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    一種DC細胞培養基及制備方法技術

    技術編號:44364869 閱讀:2 留言:0更新日期:2025-02-25 09:45
    本發明專利技術涉及細胞培養技術領域,具體提供了一種DC細胞培養基及制備方法,DC細胞培養基由質量份數為36%的包含雞血藤、兩面針、烏藥、靈芝、槐耳和人參的中藥提取物和補足余量的完全培養基混合而成。本發明專利技術通過中藥提取物和完全培養基結合,側重于促進細胞自我修復和分泌細胞因子,減少外來因子和細菌的污染影響,提高成熟DC細胞的長期存活率。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及細胞培養,尤其涉及一種dc細胞培養基及制備方法。


    技術介紹

    1、人骨髓樹突狀細胞又稱dc細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;dc細胞分為成熟dc細胞和未成熟dc細胞,成熟的dc細胞由未成熟dc細胞進一步經tnfα、lps等誘導而成,多數呈懸浮生長,細胞形態呈圓形,該細胞屬于高度分化細胞,屬于不增殖細胞群,高倍鏡或者電鏡下可觀察到表面大量粗細不等的樹枝樣突起。成熟dc細胞表面高表達主要組織相容性復合物mhc以及cd80、cd86等共刺激分子,進而激活t淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調控、并維持免疫應答的中心環節。隨著細胞商業化的發展,成熟dc細胞不再需要實驗者從外周血開始分離誘導逐步培養,直接采購成熟dc細胞成為可能。

    2、但現有dc細胞培養基技術仍多為促進dc細胞成熟的誘導培養,未專門關注成熟dc細胞的存活率保持,不利于成熟dc細胞的長期使用。因此,提供一種提高成熟dc細胞長期存活率的培養基及其制備方法具有重要的現實意義。


    技術實現思路

    1、為了解決上述問題,一方面,本專利技術提供了一種dc細胞培養基的制備方法,所述dc細胞培養基的制備方法包括如下步驟:

    2、步驟一:提取中藥提取物:取質量分數為14~24%的雞血藤、質量分數為10~19%的兩面針、質量分數為7~15%的烏藥、質量分數為4~10%的靈芝、質量分數為4~9%的槐耳、質量分數為2~5%的人參和補齊其余質量分數的純水,將上述各物質切碎至過20目篩后按50kg/h的投料速度加入轉速2800r/min且出料細度設為300目的膠體磨5℃低溫研磨至出料得待提取物,加入質量為所述待提取物質量4倍的85%乙醇18℃混合浸沒15h后400目過濾得過濾液;將所述過濾液于71℃且真空度800mbar減壓蒸餾至無液體連續流出,收集剩余液0.22μm薄膜過濾得所述中藥提取物;

    3、步驟二:將質量份數為36%的所述中藥提取物和補足余量的完全培養基混合得所述dc細胞培養基。

    4、進一步地,所述雞血藤的質量分數為19%。

    5、進一步地,所述兩面針的質量分數為15%。

    6、進一步地,所述烏藥的質量分數為11%。

    7、進一步地,所述靈芝的質量分數為7%。

    8、進一步地,所述槐耳的質量分數為6%。

    9、進一步地,所述人參的質量分數為3%。

    10、另一方面,本專利技術提供了一種上述dc細胞培養基的制備方法制備的dc細胞培養基。

    11、通過本專利技術能夠帶來如下有益效果:

    12、本專利技術通過中藥提取物和完全培養基結合,側重于促進細胞自我修復和分泌細胞因子,減少外來因子和細菌的污染影響,提高成熟dc細胞的長期存活率。

    13、本專利技術的雞血藤和兩面針的提取物的黃酮類和多酚類等活性物質具有較強的自由基清除能力,可能保護成熟dc細胞免受氧化損傷,還可能抑制炎癥介質的產生,減輕炎癥反應對成熟dc細胞的損傷;本專利技術的烏藥提取物可能具有抗菌活性,能夠較長時間保持成熟dc細胞培養環境的無菌態,減少細菌及其代謝產物對成熟dc細胞的影響;本專利技術的靈芝和槐耳的提取物的多糖等活性物質可能促進成熟dc細胞的免疫活性,有助于成熟dc細胞維持成熟態;本專利技術的人參的提取物可能促進成熟dc細胞各因子的分泌,有助于提高細胞活性;上述雞血藤、兩面針、烏藥、靈芝、槐耳和人參一起配合,在本專利技術的制備工藝下一起提高成熟dc細胞的長期存活率。需要注意的是本專利技術的各組分配比和工藝參數也會影響整個體系的穩定性從而影響效果。

    本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.一種DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述DC細胞培養基的制備方法包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述雞血藤的質量分數為19%。

    3.根據權利要求1所述的DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述兩面針的質量分數為15%。

    4.根據權利要求1所述的DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述烏藥的質量分數為11%。

    5.根據權利要求1所述的DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述靈芝的質量分數為7%。

    6.根據權利要求1所述的DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述槐耳的質量分數為6%。

    7.根據權利要求1所述的DC細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述人參的質量分數為3%。

    8.一種如權利要求1~7任一所述的DC細胞培養基的制備方法制備的DC細胞培養基。

    【技術特征摘要】

    1.一種dc細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述dc細胞培養基的制備方法包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的dc細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述雞血藤的質量分數為19%。

    3.根據權利要求1所述的dc細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述兩面針的質量分數為15%。

    4.根據權利要求1所述的dc細胞培養基的制備方法,其特征在于,所述烏藥的質量分數為11%...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:祝天成袁丹丹胡曉倩華南
    申請(專利權)人:麗山健康山東集團有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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