【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于活性肽，具體涉及一種膠原三肽及其制備方法和應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、隨著全球人口老齡化趨勢(shì)的加劇，抗衰老已成為生物醫(yī)學(xué)、營(yíng)養(yǎng)科學(xué)以及美容化妝品領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。衰老過(guò)程涉及多個(gè)生物學(xué)機(jī)制，包括氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和基質(zhì)降解等。膠原蛋白作為皮膚、骨骼、軟骨等組織的主要結(jié)構(gòu)蛋白，在維持組織結(jié)構(gòu)和功能方面起著至關(guān)重要的作用。然而，隨著年齡的增長(zhǎng)，體內(nèi)膠原蛋白的合成能力逐漸下降，導(dǎo)致皮膚松弛、皺紋形成、骨骼脆弱以及關(guān)節(jié)功能退化等衰老現(xiàn)象。
2、目前，市場(chǎng)上存在大量以膠原蛋白為基礎(chǔ)的抗衰老產(chǎn)品，其中以膠原肽形式的產(chǎn)品最為常見(jiàn)。膠原肽是通過(guò)對(duì)膠原蛋白進(jìn)行酶解處理而獲得的分子量較小的肽類，易被人體吸收，具有促進(jìn)膠原蛋白合成、抗氧化、保濕等多重生物活性。然而，傳統(tǒng)的膠原肽產(chǎn)品大多為混合肽，分子量分布較廣，活性成分不明確，影響了其抗衰老效果的穩(wěn)定性和可靠性。
3、在此背景下，膠原三肽作為一種特定分子量(約300～500da)的低聚肽，因其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、易于吸收、活性明確等特點(diǎn)，逐漸成為抗衰老研究的焦點(diǎn)。已有研究表明，膠原三肽具有顯著的抗氧化、抗炎以及促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成的能力，可有效減緩皮膚老化、改善關(guān)節(jié)健康。然而，現(xiàn)有膠原三肽的制備方法存在產(chǎn)率低、純度不高、工藝復(fù)雜等問(wèn)題，限制了其在抗衰老產(chǎn)品中的廣泛應(yīng)用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)提供了一種膠原三肽及其制備方法和應(yīng)用，膠原三肽產(chǎn)量高且工藝簡(jiǎn)單，制備得到的膠原三肽純度高。
2、本專利技術(shù)提供了一種膠
3、(2)依次采用堿性蛋白酶和中性蛋白酶分別對(duì)步驟(1)所述預(yù)處理液進(jìn)行酶解后滅酶，得酶解液；
4、(3)將所述酶解液依次利用陶瓷膜和有機(jī)過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾處理，得過(guò)濾液；
5、(4)利用截留分子量為400da的納濾膜進(jìn)行截留，收集透過(guò)液，透過(guò)液中包含膠原三肽。
6、在本專利技術(shù)的一個(gè)具體實(shí)施方式中，步驟(1)所述高溫酶解預(yù)處理的ph值為8.8～9.0，高溫酶解預(yù)處理的時(shí)間為1～1.5h。
7、在本專利技術(shù)的一個(gè)具體實(shí)施方式中，步驟(1)所述耐高溫蛋白酶和羅非魚(yú)鱗的質(zhì)量比為(0.8～1)kg：1000kg。
8、在本專利技術(shù)的一個(gè)具體實(shí)施方式中，步驟(2)所述堿性蛋白酶的酶解ph值為8.8～9.0，酶解時(shí)間為3h～3.5kg。
9、在本專利技術(shù)的一個(gè)具體實(shí)施方式中，步驟(2)所述中性蛋白酶的酶解時(shí)間為1h～1.5kg。
10、在本專利技術(shù)的一個(gè)具體實(shí)施方式中，步驟(3)所述陶瓷膜的孔徑為0.15～0.2μm，處理壓力為1.2～1.5mpa；
11、所述有機(jī)過(guò)濾膜的孔徑為8～10nm，處理壓力為2.0～2.3mpa。
12、在本專利技術(shù)的一個(gè)具體實(shí)施方式中，步驟(4)收集所述透過(guò)液后，還包括濃縮和干燥，得膠原三肽粉。
13、本專利技術(shù)還提供了利用上述制備方法制備得到的膠原三肽。
14、本專利技術(shù)還提供了上述膠原三肽在制備抗衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。
15、本專利技術(shù)還提供了一種抗衰老產(chǎn)品，活性成分包括上述膠原三肽，還包括輔料。
16、有益效果：本專利技術(shù)提供了一種膠原三肽的制備方法，相比于現(xiàn)有技術(shù)，羅非魚(yú)鱗無(wú)需預(yù)處理，而是直接將羅非魚(yú)鱗與耐高溫蛋白酶進(jìn)行酶解處理，而后依次利用堿性蛋白酶和中性蛋白酶進(jìn)行酶解處理，將酶解液依次進(jìn)行陶瓷膜和有機(jī)過(guò)濾膜過(guò)濾，而后利用納濾膜進(jìn)行截留，收集分子量小于400da的透過(guò)液，透過(guò)液中含以膠原三肽為主組成的活性肽。
17、本專利技術(shù)將透過(guò)液進(jìn)行濃縮和干燥后，利用膠原三肽粉進(jìn)行檢測(cè)，蛋白質(zhì)含量高達(dá)96.2％，灰分含量為1.1％；且所述膠原三肽粉中g(shù)ph(gly-pro-hyp)含量為3.8％，ctp(膠原蛋白三肽)含量為35.09％。
18、本專利技術(shù)對(duì)制備得到的膠原三肽粉進(jìn)行體外抗氧化活性評(píng)價(jià)，膠原三肽清除dpph的ic50值與維生素c比較接近，具有較好的dpph清除活性；同時(shí)，還對(duì)膠原三肽粉進(jìn)行斑馬魚(yú)測(cè)試，膠原三肽粉對(duì)模型斑馬魚(yú)的mtc分別為2000和250μg/ml，提示膠原三肽粉對(duì)過(guò)氧化氫誘發(fā)的斑馬魚(yú)衰老模型具有明顯的ros清除功效、β-半乳糖苷酶活性抑制功效和促進(jìn)端粒酶活性增強(qiáng)功效，表現(xiàn)出明顯的抗衰老作用，以滿足目前對(duì)高質(zhì)量活性肽的需求。
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1.一種膠原三肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)將耐高溫蛋白酶的水溶液與羅非魚(yú)鱗混合進(jìn)行高溫酶解預(yù)處理，得預(yù)處理液；所述高溫酶解預(yù)處理的溫度為80～85℃；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(1)所述高溫酶解預(yù)處理的pH值為8.8～9.0，高溫酶解預(yù)處理的時(shí)間為1h～1.5h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述制備方法，其特征在于，步驟(1)所述耐高溫蛋白酶和羅非魚(yú)鱗的質(zhì)量比為(0.8～1)kg：1000kg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(2)所述堿性蛋白酶的酶解pH值為8.8～9.0，酶解時(shí)間為3h～3.5h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(2)所述中性蛋白酶的酶解時(shí)間為1h～1.5h。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(3)所述陶瓷膜的孔徑為0.15～0.2μm，處理壓力為1.2～1.5MPa；
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(4)收集所述透過(guò)液后，還包括濃縮和干燥，得膠原三肽粉。
8.利用權(quán)利要
9.權(quán)利要求8所述膠原三肽在制備抗衰老產(chǎn)品中的應(yīng)用。
10.一種抗衰老產(chǎn)品，其特征在于，活性成分包括權(quán)利要求8所述膠原三肽，還包括輔料。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種膠原三肽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：(1)將耐高溫蛋白酶的水溶液與羅非魚(yú)鱗混合進(jìn)行高溫酶解預(yù)處理，得預(yù)處理液；所述高溫酶解預(yù)處理的溫度為80～85℃；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(1)所述高溫酶解預(yù)處理的ph值為8.8～9.0，高溫酶解預(yù)處理的時(shí)間為1h～1.5h。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述制備方法，其特征在于，步驟(1)所述耐高溫蛋白酶和羅非魚(yú)鱗的質(zhì)量比為(0.8～1)kg：1000kg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，步驟(2)所述堿性蛋白酶的酶解ph值為8.8～9.0，酶解時(shí)間為3h～3.5h。
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：牛立柱，張釗，張西平，張會(huì)，周西高，裴中立，王惠娟，魏瑋，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：中食都慶山東生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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