【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及植物病害防治和綠色新型農藥，具體涉及微藻納米硒的制備方法及生物轉化的納米硒在防治植物晚疫病中的應用。
技術介紹
1、馬鈴薯晚疫病是全球第一大作物病害，堪稱馬鈴薯的“癌癥”。馬鈴薯晚疫病的病原為致病疫霉(phytophthora?infestans)，屬卵菌綱(oomycetes)霜霉目(peronosporales)腐霉科(pythiaceae)疫霉屬(phytophthora)，是馬鈴薯和番茄晚疫病病原菌。在馬鈴薯晚疫病中，病原菌群體主要通過馬鈴薯種薯和殘肢落葉以風媒或水媒向其它茄科作物傳播并造成毀滅性病害循環。
2、化學防治仍是目前防治晚疫病的主要手段，但因我國大部分馬鈴薯產區的氣候條件適宜晚疫病的大流行，化學農藥施用次數很難降低，其存在嚴重的環境風險和農藥殘留問題。因此，開發與推廣新型、高效、生態友好的病害防治藥物和技術是我國乃至全球糧食生產的重要需求。近年來，納米科技的迅猛發展為現代農業提供了新的方法，納米農藥也因大比表面積、高滲透性、高防效等優勢成為綠色農藥劑型研發的前沿領域。如何開發與推廣新型、高效、生態友好的納米農藥產品和綠色防控技術，是我國乃至全球馬鈴薯生產的重要需求。
3、硒(se)是人和動物必需的微量元素，已廣泛用于治療腫瘤、骨節病(克山病)、糖尿病、心腦血管疾病等40余種疾病。硒具有促進植株生長、提高作物產量和質量、拮抗重金屬、抗逆、抗病蟲害等功能。在環境中，硒以se2+、se6+、se0和se2-四種化學價存在，每種化學價間都可以相互轉化并表現出不同的活性功能。其中，
4、目前還鮮見將生物納米硒應用于馬鈴薯晚疫病防治的報道。開發基于納米硒的馬鈴薯晚疫病生物農藥，對于馬鈴薯生產和環境保護具有重要意義。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是針對上述問題，提供一種微藻納米硒的制備方法及生物轉化的納米硒在防治植物晚疫病中的應用。
2、本專利技術為了實現其目的，采用的技術方案是：
3、本專利技術的第一方面提供一種微藻納米硒的制備方法，包括如下步驟：
4、s1、提取微藻胞內提取物
5、將微藻藻種在培養基中培養至生長遲緩期～穩定期，培養結束后取培養液離心收集藻體，用懸浮劑重新懸浮成藻漿懸浮液，取懸浮液破碎藻體細胞，離心后收集上清液(細胞破碎后細胞內的內含物溶解在懸浮劑中，通過離心收集)，得到微藻胞內提取物；
6、s2、微藻胞內提取物納米硒的合成
7、取微藻胞內提取物，向其中添加亞硒酸鈉，振蕩培養反應至溶液變紅，即得納米硒溶液。
8、優選地，步驟s1中，用懸浮劑重新懸浮成藻漿懸浮液并稀釋至濃度為od600＝8～12；所述懸浮劑選自pbs緩沖液、mops緩沖液、hepes緩沖液和tris緩沖液；
9、所述破碎細胞的方法為超聲破碎，優選為：懸浮液在冰浴中進行恒溫超聲波破碎，其超聲頻率是20～30khz，工作間歇4～6s/2～4s，超聲功率800～1200w，超聲時間25～35min；
10、取懸浮液破碎藻體細胞離心后得到的沉淀也用懸浮劑重新懸浮后離心收集上清液，以盡可能地提取細胞內含物，將多次獲得的上清合并為一份后用懸浮劑定容至原培養液的體積后用于步驟s2；
11、步驟s2中，將得到的紅色溶液制備為凍干粉：收集溶液樣品并直接用于冷凍干燥，得到凍干粉；
12、優選所述微藻為蛋白核小球藻；步驟s1中將微藻藻種在培養基中25～30℃培養至生長遲緩期～穩定期；步驟s2中所述振蕩培養條件為25～30℃、3000～30000lux光照條件下振蕩培養。
13、制備得到的紅色含納米硒溶液可以直接應用于植物病害防控，降低成本；進一步提純后可以應用于食品添加劑、醫學材料等領域；制備為凍干粉方便保存和應用。
14、本專利技術的第二方面提供生物轉化的納米硒在如下任一中的應用：
15、(1)抑制致病疫霉(phytophthora?infestans)中的應用；
16、(2)制備抑制致病疫霉的產品中的應用；
17、(3)防治植物晚疫病中的應用；
18、(4)制備防治植物晚疫病的產品中的應用；
19、(5)促進植物生長中的應用；
20、(6)制備植物生長促進劑中的應用。
21、上述的應用技術方案中，所述納米硒為微藻生物轉化獲得的納米硒；優選所述微藻為蛋白核小球藻。
22、上述的應用技術方案中，所述植物晚疫病包括馬鈴薯晚疫病和番茄晚疫病。
23、上述的應用技術方案中，納米硒的應用濃度為4～30mg/l，優選4～25mg/l或者4～10mg/l或者9～23mg/l。
24、上述的應用技術方案中，在防治植物晚疫病中的應用中，納米硒的應用方法為：將納米硒配制為溶液后用于浸種、拌種、灌根或者植株葉面噴施。
25、本專利技術的第三方面提供一種產品，所述產品用于抑制致病疫霉，或者用于防治植物晚疫病，所述產品的活性成分為生物轉化獲得的納米硒。
26、上述的產品技術方案中，所述納米硒由微藻生物轉化獲得，優選所述微藻為蛋白核小球藻。
27、所述產品中納米硒的工作濃度為4～30mg/l，優選4～25mg/l或者4～10mg/l或者9～23mg/l。
28、本專利技術的有益效果是：
29、本專利技術一方面提供了一種新的微藻納米硒的制備方法，相較于已有報道的在微藻活體培養液中加入亞硒酸鈉轉化為納米硒后取藻體破碎細胞收集納米硒的方法，本專利技術方法在生物轉化納米硒時不需要使用微藻活體，可以避免后續的復雜的納米硒分離純化步驟，胞內提取物轉化獲得的納米硒可以直接應用。
30、另一方面，本專利技術提供了生物轉化的納米硒在防治植物晚疫病中的應用，本專利技術實驗證實，生物轉化獲得的納米硒抑制馬鈴薯晚疫病致病菌致病疫霉的效果顯著優于化學合成的納米硒，生物轉化的納米硒在防治馬鈴薯晚疫病中效果顯著，且有顯著的促本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種微藻納米硒的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：
3.生物轉化的納米硒在如下任一中的應用：
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述納米硒為微藻生物轉化獲得的納米硒；優選所述微藻為蛋白核小球藻。
5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述植物晚疫病包括馬鈴薯晚疫病和番茄晚疫病。
6.根據權利要求3至5任一項所述的應用，其特征在于：納米硒的應用濃度為4～30mg/L，優選4～25mg/L或者4～10mg/L或者9～23mg/L。
7.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：在防治植物晚疫病中的應用中，納米硒的應用方法為：將納米硒配制為溶液后用于浸種、拌種、灌根或者植株葉面噴施。
8.一種產品，所述產品用于抑制致病疫霉，或者用于防治植物晚疫病，其特征在于：所述產品的活性成分為生物轉化獲得的納米硒。
9.根據權利要求8所述的產品，其特征在于：所述納米硒由微藻生物轉化獲得，優選所述微藻為蛋白核小球藻。
10.根據權利要
...【技術特征摘要】
1.一種微藻納米硒的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：
3.生物轉化的納米硒在如下任一中的應用：
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述納米硒為微藻生物轉化獲得的納米硒；優選所述微藻為蛋白核小球藻。
5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于：所述植物晚疫病包括馬鈴薯晚疫病和番茄晚疫病。
6.根據權利要求3至5任一項所述的應用，其特征在于：納米硒的應用濃度為4～30mg/l，優選4～25mg/l或者4～10mg/l或者9～23mg/l。
<...【專利技術屬性】
技術研發人員：羅秀媚，任茂智，胡貝貝，郗奕滔，穆罕默德·阿布·巴卡爾·薩迪克，
申請(專利權)人：中國農業科學院都市農業研究所，
類型：發明
國別省市：
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