【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及kdm6b蛋白在增強(qiáng)根尖乳頭干細(xì)胞的軟骨分化能力中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、關(guān)節(jié)軟骨是一種高度專業(yè)化的結(jié)締組織，覆蓋在滑膜關(guān)節(jié)的骨端，其主要功能是促進(jìn)關(guān)節(jié)的順暢運(yùn)動(dòng)并有效分配機(jī)械負(fù)荷。關(guān)節(jié)軟骨的獨(dú)特結(jié)構(gòu)由稀疏分布的軟骨細(xì)胞和豐富的細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular?matrix，ecm）組成。ecm由膠原纖維、蛋白聚糖和糖胺聚糖構(gòu)成，ecm的結(jié)構(gòu)對(duì)于維持軟骨的功能至關(guān)重要。然而，由于軟骨細(xì)胞稀少且血供有限，關(guān)節(jié)軟骨易受退行性疾病、創(chuàng)傷和老化的影響而受損。這些損傷通常導(dǎo)致軟骨不可逆的結(jié)構(gòu)和功能變化，進(jìn)而引發(fā)諸如骨關(guān)節(jié)炎等嚴(yán)重的關(guān)節(jié)疾病。骨關(guān)節(jié)炎的特點(diǎn)是關(guān)節(jié)軟骨及鄰近組織出現(xiàn)不可逆的異常和功能障礙，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)完全破壞。傳統(tǒng)的治療方法，如關(guān)節(jié)鏡清創(chuàng)術(shù)、微骨折手術(shù)和磨削關(guān)節(jié)成形術(shù)，通常難以有效恢復(fù)軟骨的完整性和功能。因此，亟需開發(fā)新的、有效的策略來修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨。
2、近年來，間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal?stem?cells，msc）因其軟骨分化能力而成為修復(fù)軟骨損傷的一種有前景的方法。牙髓干細(xì)胞（dpscs）、人脫落乳牙干細(xì)胞（shed）、牙周韌帶干細(xì)胞（pdlscs）和根尖乳頭干細(xì)胞（stem?cells?from?apical?papilla，scaps）等牙源性間充質(zhì)干細(xì)胞表現(xiàn)出強(qiáng)大的自我更新和分化潛力。其中，scaps在增殖和分化能力方面優(yōu)于dpscs和pdlscs，是軟骨組織工程的理想細(xì)胞來源。然而，截至目前，scaps向軟骨細(xì)胞分化過程中，缺乏有效的誘導(dǎo)酶，尚不能
3、kdm6b是一種組蛋白去甲基化酶，可特異性去除h3k27me3的三甲基化標(biāo)記，這是一種與基因抑制相關(guān)的修飾。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的為如何促進(jìn)軟骨再生和損傷修復(fù)。
2、本專利技術(shù)首先保護(hù)kdm6b蛋白、能夠誘導(dǎo)kdm6b蛋白表達(dá)的物質(zhì)和/或用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的用途為如下c1）至c8）中的至少一種：c1）增強(qiáng)軟骨分化能力；c2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；c3）促進(jìn)軟骨再生；c4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；c5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；c6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；c7）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨再生；c8）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨損傷修復(fù)。
3、上述應(yīng)用中，所述用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)可為z1）或z2）或z3）：
4、z1）寡聚核酸shrna；所述寡聚核酸shrna的核苷酸序列如seq?id?no：3所示；
5、z2）以所述寡聚核酸shrna為靶點(diǎn)，由shrna表達(dá)系統(tǒng)合成的shrna；
6、z3）kdm6b蛋白。
7、上述應(yīng)用中，所述shrna表達(dá)系統(tǒng)可為慢病毒表達(dá)系統(tǒng)。
8、上述應(yīng)用中，所述z2）具體可為實(shí)施例提及的質(zhì)粒hes1sh，即以hes1?shrna：5’-gctaaggtgtttggaggcttc-3’（seq?id?no：3）為靶點(diǎn)，由吉碼基因公司構(gòu)建的質(zhì)粒hes1sh（即重組慢病毒）。
9、本專利技術(shù)還保護(hù)kdm6b蛋白和/或hes1蛋白作為藥物靶點(diǎn)在篩選藥物中的應(yīng)用；所述藥物的用途為如下c1）至c8）中的至少一種：c1）增強(qiáng)軟骨分化能力；c2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；c3）促進(jìn)軟骨再生；c4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；c5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；c6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；c7）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨再生；c8）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨損傷修復(fù)。
10、上述應(yīng)用中，所述hes1蛋白作為藥物靶點(diǎn)可為所述寡聚核酸shrna作為藥物靶點(diǎn)。
11、本專利技術(shù)還保護(hù)一種產(chǎn)品，其活性成分可包括kdm6b蛋白、能夠誘導(dǎo)kdm6b蛋白表達(dá)的物質(zhì)和/或用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)；
12、所述產(chǎn)品的用途為如下c1）至c8）中的至少一種：c1）增強(qiáng)軟骨分化能力；c2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；c3）促進(jìn)軟骨再生；c4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；c5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；c6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；c7）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨再生；c8）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨損傷修復(fù)。
13、上述產(chǎn)品中，所述藥物還可包括藥用載體。
14、上述任一所述的產(chǎn)品中，所述用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)可為z1）或z2）或z3）：
15、z1）寡聚核酸shrna；所述寡聚核酸shrna的核苷酸序列如seq?id?no：3所示；
16、z2）以所述寡聚核酸shrna為靶點(diǎn)，由shrna表達(dá)系統(tǒng)合成的shrna；
17、z3）kdm6b蛋白。
18、上述產(chǎn)品中，所述shrna表達(dá)系統(tǒng)可為慢病毒表達(dá)系統(tǒng)。
19、上述產(chǎn)品中，所述z2）具體可為實(shí)施例提及的質(zhì)粒hes1sh，即以hes1?shrna：5’-gctaaggtgtttggaggcttc-3’（seq?id?no：3）為靶點(diǎn)，由吉碼基因公司構(gòu)建的質(zhì)粒hes1sh（即重組慢病毒）。
20、上述任一所述產(chǎn)品可為藥物。
21、上述任一所述的產(chǎn)品具體可由kdm6b蛋白、能夠誘導(dǎo)kdm6b蛋白表達(dá)的物質(zhì)和/或用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)組成。
22、上述任一所述用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)也屬于本專利技術(shù)的保護(hù)范圍。
23、上述任一所述間充質(zhì)干細(xì)胞可為人牙源性間充質(zhì)干細(xì)胞。
24、所述人牙源性間充質(zhì)干細(xì)胞可為根尖乳頭干細(xì)胞（stem?cells?from?apicalpapilla，scaps）、牙髓干細(xì)胞（dpscs）、人脫落乳牙干細(xì)胞（shed）或牙周韌帶干細(xì)胞（pdlscs）。
25、本專利技術(shù)還保護(hù)檢測(cè)hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備用于選擇軟骨再生和/或軟骨損傷修復(fù)患者的治療藥物的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
26、上述應(yīng)用中，所述治療藥物可為kdm6b蛋白。
27、本專利技術(shù)還保護(hù)檢測(cè)kdm6b蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備用于選擇軟骨再生和/或軟骨損傷修復(fù)患者的治療藥物的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
28、基于間充質(zhì)干細(xì)胞（msc）的療法已成為治療關(guān)節(jié)軟骨損傷的一種有前景的方法。然而，如何增強(qiáng)msc的軟骨分化潛能仍然是一個(gè)重大挑戰(zhàn)。本申請(qǐng)通過大量實(shí)驗(yàn)（如阿利新藍(lán)染色、球團(tuán)培養(yǎng)系統(tǒng)或細(xì)胞移植到兔膝軟骨缺損模型），評(píng)估了kdm6b在scaps的軟骨分化能力的作用。結(jié)果表明，kdm6b增強(qiáng)了scaps中aggrecan、col2a1、col5、糖胺聚糖和膠原纖維的表達(dá)；在體內(nèi)，過表達(dá)kdm6b的scaps顯著促進(jìn)了膝關(guān)節(jié)軟骨和軟骨下骨的修復(fù)和再生。同時(shí)通過本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.KDM6B蛋白、能夠誘導(dǎo)KDM6B蛋白表達(dá)的物質(zhì)和/或用于抑制HES1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的用途為如下C1）至C8）中的至少一種：C1）增強(qiáng)軟骨分化能力；C2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；C3）促進(jìn)軟骨再生；C4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；C5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；C6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；C7）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨再生；C8）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨損傷修復(fù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述用于抑制HES1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)為z1）或z2）或z3）：
3.KDM6B蛋白和/或HES1蛋白作為藥物靶點(diǎn)在篩選藥物中的應(yīng)用；所述藥物的用途為如下C1）至C8）中的至少一種：C1）增強(qiáng)軟骨分化能力；C2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；C3）促進(jìn)軟骨再生；C4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；C5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；C6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；C7）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨再生；C8）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨損傷修復(fù)。
4.一種產(chǎn)品，其活性成分包括KDM6B蛋白、能夠誘
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的產(chǎn)品，其特征在于：所述藥物還包括藥用載體。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的產(chǎn)品，其特征在于：所述用于抑制HES1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)為z1）或z2）或z3）：
7.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的應(yīng)用或權(quán)利要求4所述的產(chǎn)品，其特征在于：所述間充質(zhì)干細(xì)胞為人牙源性間充質(zhì)干細(xì)胞；
8.權(quán)利要求1或2中所述用于抑制HES1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)。
9.檢測(cè)KDM6B蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備用于選擇軟骨再生和/或軟骨損傷修復(fù)患者的治療藥物的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
10.檢測(cè)HES1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備用于選擇軟骨再生和/或軟骨損傷修復(fù)患者的治療藥物的產(chǎn)品中的應(yīng)用；
...【技術(shù)特征摘要】
1.kdm6b蛋白、能夠誘導(dǎo)kdm6b蛋白表達(dá)的物質(zhì)和/或用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)在制備產(chǎn)品中的應(yīng)用；所述產(chǎn)品的用途為如下c1）至c8）中的至少一種：c1）增強(qiáng)軟骨分化能力；c2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；c3）促進(jìn)軟骨再生；c4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；c5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；c6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；c7）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨再生；c8）促進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨損傷修復(fù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于：所述用于抑制hes1蛋白活性和/或表達(dá)量的物質(zhì)為z1）或z2）或z3）：
3.kdm6b蛋白和/或hes1蛋白作為藥物靶點(diǎn)在篩選藥物中的應(yīng)用；所述藥物的用途為如下c1）至c8）中的至少一種：c1）增強(qiáng)軟骨分化能力；c2）提高成軟骨細(xì)胞分化潛能；c3）促進(jìn)軟骨再生；c4）促進(jìn)軟骨損傷修復(fù)；c5）增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的軟骨分化能力；c6）提高間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨細(xì)胞分化潛能；c7）促進(jìn)間...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張琛，連曉萌，靳路遠(yuǎn)，朱夢(mèng)遠(yuǎn)，胡美君，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京口腔醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評(píng)論。發(fā)表了對(duì)其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。