【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物，具體涉及一種抗rf抗體或其功能性片段及其應用。本專利技術要求于2023年8月18日提交的申請號為202311047160.7的優先權，該申請的全部內容通過引用并入本文。
技術介紹
1、阻斷劑，是一類能應用于在體外診斷試劑開發過程中，以達到減少來自患者樣本中的蛋白質干擾或者試驗過程中的其他因素影響并由此可能造成的假陽性，假陰性的錯誤檢測結果的物料的統稱。
2、在免疫學檢測試驗中非特異性結合可發生于(1)固相材料和非目標的蛋白質結合(2)患者的樣品中存在的內源性干擾物和檢測試劑內抗體的結合。為了防止非特異性結合，要求在體外診斷試劑研發生產過程中要在固相材料包被之后使用阻斷緩沖劑中以封閉固相材料上任何剩余未結合的位點，同時在準備檢測樣本的過程中使用其他的阻斷劑以防止內源性干擾物與檢測試劑組分抗體結合。內源性干擾包括類風濕因子、嗜異性抗體、補體、自身抗體、高脂、黃疸等；其中類風濕因子、嗜異性抗體是重要的干擾因素。
3、類風濕因子(rf)是由于感染因子(細菌、病毒等)引起體內產生的以變性igg(一種抗體)為抗原的一種抗體，故又稱抗抗體。常見的類風濕因子有igm型、igg型iga型和ige型。人體內普遍存在著類風濕因子，并起著一定的生理作用。類風濕因子主要存在于類風濕性關節炎患者的血清和關節液中，主要以igm型為主。它可與igg的fc段結合。rf在抗原抗體免疫反應中造成干擾的原理如圖2所示。在沒有抗原存在的情況下，rf可與捕獲抗體和標記抗體結合，造成假陽性，因此，在試劑盒開發過程中加入針對rf干擾
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供抗rf抗體或其功能性片段，主要針對igm型，實現對rf干擾物質的特異性結合，對內源性干擾有顯著的阻斷效果，能有效降低或者消除內源性rf干擾，進而提高免疫試劑盒的準確度。所述抗體能有效應用到各類免疫檢測領域中，如化學發光，免疫層析，生化等，方便快速高效。
2、具體如下：
3、抗rf抗體或其功能性片段具有如下互補決定區：
4、cdr-vh1：d-x1-y-m-x2，其中x1是n或t，x2是h或r；
5、cdr-vh2：r-i-x1-p-p-n-g-x2-t-q-c-d-p-x3-f-q-g，其中x1是d或n，x2是n或c，x3是h或k；
6、cdr-vh3：g-l-x1-y-y-g-s-s-t-d-x2-f-d-y，其中x1是l或i，x2是a或f；
7、cdr-vl1：k-a-s-x1-s-v-d-y-d-x2-d-s-y-m-n，其中x1是n或q，x2是g或w；
8、cdr-vl2：a-x1-s-d-l-x2-s，其中x1是a或g，x2是n或q；
9、和cdr-vl3：q-q-x1-n-e-y-p-y-x2，其中x1是s，x2是s或t。
10、進一步地，所述互補決定區的cdr-vh1的x2是h，cdr-vh2的x1是d，cdr-vh3的x2是f，cdr-vl1的x1是q，cdr-vl2的x2是q，cdr-vl3的x1是s。
11、本專利技術所述cdr區段劃分采用kabat算法。
12、“cdr”在本文中用于指抗體可變序列內的“互補決定區”。重鏈和輕鏈的可變區各有3個cdr，從重鏈或輕鏈的n端開始。
13、抗原結合位點可以包括六個cdr(本專利技術中的cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2和cdr-vl3)。包含單個cdr(例如cdr-vh1、cdr-vh2、cdr-vh3、cdr-vl1、cdr-vl2活cdr-vl3)的多肽可稱為“分子識別單元”。抗原-抗體復合物的晶體學分析已經證明cdr的氨基酸殘基與結合的抗原形成廣泛接觸，其中最廣泛的抗原接觸是與重鏈cdr3。因此，分子識別單元可能主要負責抗原結合位點的特異性。一般而言，cdr殘基直接且最實質性地參與影響抗原結合。
14、本專利技術的專利技術人發現，在各互補決定區中的上述突變位點為上述氨基酸殘基時，該抗體對rf具有更好的親和力。
15、在可選的實施例中，所述cdr-vh1中x1是t；
16、在可選的實施例中，所述cdr-vh1中x1是n；
17、在可選的實施例中，所述cdr-vh1中x2是h；
18、在可選的實施例中，所述cdr-vh1中x2是r；
19、在可選的實施例中，所述cdr-vh2中x1是d；
20、在可選的實施例中，所述cdr-vh2中x1是n；
21、在可選的實施例中，所述cdr-vh2中x2是c；
22、在可選的實施例中，所述cdr-vh2中x2是n；
23、在可選的實施例中，所述cdr-vh2中x3是h；
24、在可選的實施例中，所述cdr-vh2中x3是k；
25、在可選的實施例中，所述cdr-vh3中x1是l；
26、在可選的實施例中，所述cdr-vh3中x1是i；
27、在可選的實施例中，所述cdr-vh3中x2是a；
28、在可選的實施例中，所述cdr-vh3中x2是f；
29、在可選的實施例中，所述cdr-vl1中x1是q；
30、在可選的實施例中，所述cdr-vl1中x1是n；
31、在可選的實施例中，所述cdr-vl1中x2是g；
32、在可選的實施例中，所述cdr-vl1中x2是w；
33、在可選的實施例中，所述cdr-vl2中x1是g；
34、在可選的實施例中，所述cdr-vl2中x1是a；
35、在可選的實施例中，所述cdr-vl2中x2是n；
36、在可選的實施例中，所述cdr-vl2中x2是q；
37、在可選的實施例中，所述cdr-vl3中x1是s；
38、在可選的實施例中，所述cdr-vl3中x2是t；
39、在可選的實施例中，所述cdr-vl3中x2是s。
40、優選的，所述各互補決定區選自如下突變組合中任意一種：
41、
42、
43、進一步地，所述抗體包括輕鏈骨架區fr1-l、fr2-l、fr3-l及fr4-l和重鏈骨架區fr1-h、fr2-h、fr3-h及fr4-h；所述重鏈骨架區fr1-h、fr2-h、fr3-h及fr4-h依次選自seq?idno:1-4；所述輕鏈骨架區fr1-l、fr2-l、fr3-l及fr4-l依次選自seq?id?no:5-8。
44、進一步地，所述抗體還包含恒定區。
45、優選的，所述恒定區選自igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige和igd中的任意一者的恒定區，優選的，所述恒定區的種屬來源為牛、馬、乳牛、豬、綿羊、山羊本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.抗類風濕因子(RF)抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體或其功能性片段包括如下互補決定區：
2.如權利要求1所述的抗RF抗體或其功能性片段，其特征在于，所述互補決定區的CDR-VH1的X2是H，CDR-VH2的X1是D，CDR-VH3的X2是F，CDR-VL1的X1是Q，CDR-VL2的X2是Q，CDR-VL3的X1是S。
3.如權利要求1所述的抗RF抗體或其功能性片段，其特征在于，所述CDR-VH1中X1是T；
4.如權利要求1-3任意一項所述的抗RF抗體或其功能性片段，其特征在于，所述各互補決定區選自如下突變組合中任意一種：
5.如權利要求1-4任意一項所述的抗RF抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體包括輕鏈骨架區FR1-L、FR2-L、FR3-L及FR4-L和重鏈骨架區FR1-H、FR2-H、FR3-H及FR4-H；所述重鏈骨架區FR1-H、FR2-H、FR3-H及FR4-H依次選自SEQ?ID?NO:1-4；所述輕鏈骨架區FR1-L、FR2-L、FR3-L及FR4-L依次選自SEQ?ID?NO:5-8。
<...【技術特征摘要】
1.抗類風濕因子(rf)抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體或其功能性片段包括如下互補決定區：
2.如權利要求1所述的抗rf抗體或其功能性片段，其特征在于，所述互補決定區的cdr-vh1的x2是h，cdr-vh2的x1是d，cdr-vh3的x2是f，cdr-vl1的x1是q，cdr-vl2的x2是q，cdr-vl3的x1是s。
3.如權利要求1所述的抗rf抗體或其功能性片段，其特征在于，所述cdr-vh1中x1是t；
4.如權利要求1-3任意一項所述的抗rf抗體或其功能性片段，其特征在于，所述各互補決定區選自如下突變組合中任意一種：
5.如權利要求1-4任意一項所述的抗rf抗體或其功能性片段，其特征在于，所述抗體包括輕鏈骨架區fr1-l、fr2-l、fr3-l及fr4-l和重鏈骨架區fr1-h、fr2-h、fr3-h及fr4-h；所...
【專利技術屬性】
技術研發人員：江成棟，蔣雪，姬成東，溫路新，周佳慧，王競，劉運波，
申請(專利權)人：重慶艾生斯生物工程有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。