【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及藥物，尤其涉及一種腫瘤化療藥物脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、化學(xué)藥物治療是對抗腫瘤的主要治療手段之一。多種蒽環(huán)類藥物，如阿霉素（dox）、表阿霉素、柔紅霉素等在臨床上廣泛用于腫瘤的治療，然而這些藥物的普通注射液在臨床上存在許多毒副作用。脂質(zhì)體是具有良好成藥性的納米藥物載體，可以用于改善所負(fù)載的化療藥物的藥代動力學(xué)行為，減少其毒副作用。然而采用ph梯度法或者硫酸銨梯度法制備的dox脂質(zhì)體在腫瘤組織中難以釋放藥物，導(dǎo)致dox不易進(jìn)入腫瘤細(xì)胞發(fā)揮殺傷作用，且有可能引起過敏反應(yīng)（文獻(xiàn)nanomedicine.?2012,?8(2):176-84）。
2、許多過渡金屬離子可以與蒽環(huán)類化療藥物發(fā)生絡(luò)合作用。具有過渡金屬離子梯度的脂質(zhì)體可以有效負(fù)載蒽環(huán)類化療藥物。并且過渡金屬離子-蒽環(huán)類藥物脂質(zhì)體的藥物釋放受ph的影響，可以在腫瘤酸性環(huán)境中提供較高的有效化療藥物濃度。然而，目前含過渡金屬離子的脂質(zhì)體主要采用非連續(xù)生產(chǎn)技術(shù)，在制造過程中存在的加熱步驟容易加速過渡金屬離子的水解沉淀反應(yīng)，而且過渡金屬鹽溶液也容易腐蝕金屬設(shè)備，導(dǎo)致脂質(zhì)體不穩(wěn)定或品質(zhì)難以滿足臨床藥品要求。加入金屬離子絡(luò)合劑三乙醇胺可以抑制這種水解和腐蝕作用，盡管三乙醇胺是一種低毒性溶劑，但在藥品中的含量按法規(guī)仍然受到一定限制。因此，開發(fā)滿足臨床藥品質(zhì)量要求的含過渡金屬離子的脂質(zhì)體蒽環(huán)類化療藥物仍然是目前亟需解決的問題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、有鑒于此，本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問題在于提供一種腫瘤化療藥物脂
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供了一種含過渡金屬離子的腫瘤化療藥物脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：
3、s1）將脂質(zhì)分子的乙醇溶液作為有機(jī)相，將含過渡金屬乙酸鹽的水溶液作為水相，采用微流控技術(shù)，將有機(jī)相和水相注入帶有微通道的微流控芯片內(nèi)，使有機(jī)相和水相在微通道內(nèi)混合，收集流出的過渡金屬乙酸鹽納米脂質(zhì)體溶液；
4、s2）對上述納米脂質(zhì)體進(jìn)行媒介交換，除去外水相中的過渡金屬乙酸鹽，獲得僅內(nèi)水相含有過渡金屬乙酸鹽的脂質(zhì)體；
5、s3）將上述僅內(nèi)水相含有過渡金屬乙酸鹽的納米脂質(zhì)體與蒽環(huán)類化療藥物混合，調(diào)節(jié)ph至近中性~弱堿性，加熱促進(jìn)脂質(zhì)體對藥物分子的遠(yuǎn)程負(fù)載，純化后得到負(fù)載化療藥物的納米脂質(zhì)體。
6、本專利技術(shù)選擇在乙醇-水混合溶劑中具有良好溶解性的過渡金屬乙酸鹽，實(shí)現(xiàn)了用微流控技術(shù)在常溫、不接觸金屬部件的條件下連續(xù)制備含有高濃度過渡金屬鹽的納米脂質(zhì)體。
7、所述脂質(zhì)分子可以為能夠用于形成脂質(zhì)體脂質(zhì)雙分子層的各種脂質(zhì)分子，優(yōu)選包括天然磷脂、氫化磷脂、合成磷脂、膽固醇、磷脂-聚乙二醇、磷脂-聚乙二醇-葉酸衍生物、磷脂-聚乙二醇-甘露糖衍生物或其它磷脂-聚乙二醇-腫瘤特異性靶向分子衍生物的一種或多種，以及可溶于脂質(zhì)體磷脂雙分子層的其它親脂類分子。
8、在本專利技術(shù)的一些具體實(shí)施例中，所述脂質(zhì)分子包括二硬脂酰磷脂酰膽堿（dspc）和膽固醇（ch）。
9、所述二硬脂酰磷脂酰膽堿（dspc）和膽固醇（ch）中，所述膽固醇的摩爾濃度優(yōu)選為20%~45%。
10、在本專利技術(shù)的一些具體實(shí)施例中，所述脂質(zhì)分子包括二硬脂酰磷脂酰膽堿（dspc）、膽固醇（ch）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）。
11、所述二硬脂酰磷脂酰膽堿（dspc）、膽固醇（ch）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）的摩爾比優(yōu)選為60：35：5。
12、在本專利技術(shù)的一些具體實(shí)施例中，所述脂質(zhì)分子包括二硬脂酰磷脂酰膽堿（dspc）、膽固醇（ch）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-葉酸（dspe-peg2000-fa）。
13、所述二硬脂酰磷脂酰膽堿（dspc）、膽固醇（ch）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-葉酸（dspe-peg2000-fa）的摩爾比優(yōu)選為60：35：3：2。
14、所述脂質(zhì)分子的乙醇溶液中，所述脂質(zhì)分子的濃度優(yōu)選為5-20?mm。
15、所述過渡金屬優(yōu)選包括銅、鋅、錳中的一種或多種，或其乙酸鹽可溶于乙醇的其它過渡金屬。
16、所述過渡金屬乙酸鹽水溶液中，所述過渡金屬乙酸鹽的濃度優(yōu)選為0.1~0.3?mol/l。
17、采用微流控芯片技術(shù)混合有機(jī)相和水相的過程中，可通過選擇不同規(guī)格的芯片和溶液組成，調(diào)整優(yōu)化流速比（frr）和總流速（tfr），以獲得不同粒徑的脂質(zhì)體。
18、優(yōu)選的，所述總流速（tfr）為1.0~15?ml/min，所述水相和有機(jī)相的流速比（frr）為2：1~5：1。
19、優(yōu)選的，所述微流控芯片技術(shù)采用precigenome?nanogenerator微流控設(shè)備（蘇州銳訊生物科技公司產(chǎn)品）。
20、收集經(jīng)過微流控芯片微通道流出的乙醇-水混合溶液，得到顆粒內(nèi)、外水相均為過渡金屬乙酸鹽溶液的納米脂質(zhì)體。
21、所述納米脂質(zhì)體的粒徑優(yōu)選為50~150?nm。
22、然后進(jìn)行媒介交換，將脂質(zhì)體外水相替換為不含原有過渡金屬乙酸鹽的水溶液。
23、所述媒介交換的方法優(yōu)選為凝膠柱分離、透析或超濾法。
24、采用凝膠柱分離純化微流控制備的脂質(zhì)體時，所用洗脫液優(yōu)選采用不含所述過渡金屬離子和乙酸離子的酸性ph緩沖液。
25、采用透析、超濾等媒介交換法處理微流控制備的脂質(zhì)體時，初次所用透析液或超濾液優(yōu)選采用酸性ph緩沖液，隨后所用透析液或超濾液改為不含所述過渡金屬離子的nacl溶液、葡萄糖溶液，或者ph緩沖液。
26、收集所得到的脂質(zhì)體，其內(nèi)水相含有過渡金屬乙酸鹽，而外水相不含原有過渡金屬乙酸鹽，即同時具有過渡金屬離子梯度和乙酸根離子梯度。
27、該脂質(zhì)體可與藥物混合，實(shí)現(xiàn)高效遠(yuǎn)程載藥。
28、基于此，本專利技術(shù)另一方面提供了一種脂質(zhì)體藥物，由上述制備方法制備的過渡金屬乙酸鹽梯度脂質(zhì)體負(fù)載化療藥物后得到。
29、優(yōu)選的，將上述脂質(zhì)體與化療藥物的水溶液混合，加入緩沖液調(diào)節(jié)混合體系為近中性至弱堿性，并加熱一段時間，即可實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體對藥物分子的遠(yuǎn)程負(fù)載。
30、優(yōu)選的，用緩沖液調(diào)節(jié)ph至6.8~7.6。
31、優(yōu)選的，緩沖液采用磷酸鹽緩沖液（pbs）。優(yōu)選的，所述加熱的溫度高于脂質(zhì)體脂質(zhì)相變溫度，但不超過65℃，優(yōu)選為50~60℃，包括但不限于50、55或60℃。優(yōu)選的，所述加熱的時間為5~15?min。
32、上述藥物的種類為弱堿性且可與過渡金屬離子絡(luò)合的藥物，進(jìn)一步優(yōu)選為弱堿性蒽環(huán)類化療藥物。
33、在本專利技術(shù)的一些具體實(shí)施例中，所述弱堿性蒽環(huán)類化療藥物為阿霉素、表阿霉素、柔紅霉本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種腫瘤化療藥物脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脂質(zhì)分子包括天然磷脂、氫化磷脂、合成磷脂、膽固醇、磷脂-聚乙二醇、磷脂-聚乙二醇-葉酸衍生物、磷脂-聚乙二醇-甘露糖衍生物或其它磷脂-聚乙二醇-腫瘤特異性靶向分子衍生物的一種或多種，以及可溶于脂質(zhì)體磷脂雙分子層的其它親脂類分子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述過渡金屬包括銅、鋅、錳中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脂質(zhì)分子的乙醇溶液中，所述脂質(zhì)分子的濃度為5-20?mM；
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述微流控芯片技術(shù)中，總流速為1~15?mL/min，水相和有機(jī)相的流速比為2：1~5：1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2）中媒介交換的方法為凝膠柱分離、透析或超濾法。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S3）中蒽環(huán)類化療藥物為阿霉素、表阿霉素、柔紅霉素、吡喃阿霉素、阿柔比星、伊達(dá)比星和米托
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S3）中脂質(zhì)體中總脂類與化療藥物的摩爾比為1：（0.1~0.5）；
9.權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的制備方法制備的腫瘤化療藥物脂質(zhì)體。
10.權(quán)利要求1~8任一項(xiàng)所述的制備方法制備的腫瘤化療藥物脂質(zhì)體或權(quán)利要求9所述的腫瘤化療藥物脂質(zhì)體在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種腫瘤化療藥物脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脂質(zhì)分子包括天然磷脂、氫化磷脂、合成磷脂、膽固醇、磷脂-聚乙二醇、磷脂-聚乙二醇-葉酸衍生物、磷脂-聚乙二醇-甘露糖衍生物或其它磷脂-聚乙二醇-腫瘤特異性靶向分子衍生物的一種或多種，以及可溶于脂質(zhì)體磷脂雙分子層的其它親脂類分子。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述過渡金屬包括銅、鋅、錳中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述脂質(zhì)分子的乙醇溶液中，所述脂質(zhì)分子的濃度為5-20?mm；
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述微流控芯片技術(shù)中，總流速為1~15?ml/min，水...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李世紅，張淼淼，楊瑜，何靜，繆麗燕，
申請(專利權(quán))人：蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：
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