【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物，特別是涉及一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種(xanthomonas?citri?subsp.citri)，是黃單胞桿菌屬，革蘭氏陰性細(xì)菌，菌體短桿狀，兩端鈍圓，大小0.5～0.7×1.5～2.0μm，單個排列，鞭毛單根極生，不產(chǎn)生芽孢，有莢膜，氧化酶陰性，接觸酶陽性。柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種在na培養(yǎng)基上呈表面光滑的黃色圓形菌落，邊緣整齊，粘稠，并稍隆起。該細(xì)菌生長適宜溫度為20～30℃，最低5～10℃，最高35℃，致死溫度為55℃10分鐘，最適ph值為6.6。
2、柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種是導(dǎo)致柑橘潰瘍病的病原菌。柑橘潰瘍病在我國柑橘產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，主要危害葉片、果實和枝梢，形成木栓化、兩面隆起的火山口狀開裂病斑，后期可造成落葉、落果和枯梢，嚴(yán)重降低柑橘產(chǎn)量和品質(zhì)，且柑橘樹一旦感染終身帶菌。我國柑橘潰瘍病每年發(fā)生面積超過1000萬畝，造成直接經(jīng)濟(jì)損失超5億元。目前對柑橘潰瘍病的防治主要依賴化學(xué)農(nóng)藥銅制劑和抗生素。銅制劑使用不當(dāng)易產(chǎn)生藥害，還會導(dǎo)致紅蜘蛛爆發(fā)。抗生素長期使用易造成病菌產(chǎn)生耐藥性。且化學(xué)農(nóng)藥沒有選擇性，殺死病原菌的同時，也殺滅了對農(nóng)作物有益的微生物。長期、大量施用化學(xué)藥劑，還造成植物體內(nèi)農(nóng)藥殘留累積，影響農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)。
3、噬菌體是感染細(xì)菌的一類病毒，主要化學(xué)成分由蛋白質(zhì)和核酸組成，廣泛存在于土壤、空氣、水及生物體中，具有較強(qiáng)的專一性。烈性噬菌體可以在短時間內(nèi)完成吸附、侵入、復(fù)制、組裝和裂解細(xì)胞，達(dá)到殺滅細(xì)菌的效果。自從freder
4、目前，關(guān)于柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體的研究幾乎還是空白，噬菌體療法用于控制由柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種引起的柑橘潰瘍病也鮮有報道。因此，開發(fā)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體來應(yīng)用于相關(guān)病原菌的防治，具有積極的意義。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的是提供一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體及其應(yīng)用，以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題。該柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體可以特異性地滅活柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種，僅需少量初始噬菌體即可完成大量增殖，為工業(yè)化生產(chǎn)噬菌體殺菌劑提供優(yōu)質(zhì)噬菌體株來源。
2、為實現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供了如下方案：
3、本專利技術(shù)提供一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體(xanthomonas?phage)xp1，其于2024年7月4日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國.武漢.武漢大學(xué)，保藏編號為cctcc?no：m?20241486。
4、本專利技術(shù)還提供上述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1在制備防治柑橘潰瘍病的農(nóng)藥或肥料中的應(yīng)用，所述柑橘潰瘍病是柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種所導(dǎo)致。
5、本專利技術(shù)還提供一種防治柑橘潰瘍病的農(nóng)藥或肥料，活性成分包括上述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1。
6、進(jìn)一步地，所述農(nóng)藥或肥料還包括農(nóng)藥或肥料上可接受的輔料。
7、本專利技術(shù)還提供上述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1在制備柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的消毒劑中的應(yīng)用。
8、本專利技術(shù)還提供一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的消毒劑，活性成分包括上述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1。
9、進(jìn)一步地，所述消毒劑為液體制劑。
10、進(jìn)一步地，所述消毒劑包括輔料；所述輔料包括水性載體。
11、進(jìn)一步地，所述水性載體為sm緩沖液、磷酸鹽緩沖液、nb培養(yǎng)基、lb培養(yǎng)基或氯游離水。
12、本專利技術(shù)還提供上述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1在制備柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的檢測產(chǎn)品中的應(yīng)用。
13、本專利技術(shù)公開了以下技術(shù)效果：
14、(1)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1是從自然界中分離的烈性噬菌體，不含毒力基因或不良基因，其dna無法編碼可能引起潛在健康風(fēng)險的蛋白，不存在攜帶溶源基因的可能；本專利技術(shù)未對供試噬菌體進(jìn)行任何遺傳修飾。
15、(2)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1具有較高的發(fā)酵效價，其在發(fā)酵時，感染宿主柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的最佳moi為0.01，是具有高度親和性及裂解能力的烈性噬菌體，以最佳moi發(fā)酵可在12h內(nèi)達(dá)到1.13×109pfu/ml以上的效價。柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1可以特異性地滅活柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種，僅需少量初始噬菌體即可完成大量增殖，為工業(yè)化生產(chǎn)噬菌體殺菌劑提供優(yōu)質(zhì)噬菌體株來源；本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)本專利技術(shù)的記載及本領(lǐng)域常識將本專利技術(shù)提供的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1制備成應(yīng)用于檢測、消毒及植物保護(hù)等方面的各種產(chǎn)品并加以工業(yè)應(yīng)用。
16、(3)本專利技術(shù)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1為嚴(yán)格的烈性噬菌體且對宿主菌具有高度專一性和裂解性并且具有較廣的宿主范圍，對來自8個不同區(qū)縣的典型柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的裂解率高達(dá)100％。柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1可作為應(yīng)用于環(huán)境消毒的各種產(chǎn)品的有效成分，例如包括但不限于以液體浸泡、噴灑、與含水性載體聯(lián)合使用等形式對配水系統(tǒng)、灌溉設(shè)施、公共及私人設(shè)施或其他環(huán)境表面進(jìn)行消毒，可有效控制目標(biāo)細(xì)菌的生長及活性。液體浸泡、噴灑形式包括但不限于洗滌劑、消毒劑、去污劑等；含水性載體包括但不限于sm緩沖液、磷酸鹽緩沖液、nb培養(yǎng)基、lb培養(yǎng)基、氯游離水等。
17、(4)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1與非宿主性致病性細(xì)菌的互作，無法識別6株供試非宿主性致病性細(xì)菌中的任何一株，特異性良好。
18、(5)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1穩(wěn)定性良好，在-80～28℃條件下，可在24h內(nèi)效價降低不超過1個數(shù)量級；在ph＝5～11環(huán)境下，穩(wěn)定性良好，可在2h內(nèi)效價降低不超過1個數(shù)量級。
19、(6)柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1可用于制備組合物、試劑、或試劑盒，可應(yīng)用于柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的快速檢測，其包括但不限于以試紙、試劑盒等形式對目標(biāo)樣本中的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種進(jìn)行檢測，或?qū)颖局械哪繕?biāo)致病菌進(jìn)行篩選，可有效確保檢測的靈敏度。
20、(8)本專利技術(shù)提供的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本專利技術(shù)的記載和本領(lǐng)域常識制備成可應(yīng)用于防治由柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種引起的病害的生物藥劑。
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1.一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體(Xanthomonas?phage)XP1，其特征在于，其于2024年7月4日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國.武漢.武漢大學(xué)，保藏編號為CCTCC?NO：M?20241486。
2.一種如權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體XP1在制備防治柑橘潰瘍病的農(nóng)藥或肥料中的應(yīng)用，其特征在于，所述柑橘潰瘍病是柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種所導(dǎo)致。
3.一種防治柑橘潰瘍病的農(nóng)藥或肥料，其特征在于，活性成分包括權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體XP1。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的農(nóng)藥或肥料，其特征在于，所述農(nóng)藥或肥料還包括農(nóng)藥或肥料上可接受的輔料。
5.一種如權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體XP1在制備柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的消毒劑中的應(yīng)用。
6.一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的消毒劑，其特征在于，活性成分包括權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體XP1。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的消毒劑，其特征在于，所述消毒劑為液體制劑。
8.根據(jù)權(quán)利要
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的消毒劑，其特征在于，所述水性載體為SM緩沖液、磷酸鹽緩沖液、NB培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基或氯游離水。
10.一種如權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體XP1在制備柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種的檢測產(chǎn)品中的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體(xanthomonas?phage)xp1，其特征在于，其于2024年7月4日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國.武漢.武漢大學(xué)，保藏編號為cctcc?no：m?20241486。
2.一種如權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1在制備防治柑橘潰瘍病的農(nóng)藥或肥料中的應(yīng)用，其特征在于，所述柑橘潰瘍病是柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種所導(dǎo)致。
3.一種防治柑橘潰瘍病的農(nóng)藥或肥料，其特征在于，活性成分包括權(quán)利要求1所述的柑橘黃單胞桿菌柑橘亞種噬菌體xp1。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的農(nóng)藥或肥料，其特征在于，所述農(nóng)藥或肥料還包括農(nóng)藥或肥料上可接受的輔料。
5.一種如權(quán)...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：周倩，李潭，陳丹，
申請(專利權(quán))人：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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