【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于中藥配方顆粒，具體涉及一種符合天麻配方顆粒質量要求的天麻飲片炮制方法、指紋圖譜構建及其應用。
技術介紹
1、天麻配方顆粒ybz-pfkl-2021122作為國家藥品標準已頒布實施，該標準以水作為溶劑，處方及制成量為4：1，規定其成品含量以天麻素的峰面積為對照，分別乘以校正因子，計算天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷e、巴利森苷b、巴利森苷c、巴利森苷的含量應為43.0-80.0mg/g，指紋圖譜規定成品指紋圖譜中應分別呈現與參照物色譜峰保留時間相同的色譜峰，采用mark峰匹配，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜相似度不得低于0.90。
2、天麻為蘭科多年植物天麻gastrodia?elata?bl.的干燥塊莖，為中國藥典收載品種。藥典對天麻原藥材有特征圖譜上的要求，規定天麻原藥材供試品色譜中應呈現6個特征峰，并應與對照藥材參照物色譜中的6個特征峰相對應，其中峰1、峰2應與天麻素對照品和對羥基苯甲醇對照品參照物峰保留時間相一致，峰3、4、5、6相對應的物質分別為巴利森苷e、巴利森苷b、巴利森苷c、巴利森苷，含量指標要求為天麻素和對羥基苯甲醇的總量。天麻飲片項下則沒有飲片特征圖譜的要求，飲片含量限度要求與原藥材一致。
3、天麻是一種常用的大宗中藥材，廣泛分布于安徽、湖北、陜西、四川、云南、貴州等地，且已被上述各省藥監部門列入趁鮮加工品種目錄中，然而天麻飲片的炮制頗為講究，自古就有“九蒸九曬”的說法，中國藥典對天麻飲片炮制工藝要求較為簡潔，原藥材洗凈，潤透或蒸軟，切薄片，干
4、有鑒于此，特提出本專利技術。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種符合天麻配方顆粒質量要求的天麻飲片炮制方法，并構建天麻飲片指紋圖譜，通過該炮制方法可以炮制出符合天麻配方顆粒質量要求的天麻飲片，構建的指紋圖譜及檢測方法可以判定天麻飲片指紋圖譜相似度，當相似度符合要求時，所制備的天麻配方顆粒指紋圖譜符合國家標準要求，達到準確、客觀、有效控制天麻飲片質量，保證所制備的天麻配方顆粒指紋圖譜符合要求。
2、為實現上述目的，本專利技術采取的技術方案為：
3、一種天麻飲片的指紋圖譜構建方法，包括以下步驟：
4、步驟一、取天麻原藥材，洗凈，置于蒸箱中蒸制5h～10h，然后切成薄片，室溫攤涼后在50℃～60℃下低溫干燥，篩去細小粉末，即得天麻飲片；
5、步驟二、將制得的天麻飲片置于煎藥機中，加入飲片量8倍的水，浸泡30min，武火煮沸后，文火煎煮60min，趁熱過濾，備用；第二次加入飲片量6倍水，武火煮沸后，文火煎煮40min，趁熱過濾，備用；合并兩次提取濾液，60℃減壓濃縮至料液比為1：1，60℃下的相對密度1.05-1.10，噴霧干燥，加入輔料，混勻，進行制粒，得天麻配方顆粒成品，每1g配方顆粒相當于飲片4g；
6、步驟三、取步驟二制備的天麻配方顆粒，按照國家藥品標準ybz-pfkl-2021122的要求檢測天麻配方顆粒含量、指紋圖譜、浸出物、性狀、薄層鑒別指標；
7、步驟四、按照步驟三中各指標均檢測合格的天麻配方顆粒所對應的天麻飲片炮制工藝，再炮制出15批不同批次的天麻飲片，分別執行步驟二和三；
8、步驟五、取步驟四中各指標均合格的天麻配方顆粒所對應的天麻飲片作為樣品，進行如下步驟：
9、a)取天麻飲片，粉碎，過四號藥典篩，取篩下物作為供試品樣品；
10、b)取供試品樣品采用溶劑溶解，提取，得到供試品溶液；
11、c)將所述供試品溶液采用超高效液相色譜測定，得到各批次天麻飲片uplc特征圖譜；
12、d)將各批次藥材對應的uplc特征圖譜導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統中，采用mark峰匹配，生成共有峰模式圖譜，構建天麻飲片對照指紋圖譜；
13、步驟六、將不同蒸制時間天麻飲片分別按照步驟五所述方法進行飲片特征圖譜檢測，并與構建的天麻飲片指紋圖譜進行mark峰匹配，計算其與對照指紋圖譜的相似度；
14、步驟七、以步驟六中不同蒸制時間天麻飲片指紋圖譜相抵度為橫坐標，對應天麻配方顆粒指紋圖譜相似度為縱坐標，進行線性回歸方程擬合，根據擬合的線性回歸方程，若天麻配方顆粒指紋圖譜相似度不得低于0.90，所對應的天麻飲片指紋圖譜相似度則不得低于0.76。
15、本專利技術中，步驟一中所述蒸制時間為5h、6h、7h、8h、9h、10h，低溫干燥溫度為55℃。
16、本專利技術中，步驟四中所述15批不同批次天麻飲片炮制時的蒸制時間范圍為5h-10h。
17、在本專利技術中，步驟五所述天麻飲片粉碎篩下物稱樣量為1.0g。
18、在本專利技術中，步驟五所述供試品溶液制備方法具體為：
19、取天麻飲片粉末1.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入水50ml，加熱回流1小時，冷卻，過濾，精密量取續濾液10ml，蒸干，加入30％甲醇溶解定容至5ml，超聲處理(功率250w，頻率40khz)30分鐘，放冷后用0.22μm針頭過濾器過濾，即得。
20、步驟五所述超高效液相色譜法色譜條件為：以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，柱長為150mm，柱內徑為2.1mm，粒徑為1.6μm，柱溫為30℃；流速為每分鐘0.30ml，檢測波長220nm；進樣量為1μl，理論板數按天麻素計算應不低于3000；以乙腈為流動相a，以0.05％磷酸溶液為流動相b，按以下梯度洗脫程序進行洗脫：
21、
22、在本專利技術中，所述c18柱尺寸為2.1×150mm，1.6μm，柱溫為30℃。
23、在本專利技術中，所述流速為每分鐘0.30ml，檢測波長為220nm；進樣量1μl，理論板數按天麻素計算應不低3000。
24、在本專利技術中，所述0.05％磷酸溶液為流動相b為體積分數。
25、在本專利技術中，還包括制備對照品參照物溶液，具體為：取天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷b、巴利森苷c、巴利森苷e對照品，精密稱定，置容量瓶中，加甲醇溶解并混勻，分別制成每1ml含200μg、5μg、200μg、150μg、50μg、200μg的溶液，作為對照品參照物溶液。
26、本專利技術所述mark峰匹配，mark峰指天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷b、巴利森苷c和巴利森苷e這6個特征峰，分別在相同的色譜條件下進樣，采用天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷b、巴利森苷c和巴利森苷e對照品來進行色譜峰定位和指認。
27、步驟六中所述不同蒸制時間天本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種天麻飲片的指紋圖譜構建及檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟一中蒸制時間為5h、6h、7h、8h、9h、10h，低溫干燥溫度為55℃。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟四中所述15批不同批次天麻飲片炮制時的蒸制時間范圍為5h-10h。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟五所述供試品溶液制備方法具體為：
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，獲取天麻飲片指紋圖譜的色譜條件為：
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，還包括制備對照品參照物溶液，具體為：取天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E對照品，精密稱定，置容量瓶中，加甲醇溶解并混勻，分別制成每1mL含200μg、5μg、200μg、150μg、50μg、200μg的溶液，作為對照品參照物溶液。
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，Mark峰指天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷E這6個特征峰，分別在相同的色譜
8.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟七中以天麻飲片指紋圖譜相似度為橫坐標(X)，以天麻飲片所對應的天麻配方顆粒指紋圖譜相似度為縱坐標(Y)，進行線性回歸方程擬合，擬合的線性回歸方程為：
...【技術特征摘要】
1.一種天麻飲片的指紋圖譜構建及檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟一中蒸制時間為5h、6h、7h、8h、9h、10h，低溫干燥溫度為55℃。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟四中所述15批不同批次天麻飲片炮制時的蒸制時間范圍為5h-10h。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟五所述供試品溶液制備方法具體為：
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，獲取天麻飲片指紋圖譜的色譜條件為：
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，還包括制備對照品參照物溶液，具體為：取天麻素、對羥基苯甲醇、巴利森苷、巴利森苷b、巴利森苷c...
【專利技術屬性】
技術研發人員：丁苗，林露，談小飛，陳紅，趙玉婷，黃茜茜，翟紅偉，皮朝，胡輝，張帆，王海濤，黃海華，楊強，
申請(專利權)人：勁牌持正堂藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：
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