【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及對植物病害防治，具體涉及硫藤黃素在防治植物疫霉病上的應用。
技術介紹
1、疫霉菌寄主范圍廣，主要侵害林木、果樹、蔬菜、花卉、棉、麻、油料和中草藥材等上萬種植物，對農業、糧食和林業生產造成嚴重的威脅。由于疫霉菌對寄主植物的破壞性強，危害性大，往往給農業生產帶來嚴重損失，因而由疫霉菌所致的植物病害通常稱為“疫病”。例如馬鈴薯晚疫病曾造成愛爾蘭大饑荒，近百萬人餓死，另有200多萬人移民他鄉。傳統的防治方法嚴重依賴于化學殺菌劑，但是該方法常常引起病原菌耐藥性，且對環境和人體健康有害。目前，缺乏對疫霉菌有效的綠色農藥防治藥劑，因此，迫切需要探索“綠色、高效、低毒、健康、持續”的防治藥劑。
2、硫藤黃素(thiolutin，簡稱thl)分子式為c8h8n2o2s2，相對分子量為228.29，是一種二硫吡咯酮類化合物，主要來自于革蘭氏陽性菌，具有抗菌活性的黃色晶體物質。已有報道硫藤黃素對金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、腫瘤細胞、香梨腐爛病、志賀氏桿菌、梨黑斑病、鮑曼不動桿菌具有拮抗活性。但是，目前還沒有關于硫藤黃素在防治植物疫霉病方面的報道。
技術實現思路
1、本專利技術目的是提供硫藤黃素的制備方法及其應用，本專利技術首次發現硫藤黃素對植物疫霉菌：煙草疫霉(phytophthora?nicotiana)、樟疫霉(p.cinnamomi)、棕櫚疫霉(p.palmivora)、辣椒疫霉(p.capsici)、豇豆疫霉(p.vignae)、瓜疫霉(p.meloni
2、為了實現上述專利技術目的，本專利技術提出下述技術方案：
3、硫藤黃素在防治植物疫霉病中的應用。所述疫霉病為煙草疫霉(phytophthoranicotiana)、樟疫霉(p.cinnamomi)、棕櫚疫霉(p.palmivora)、辣椒疫霉(p.capsici)、豇豆疫霉(p.vignae)、瓜疫霉(p.melonis)、芋疫霉(p.colocasiae)、大豆疫霉(p.sojae)中的一種或兩種以上任意組合引起的植物病害。
4、優選的，硫藤黃素的制備方法包括以下步驟：
5、將鏈霉菌streptomyces?sp.asg80接種到于isp2液體培養基中，于恒溫振蕩箱中28℃，180rpm振蕩培養3d；按照1％(體積百分含量)接種量接種到120l改良黃豆粉浸汁培養基發酵培養基中，28℃、180rpm振蕩培養8d得到發酵液；
6、將發酵液過濾得到菌液，對菌液進行提取后得到發酵提取物；
7、所述發酵提取物中進行分離，得到硫藤黃素。
8、優選的，對所述菌液進行提取的方法為：將所述菌液用乙酸乙酯萃取，并將乙酸乙酯相濃縮至干，得到發酵粗提取物；
9、優選的，所述分離的方法為：將所述發酵粗提取物用3倍體積的甲醇進行溶解。通過布氏漏斗進行過濾，溶解液中為組分a1，布氏漏斗中的固體為組分a2；
10、將組分a2進行凝膠柱層析分離，用甲醇溶劑進行洗脫，得到3個組分，按照組分的流出順序，依次記為a2-1組分、a2-2組分、a2-3組分；
11、將a2-2組分進行高效液相色譜制備，得到硫藤黃素；
12、所述高效液相色譜純化所用的流動相為75％甲醇和25％水(體積百分比)；
13、在本專利技術一個實施方式中，公開了硫藤黃素在防治劍麻斑馬紋病(phytophthoranicotiana)中的應用，應用方式為盆栽實驗。施用1000倍液的硫藤黃素防治劍麻斑馬紋病，該實施方式防治效果達到85.81％。
14、本專利技術首次發現硫藤黃素對植物疫霉的抑菌活性，將硫藤黃素應用于防治植物疫霉病中，防治效果好，具有廣闊的前景；進一步的，本專利技術還提供了制備硫藤黃素的方法。實施例結果顯示，硫藤黃素能夠破壞煙草疫霉菌絲的細胞壁和細胞膜，使菌絲變形、細胞器受損、菌絲體內活性氧(ros)增加，抑制煙草疫霉生長，且抑制煙草疫霉的ec50值為0.8266μg/ml，從而有效防治由煙草疫霉引起的劍麻斑馬紋病的發生，防效高達85.81％。以上結果表明，硫藤黃素具有顯著的抑制植物疫霉的活性。
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1.一種硫藤黃素的提取方法，包括以下步驟：
2.硫藤黃素或權利要求1所述的方法在防治植物疫霉病上的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述植物病原疫霉菌為煙草疫霉(Phytophthora?nicotiana)、樟疫霉(P.cinnamomi)、棕櫚疫霉(P.palmivora)、辣椒疫霉(P.capsici)、豇豆疫霉(P.vignae)、瓜疫霉(P.melonis)、芋疫霉(P.colocasiae)、大豆疫霉(P.sojae)中至少一種。
4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，通過根部灌施的方式施用于植物，達到防治植物疫霉病的目的。
5.硫藤黃素在改變煙草疫霉菌絲形態中的應用。
【技術特征摘要】
1.一種硫藤黃素的提取方法，包括以下步驟：
2.硫藤黃素或權利要求1所述的方法在防治植物疫霉病上的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述植物病原疫霉菌為煙草疫霉(phytophthora?nicotiana)、樟疫霉(p.cinnamomi)、棕櫚疫霉(p.palmivora)、辣椒疫霉...
【專利技術屬性】
技術研發人員：吳偉懷，徐剛，易克賢，梁艷瓊，譚施北，黃興，賀春萍，陳河龍，陸英，鄭肖蘭，
申請(專利權)人：中國熱帶農業科學院環境與植物保護研究所，
類型：發明
國別省市：
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