【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及藥物分析化學，更具體的說是涉及一種奧拉帕利及有關物質的檢測方法。
技術介紹
1、卵巢癌(ovarian?carcinoma，oc)是婦科腫瘤中最為惡性的腫瘤，大多數患者發現時已是晚期。卵巢癌惡性程度高、復發率高、治療難度大，目前臨床治療晚期卵巢癌患者的方法主要是手術聯合化療，但是1～2年內的復發率高達70％～80％。此外，卵巢癌致死率居女性生殖系統腫瘤首位，多次復發后對化療藥物的耐藥性增加，5年生存率僅有47.4％。
2、作為全球首個獲批的parp抑制劑—奧拉帕利，利用腫瘤dna損傷反應途徑的缺陷，優先殺死癌細胞。該藥于2014年12月在美國獲美國食品藥品監督管理局批準上市，用于既往接受過兩次以上抗腫瘤治療且攜帶胚系突變型乳腺癌易感基因(breast?cancersceptibility?gene，brca)的晚期卵巢癌患者。隨后在歐盟、日本等多地獲批，且適應證不斷擴大，目前已經覆蓋乳腺癌、卵巢癌、輸卵管癌、腹膜癌、前列腺癌和胰腺癌。
3、奧拉帕利，英文名：olaparib，cas號為763113-22-0，分子式為c24h23fn4o3，分子量434.46；白色-微黃色粉末；水中幾乎不溶，無吸濕性；logp＝1.49；結構式如下：
4、
5、專利cn116930347a公開了一種奧拉帕利原料藥的雜質檢測方法，可同時測定奧拉帕利原料藥中的三個特定雜質，但該方法采用檸檬酸鹽作為流動相可能對儀器和色譜柱造成損傷，且該方法雖有較好的分離度但色譜峰的拖尾因子以及與相鄰雜質的部
6、專利cn117470978a公開了一種奧拉帕利原料藥的有關物質檢測方法，可同時測定7種雜質，但該方法的方法學驗證限度較寬松，且系統適用性溶液的色譜圖出現了部分峰重疊的問題，還需進一步優化。
7、基于現有報道奧拉帕利有關物質的檢測方法，本專利技術選擇乙腈及磷酸溶液作為流動相，建立了一種分離度高，準確度好且操作簡單的方法，為保證奧拉帕利藥品安全、有效、質量可控，建立了科學、合理，能有效控制藥品的內在質量的分析方法。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術提供了一種奧拉帕利及有關物質的檢測方法，采用特定的液相色譜分析條件來分離奧拉帕利及4個有關物質，可以有效的實現奧拉帕利及4個有關物質的分離及定量測定，以減少有關物質對最終奧拉帕利產品質量的影響。
2、為了實現上述目的，本專利技術提供一種奧拉帕利的有關物質檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜法，條件包括：
3、色譜柱：c18色譜柱；
4、填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；
5、流動相a：0.01～1.0wt％磷酸溶液；
6、流動相b：70～100wt％乙腈溶液；
7、流速：0.8～1.2ml/min；
8、檢測波長：270～280nm；
9、進樣體積：1～20μl；
10、采用梯度洗脫。
11、優選的，所述c18色譜柱內徑為1～5mm，長度為100～300mm，填料粒徑為1～20μm。
12、優選的，所述梯度洗脫，以體積百分數計，梯度洗脫程序如下：
13、 時間(分鐘) 流動相a(％) 流動相b(％) 0～16 65～75 35～25 17～25 60～70 40～30 26～28 15～5 85～95 29～32 85～95 15～5 33～36 65～75 35～25
14、。
15、進一步優選的，所述梯度洗脫，以體積百分數計，梯度洗脫程序如下：
16、
17、進一步的，所述奧拉帕利有關物質包括奧拉帕利和已知雜質，所述已知雜質包括奧拉帕利酸、脫氟奧拉帕利、正丙基奧拉帕利、奧拉帕利pip二聚體中的一種或多種，結構式和化學名如下：
18、
19、
20、進一步的，一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，包括以下步驟：
21、(1)樣品配制：
22、對照品儲備液配制：精密稱取奧拉帕利至10ml容量瓶，加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對照品儲備液；
23、有關物質儲備液的配制：分別精密稱取等量的奧拉帕利酸、脫氟奧拉帕利、正丙基奧拉帕利至10ml容量瓶，加稀釋劑溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密稱取同等量的奧拉帕利pip二聚體至10ml容量瓶，加入適量dmso使其溶解，再加入純乙腈稀釋至刻度，搖勻；即得奧拉帕利有關物質儲備液；
24、系統適用性溶液的配制：精密量取奧拉帕利對照品儲備液及奧拉帕利有關物質溶液置于同一10ml容量瓶，用稀釋劑稀釋至刻度，作為系統適用性溶液；
25、(2)高效液相色譜法測定：精密量取系統適用性溶液，注入高效液相色譜儀，依據上述高效液相色譜法條件所述進行檢測，記錄色譜圖并進行數據分析。
26、優選的，步驟(1)中，所述對照品儲備液中奧拉帕利的濃度為0.1～0.2mg/ml，所述有關物質儲備液中奧拉帕利的濃度為1～40μg/ml。
27、優選的，步驟(1)中，所述稀釋劑為乙腈和水按體積比(1～10):(1～10)配制。
28、上述技術方案的有益效果為：上述稀釋劑的組成比例對出峰時間以及分離度的影響無顯著性差異。
29、優選的，步驟(1)中，所述奧拉帕利pip二聚體與所述dmso的固液比為50mg:1ml。
30、進一步的，所述奧拉帕利有關物質高效液相色譜法測定結果根據《9102藥品雜質分析指導原則》制定雜質限度要求，所述奧拉帕利有關物質的高效液相色譜法測定結果中雜質峰面積按雜質對照品外標法計算。
31、優選的，所述高效液相色譜法測定的結果中，單個雜質不超過0.15％，總雜不超過0.5％。
32、優選的，所述雜質對照品外標法包括以下步驟：(1)配制各已知雜質對照品的不同濃度的線性溶液,并進行高本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜法，條件包括：
2.根據權利要求1所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，所述C18色譜柱內徑為1～5mm，長度為100～300mm，填料粒徑為1～20μm。
3.根據權利要求1所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫，以體積百分數計，梯度洗脫程序如下：
4.根據權利要求1所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述對照品儲備液中每1mL中含0.1～2mg奧拉帕利，所述有關物質儲備液中每1mL含1～40μg奧拉帕利。
6.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述稀釋劑為乙腈和水按體積比(1～10):(1～10)配制。
7.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述奧拉帕利pip二聚體與所述DMSO的固液比為50mg:1mL。p>
8.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，系統適用性溶液的配制中，所述對照品儲備液及有關物質儲備液的體積比為10:1，所述系統適用性溶液中奧拉帕利的濃度為30μg/mL。
9.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(2)中，所述高效液相色譜法測定的結果中，單個雜質不超過0.15％，總雜不超過0.5％。
10.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利的有關物質檢測方法，其特征在于，步驟(2)中，所述高效液相色譜法測定的結果中，奧拉帕利有關物質中各雜質峰之間、以及雜質峰與主峰之間的分離度>2.0，且奧拉帕利及有關物質峰的拖尾因子不大于1.5。
...【技術特征摘要】
1.一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜法，條件包括：
2.根據權利要求1所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，所述c18色譜柱內徑為1～5mm，長度為100～300mm，填料粒徑為1～20μm。
3.根據權利要求1所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，所述梯度洗脫，以體積百分數計，梯度洗脫程序如下：
4.根據權利要求1所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述對照品儲備液中每1ml中含0.1～2mg奧拉帕利，所述有關物質儲備液中每1ml含1～40μg奧拉帕利。
6.根據權利要求4所述的一種奧拉帕利有關物質的檢測方法，其特征在于，步驟(1)中，所述稀釋劑為乙腈和水按體積比(1～10):(1～10...
【專利技術屬性】
技術研發人員：楊建宏，高琦，左文寶，張茜，付亭亭，趙建軍，
申請(專利權)人：寧夏醫科大學，
類型：發明
國別省市：
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