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【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,屬于生物工程。
技術(shù)介紹
1、乳腺癌是世界范圍內(nèi)女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤,具有復(fù)雜的遺傳與病理特征。早篩早診、靶向藥物與免疫治療的應(yīng)用使乳腺癌患者的生存率顯著提高,但復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移仍然威脅著乳腺癌患者的生存,患者個(gè)體化治療仍是臨床診療難點(diǎn)。乳腺癌類器官運(yùn)用三維培養(yǎng)技術(shù)模擬腫瘤微環(huán)境,在體外培養(yǎng)乳腺癌腫瘤細(xì)胞,形成與體內(nèi)腫瘤類似的組織結(jié)構(gòu),具有操作簡便、周期短和通量高等優(yōu)勢(shì),逐漸被廣泛應(yīng)用于藥物敏感性篩選、個(gè)體化用藥和乳腺癌生物學(xué)研究等領(lǐng)域。
2、在長期培養(yǎng)或多代培養(yǎng)中,難以維持乳腺類器官的結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定,這可能影響到研究的連續(xù)性和準(zhǔn)確性,而且生長因子無法精確的輸送到細(xì)胞中,因此亟需一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于提供一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,以解決上述
技術(shù)介紹
中提出的問題。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的,本專利技術(shù)提供如下技術(shù)方案:一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:
3、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
4、dmem/f12培養(yǎng)基500ml
5、
6、生長因子:
7、egf??????????????????????????????????????10-30ng/ml
8、igf???????????????????????????????
9、hgf??????????????????????????????????????10-50ng/ml
10、其他添加劑:
11、
12、其中生長因子通過納米顆粒遞送生長因子的方法輸送到乳腺癌細(xì)胞中;
13、具體方法步驟如下:
14、步驟一:選擇聚合物納米顆粒作為生長因子的載體;
15、步驟二:將生長因子和聚合物納米顆粒通過吸附法將二者結(jié)合,確保生長因子的穩(wěn)定性和載體的可控釋放;
16、步驟三:將納米顆粒遞送的生長因子添加到乳腺癌類器官細(xì)胞培養(yǎng)基中。
17、作為本專利技術(shù)的一種優(yōu)選技術(shù)方案,所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:
18、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
19、
20、
21、生長因子:
22、egf???????????????????????????????????????10ng/ml
23、igf???????????????????????????????????????30ng/ml
24、hgf???????????????????????????????????????10ng/ml
25、其他添加劑:
26、
27、作為本專利技術(shù)的一種優(yōu)選技術(shù)方案,所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比
28、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
29、
30、生長因子:
31、egf???????????????????????????????????????20ng/ml
32、igf???????????????????????????????????????50ng/ml
33、hgf???????????????????????????????????????30ng/ml
34、其他添加劑:
35、
36、作為本專利技術(shù)的一種優(yōu)選技術(shù)方案,所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:
37、基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
38、
39、生長因子:
40、egf???????????????????????????????????????30ng/ml
41、igf???????????????????????????????????????70ng/ml
42、hgf???????????????????????????????????????50ng/ml
43、其他添加劑:
44、
45、
46、作為本專利技術(shù)的一種優(yōu)選技術(shù)方案,所述胰蛋白酶抑制劑包括阿普羅替寧、氨磺腙、大豆胰蛋白酶抑制劑或者苯甲酰胺中的其中一種或者多種。
47、作為本專利技術(shù)的一種優(yōu)選技術(shù)方案,所述炎癥調(diào)節(jié)劑包括黃酮醇和花青素天然植物化合物組成或者環(huán)氧化酶中的其中一種或者多種。
48、作為本專利技術(shù)的一種優(yōu)選技術(shù)方案,所述乳腺癌類器官的培養(yǎng)方法包括以下步驟:
49、主要包括以下內(nèi)容:
50、步驟一:細(xì)胞來源和培養(yǎng)基準(zhǔn)備:選擇乳腺癌細(xì)胞,并將乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方放置在培養(yǎng)基中,并將乳腺癌細(xì)胞放置其中進(jìn)行培養(yǎng);
51、步驟二:細(xì)胞傳代和擴(kuò)增:將細(xì)胞傳代至培養(yǎng)皿中,使其適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境并進(jìn)行擴(kuò)增,定期更換培養(yǎng)基;
52、步驟三:三維細(xì)胞培養(yǎng):為了更好地模擬乳腺癌組織的生長環(huán)境,利用支架、凝膠或多孔材料來培養(yǎng)乳腺癌類器官;
53、步驟四:細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察:定期觀察細(xì)胞的形態(tài)和狀態(tài),檢查細(xì)胞的附著情況、增殖狀態(tài)和可能的異常變化。
54、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本專利技術(shù)的有益效果是:本專利技術(shù)一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,通過將生長因子和聚合物納米顆粒通過吸附法將二者結(jié)合,確保生長因子的穩(wěn)定性和載體的可控釋放,以提高生長因子的穩(wěn)定性、控制釋放速率,并精確的輸送到特定的細(xì)胞或者組織中,從而促進(jìn)細(xì)胞生長和發(fā)育,而且通過在培養(yǎng)基中設(shè)置的炎癥調(diào)節(jié)劑,能夠在細(xì)胞多代培養(yǎng)中抑制炎癥的發(fā)生,從而維持組織的穩(wěn)定性和健康狀態(tài)。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于,所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述胰蛋白酶抑制劑包括阿普羅替寧、氨磺腙、大豆胰蛋白酶抑制劑或者苯甲酰胺中的其中一種或者多種。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述炎癥調(diào)節(jié)劑包括黃酮醇和花青素天然植物化合物組成或者環(huán)氧化酶中的其中一種或者多種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于,所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比:基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合配方按照以下原料進(jìn)行配比基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種乳腺癌類器官培養(yǎng)試劑組合及其培養(yǎng)方法,其特征在于:所述乳腺癌類器官培養(yǎng)試...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:孫濤,祁婉舒,
申請(qǐng)(專利權(quán))人:零壹人工智能科技研究院南京有限公司,
類型:發(fā)明
國別省市:
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