去離子水的質量比為20~30:1000。
10、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s2中所述復合酶包括脂肪酶和溶菌酶，其中脂肪酶和溶菌酶的質量比為2~7:5~10。
11、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s2中所述酶解反應為在40~60℃下反應1~5h。
12、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s3中所述酶解混合物、熱解生物炭、膨潤土和生物質焦油的質量比為6:2:1:1。
13、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s3中所述粉碎化處理為使用粉碎機對混合物料在20~45℃粉碎20~40min，使得粉碎后的物料目數為120~200目。
14、作為本專利技術所述的微藻的提取方法一種優選方案，其中：步驟s3中所述烘干為以8~12℃/min的升溫速率，升溫至260℃干燥至恒重。
15、本專利技術的另一目的為，克服現有技術中的不足，提供一種微藻-生物炭在制備微藻肥料中的應用。
16、本專利技術有益效果：
17、本專利技術將微藻-生物炭應用在微藻肥料時，能有效提高作物的產量與品質，且本專利技術通過使用對羥基苯甲酸和磷酸二銨對培養裂殖壺藻獲得的培養液進行處理，使得改變裂殖壺藻的細胞膜通透性，便于其他營養物質進入，同時有助于裂殖壺藻的細胞破壁，通過配合培養基中葡萄糖、抗壞血酸和維生素b12，避免細胞內物質的流失和活性氧含量增多導致的氧化脅迫，通過加入葡萄糖為碳源，加入碳酸氫銨為氮源，明顯提高了裂殖壺藻活性物質（多糖、油脂等）的含量，裂殖壺藻活性物質可以直接為植物提供所需的營養，促進植物生長，還能夠提高作物的非特異性免疫能力，增強作物對逆境脅迫的抵抗力，同時還可以改良土壤，調節和促進植物體對水分和養分的吸收和利用，有助于改善土壤結構和提高土壤肥力。
18、熱解生物炭是以生物質原料在完全或部分缺氧條件下高溫熱解后的固體產物，制備原料非常廣泛、成本較低，其具有孔隙結構豐富、吸附能力強等特征，本專利技術通過向酶解混合物中加入熱解生物炭，使得微藻可以嵌入熱解生物炭的孔隙結構中，使得微藻與熱解生物炭形成強結合，同時加入膨潤土和生物質焦油，提高物料粘合性的同時也提供了額外的有機營養，且生物質焦油和熱解生物炭同屬于生物質原料熱解后的產物，提高了生物質原料的使用率，且不會對環境造成污染，而酶解過程中使用的復合酶包括脂肪酶和溶菌酶，兩者協同作用下，能夠很好的吸附以及破裂細胞壁，從而提高活性物質的提取效率，在適當的酶解混合物、熱解生物炭、膨潤土和生物質焦油的配比下，制得的微藻-生物炭同時具備了豐富的孔隙結構、大量的微藻負載，以及強結合的結構性能，能夠有效保持微藻-生物炭的活性性能，在將其制備微藻肥料時具有廣闊的市場前景。
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1.一種微藻的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S1中所述葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、檸檬酸鐵銨、抗壞血酸、硅酸鈉、維生素B12、碳酸氫鈉、碳酸氫銨和去離子水的質量比為10~25:1~5:1~2:0.1~2:0.1~2:1~3:0.0001~0.001:2~5:0.1~2:1000；所述裂殖壺藻菌種種子液的接種量為12~15v/v%，所述光照的強度為2500~3000lx，所述培養的條件為O2通氣量為2~4L/min，22~24℃，100~200r/min，培養3~5d，所述處理劑處理為在培養條件下處理10~24h。
3.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S1中所述處理劑包括對羥基苯甲酸和磷酸二銨，其中對羥基苯甲酸和磷酸二銨的質量比為1~5:20~30。
4.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S1中處理劑和去離子水的質量比為20~30:1000。
5.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S2中所述復合酶包括脂肪酶和溶菌酶，其中脂肪
6.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S2中所述酶解反應為在40~60℃下反應1~5h。
7.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S3中所述酶解混合物、熱解生物炭、膨潤土和生物質焦油的質量比為6:2:1:1。
8.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S3中所述粉碎化處理為使用粉碎機在20~45℃粉碎20~40min，使得粉碎后的物料目數為120~200目。
9.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟S3中所述烘干為以8~12℃/min的升溫速率，升溫至260℃干燥至恒重。
10.一種如權利要求1~9任一項所述的微藻的提取方法制得的微藻-生物炭在制備微藻肥料中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種微藻的提取方法，其特征在于：包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟s1中所述葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、檸檬酸鐵銨、抗壞血酸、硅酸鈉、維生素b12、碳酸氫鈉、碳酸氫銨和去離子水的質量比為10~25:1~5:1~2:0.1~2:0.1~2:1~3:0.0001~0.001:2~5:0.1~2:1000；所述裂殖壺藻菌種種子液的接種量為12~15v/v%，所述光照的強度為2500~3000lx，所述培養的條件為o2通氣量為2~4l/min，22~24℃，100~200r/min，培養3~5d，所述處理劑處理為在培養條件下處理10~24h。
3.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟s1中所述處理劑包括對羥基苯甲酸和磷酸二銨，其中對羥基苯甲酸和磷酸二銨的質量比為1~5:20~30。
4.如權利要求1所述的微藻的提取方法，其特征在于：步驟s1中處理劑和去離子水的質量比為2...
【專利技術屬性】
技術研發人員：梁成偉，盧中彬，李軍，張英奇，林衛紅，劉佳，武裕昆，
申請(專利權)人：青島科技大學，
類型：發明
國別省市：
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