【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種組成型啟動子及其用途，特別是涉及一種組成型的捕光葉綠素a/b結合蛋白(cab)基因啟動子及其用途。
技術介紹
1、應用轉基因技術可在植物物種中引入農學上希望的性狀或特征。通常，希望的性狀包括改善營養價值品質、增加產量、賦予有害生物抗性或病害抗性、增加干旱和脅迫耐受性、改善園藝品質(例如，色素沉著和生長)、賦予除草劑耐受性、使得能夠由植物產生工業上有用的化合物和/或材料和/或使得能夠產生藥物。眾所周知，合適的調控元件的存在才能在植物細胞中獲得異源基因的高效表達。
2、調控元件包括增強子、啟動子、前導序列、內含子和3’非翻譯區域，并且可用于植物分子生物學和植物遺傳工程領域中。啟動子在控制基因表達方面起關鍵作用，其可以決定異源dna序列在生物體內表達的時間和位置。植物基因工程中常用的啟動子按其作用方式和功能可分為三類，例如，在某些物理或化學信號的刺激下可提高基因轉錄水平的誘導型啟動子、或僅在植物特定組織中表達基因的組織特異性啟動子、或對整個植物組織進行組成型表達的組成型啟動子。因此可以在轉化載體的構建體中包含核心啟動子序列，以便引起異源dna序列在轉基因植物中以不同方式表達。
3、通過使用基因工程技術從基因方面改變植物并且因此產生具有特定有用性狀的植物產品需要獲得多種啟動子。啟動子數目的積累將使植物基因產品開發過程中能夠以所需水平和在所期望細胞位置表達重組dna分子，進而使作物獲得預期性狀。例如，通過植物轉化技術產生包含堆疊在單個基因組基因座的多個異源基因的轉基因植物物種的方法被稱為基因堆積方
4、捕光葉綠素a/b結合蛋白(cab)基因啟動子作為一類新的組成型啟動子，其在植物的大多數組織和許多類型細胞中都顯示出明顯較高的驅動基因表達活性。捕光葉綠素a/b結合蛋白(cab)基因啟動子可以與不同類型或不同來源的啟動子共同使用，以避免基因沉默的現象。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供一種新穎的組成型啟動子及其用途，所述組成型啟動子可將目的異源核苷酸序列在植物中組成型表達。
2、為實現上述目的，本專利技術提供了一種組成型啟動子，所述組成型啟動子的核苷酸序列包括：(1)與seq?id?no:1或2所示的核苷酸序列具有至少95％序列同一性的核苷酸序列；或(2)具有seq?id?no:1或2所示的核苷酸序列。
3、為實現上述目的，本專利技術還提供了一種表達盒，其包含與目的異源核苷酸序列有效連接的所述組成型啟動子。
4、為實現上述目的，本專利技術還提供了一種dna構建體，其包含所述表達盒。
5、為實現上述目的，本專利技術還提供了一種重組載體，其包含所述dna構建體。
6、為實現上述目的，本專利技術還提供了一種在植物中表達目的異源核苷酸序列的方法，包括：將所述表達盒或所述dna構建體穩定的整合進植物細胞中，使得所述目的異源核苷酸序列在所述植物中表達。
7、優選地，所述目的異源核苷酸序列編碼非生物應激抗性蛋白質或生物應激抗性蛋白質。
8、進一步地，所述非生物應激抗性蛋白質為除草劑耐受性蛋白質。所述生物應激抗性蛋白質為昆蟲抗性蛋白質。
9、為實現上述目的，本專利技術還提供了一種所述組成型啟動子用于在植物組織中組成型表達目的異源核苷酸序列的用途。
10、進一步地，所述目的異源核苷酸序列編碼目的蛋白質。
11、在上述技術方案的基礎上，所述植物包括單子葉植物和雙子葉植物。
12、進一步優選地，所述雙子葉植物包括但不限于苜蓿、菜豆、花椰菜、甘藍、胡蘿卜、芹菜、棉花、黃瓜、茄子、萵苣、甜瓜、豌豆、胡椒、西葫蘆、蘿卜、油菜、菠菜、大豆、南瓜、番茄、擬南芥、花生或西瓜；優選地，所述雙子葉植物是指黃瓜、大豆、擬南芥、煙草、棉花、花生或油菜。所述單子葉植物包括但不限于玉米、水稻、高粱、小麥、大麥、黑麥、粟、甘蔗、燕麥或草坪草；優選地，所述單子葉植物是指玉米、水稻、高粱、小麥、大麥、粟、甘蔗或燕麥。
13、提供以下描述和定義是為了更好地限定本專利技術以及指導本領域普通技術人員實踐本專利技術。除非另有說明，術語應根據相關領域的普通技術人員的常規用法來理解。
14、本專利技術中術語“核酸(序列)”或“dna分子”是指基因組或合成來源的雙鏈dna分子，即從5’(上游)末端讀取到3’(下游)末端的脫氧核苷酸堿基的聚合物或dna分子。術語“dna序列”是指dna分子的核苷酸序列。
15、本專利技術中術語“啟動子”是指位于轉錄起點上游和/或下游的區域或序列，其參與識別和結合rna聚合酶和其它蛋白，以啟動轉錄。啟動子包含轉錄起點附近的必需核酸序列，例如就聚合酶ii型啟動子來說包含tata元件。指導植物組成型表達的啟動子的示例包括但不限于，來源于花椰菜花葉病毒的35s啟動子、玉米ubi啟動子、水稻gos2基因的啟動子等；在植物的一些組織內如在綠色組織中指導編碼序列的表達水平高于植物的其他組織(可通過常規rna試驗進行測定)的啟動子的示例包括但不限于pep羧化酶啟動子；指導創傷誘導的表達模式的啟動子是指當植物經受機械或由昆蟲啃食引起的創傷時，啟動子調控下的編碼序列的表達較正常生長條件下有顯著提高，創傷誘導啟動子的示例包括但不限于，馬鈴薯和西紅柿的蛋白酶抑制基因(pinⅰ和pinⅱ)和玉米蛋白酶抑制基因(mpi)的啟動子。
16、本專利技術中術語“啟動子活性”是指調節元件啟動轉錄的能力。啟動子活性可以在體內(例如在細胞中)或體外發生。
17、本專利技術中術語“組成型啟動子”是指在該類啟動子的控制下，目的異源核苷酸序列的表達大體恒定在一定水平上，在植物的不同組織和/或不同生長發育階段表達水平沒有明顯差異。所述組織為植物體中由來源相同和執行同一功能的一種或多種類型細胞集合而成的結構單位，例如保護組織、輸導組織、營養組織、機械組織、分生組織，幾種不同的組織有機配合、緊密聯系，形成不同的器官，不同的器官之間互相配合，更有效地完成有機體的整個生命活動過程。所述生長發育階段可根據植物形態、機能的差異劃分為胚胎階段、幼苗階段、成熟階段和衰老階段。本專利技術中術語“組成型表達”是指目的異源核苷酸序列在植物的不同組織和/或不同生長發育階段都以大體上一致的水平進行表達。
18、本專利技術中術語“蛋白質表達”為轉錄的rna分子翻譯成蛋白質分子的任何模式。蛋白質表達可通過其下列特性來表征：時間、空間、發育或形態，還可通過定量或定性指示來表征。
19、在制備表達盒時，可以操作各種dna片段，以提供方向合適的以及處于適當閱讀框中的dna序列。還可以在表達盒中包含報告基因或者選擇性標本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種組成型啟動子，其特征在于，其核苷酸序列包括：
2.一種表達盒，其特征在于，包含與目的異源核苷酸序列有效連接的權利要求1所述組成型啟動子。
3.一種DNA構建體，其特征在于，包含權利要求2所述表達盒。
4.一種重組載體，其特征在于，包含權利要求3所述DNA構建體。
5.一種在植物中表達目的異源核苷酸序列的方法，其特征在于，包括：將權利要求2所述表達盒或權利要求3所述DNA構建體穩定的整合進植物細胞中，使得所述目的異源核苷酸序列在所述植物中表達。
6.根據權利要求5所述在植物中表達目的異源核苷酸序列的方法，其特征在于，所述目的異源核苷酸序列編碼非生物應激抗性蛋白質或生物應激抗性蛋白質。
7.根據權利要求6所述在植物中表達目的異源核苷酸序列的方法，其特征在于，所述非生物應激抗性蛋白質為除草劑耐受性蛋白質。
8.根據權利要求6或7所述在植物中表達目的異源核苷酸序列的方法，其特征在于，所述生物應激抗性蛋白質為昆蟲抗性蛋白質。
9.一種權利要求1所述組成型啟動子用于在植物組織中組成型表達目
10.根據權利要求9所述用途，所述目的異源核苷酸序列編碼目的蛋白質。
...【技術特征摘要】
1.一種組成型啟動子，其特征在于，其核苷酸序列包括：
2.一種表達盒，其特征在于，包含與目的異源核苷酸序列有效連接的權利要求1所述組成型啟動子。
3.一種dna構建體，其特征在于，包含權利要求2所述表達盒。
4.一種重組載體，其特征在于，包含權利要求3所述dna構建體。
5.一種在植物中表達目的異源核苷酸序列的方法，其特征在于，包括：將權利要求2所述表達盒或權利要求3所述dna構建體穩定的整合進植物細胞中，使得所述目的異源核苷酸序列在所述植物中表達。
6.根據權利要求5所述在植物中表達...
【專利技術屬性】
技術研發人員：馮婷婷，汪勝勇，
申請(專利權)人：北京國銳生科有限公司，
類型：發明
國別省市：
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