【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物醫藥，具體涉及一種多肽及其在神經退行性疾病中的應用。
技術介紹
1、神經退行性疾病是一類嚴重影響人類健康的疾病，包括帕金森病（parkinson'sdisease,?pd）、阿爾茨海默病（alzheimer's?disease,?ad）等。這些疾病的特點是中樞神經系統中特定類型的神經元逐漸喪失，導致認知和運動功能障礙。近年來研究表明，炎癥反應在這些疾病的發病機制中起著關鍵作用。目前，臨床上針對這些疾病的治療方法主要包括藥物治療、手術治療和康復治療，但這些方法在延緩疾病進展和改善癥狀方面存在局限性。
2、1.藥物治療
3、（1）帕金森病：常用的藥物包括左旋多巴（levodopa）、多巴胺受體激動劑（如普拉克索、羅匹尼羅）、單胺氧化酶b抑制劑（如司來吉蘭）和兒茶酚-o-甲基轉移酶抑制劑（如恩他卡朋）。這些藥物主要通過補充多巴胺或延長其作用時間來緩解癥狀，但并不能阻斷疾病的發展，同時長期使用還可能導致副作用和療效減退。
4、（2）阿爾茨海默病：常用的藥物包括膽堿酯酶抑制劑（如多奈哌齊、加蘭他敏、石杉堿甲）和nmda受體拮抗劑（如美金剛）。這些藥物可以改善認知功能，但無法阻止或逆轉神經元的死亡。
5、2.手術治療
6、（1）帕金森病：深部腦刺激（deep?brain?stimulation,?dbs）是一種常用的手術方法，通過在特定腦區植入電極來調節異常的神經活動，從而改善運動癥狀。dbs適用于藥物治療效果不佳的患者，但手術風險較高，且長期效果尚需進一步驗證。
7、連接蛋白43（connexin43,?cx43）是細胞間通訊的重要組成部分，其功能異常與多種神經系統疾病有關。已有研究表明，lps（脂多糖）可誘導cx43間隙連接通信減少和半通道功能增強，從而直接或間接地通過過量釋放atp和谷氨酸導致神經毒性。連接蛋白cx43過度激活被認為參與帕金森病或老年癡呆癥等的發病機制中，其中cx43的抑制肽gap27被認為有神經保護作用以及治療帕金森病的潛力，但缺乏系統性的研究。
8、因此，目前仍然缺乏有效的延緩疾病進展、阻止或逆轉神經死亡的藥物。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種多肽。
2、本專利技術的再一目的在于提供上述多肽的編碼基因。
3、本專利技術的再一目的在于提供含有上述編碼基因的重組表達載體。
4、本專利技術的再一目的在于提供含有上述編碼基因的重組菌株。
5、本專利技術的再一目的在于提供上述多肽的制備方法。
6、本專利技術的再一目的在于提供上述多肽的應用。
7、本專利技術的多肽zt002-02，其氨基酸序列如seq?id?no.?1所示：
8、ser-his-pro-thr-glu-lys-thr-lys-pro-phe-ile-ile-ile。
9、上述多肽zt002-02為通道蛋白特異性抑制肽，相較常用的cx43的抑制模擬肽ser-arg-pro-thr-glu-lys-thr-ile-phe-ile-ile，本專利技術多肽序列進行了多點改變，其中，變更第2位arg為his，降低了多肽的正電性從而增強多肽的跨膜特性；變更第8位的ile為lys，增加多肽的親水性以及平衡電荷分布從而增加多肽的跨膜特性，增加第9位的pro，增加多肽的剛性，提高多肽的穩定性，延長多肽的半衰期；最后一位增加ile，形成最后的phe-ile-ile-ile序列，增強多肽的疏水性尾部，易和細胞膜融合增強和通道蛋白的結合能力，以增強對cx43的抑制作用。
10、本專利技術還提供一種優化的融合多肽zt002，其氨基酸序列如seq?id?no.?2所示：
11、tyr-gly-arg-lys-lys-arg-arg-gln-arg-arg-arg-(gly)3-ser-his-pro-thr-glu-lys-thr-lys-pro-phe-ile-ile-ile。
12、為了增加zt002-02多肽穿過血腦屏障的能力，本專利技術的融合多肽zt002選擇在zt002-02多肽的前端加上人類免疫缺陷病毒的tat細胞穿透肽序列tyr-gly-arg-lys-lys-arg-arg-gln-arg-arg-arg，同時，在兩段多肽序列中間加入了重復序列(gly)3，以提高融合多肽整體的靈活性，避免形成空間位阻。
13、本專利技術還提供一種peg修飾的多肽分子peg-zt002，其氨基酸序列如seq?id?no.?3所示：
14、tyr-gly-arg-lys-lys-arg-arg-gln-arg-arg-arg-(gly)3-ser-his-pro-thr-glu-lys-thr-lys-pro-phe-ile-ile-ile-(ch2ch2o)3-ch2oh。
15、本專利技術通過在seq?id?no.2的融合多肽zt002的c端化學修飾（peg）4，進一步增強了多肽分子的穩定性和半衰期，增強多肽分子的體內作用時間。
16、本專利技術提供上述融合多肽優化密碼子后的編碼基因，其核苷酸序列如seq?idno.4所示：
17、tat?ggc?cgt?aaa?aaa?cgt?cgt?cag?cgc?cgt?cgt?ggt?ggt?ggt?tct?cat?ccgacc?gaa?aag?acc?aag?ccg?ttc?att?atc
18、本專利技術還提供了包含編碼上述多肽基因的重組載體，優選為pet21a-zt002。將本專利技術的多肽基因插入到表達載體合適的限制性酶切位點之間，使其核苷酸序列可操作的與表達調控序列相連接。作為本專利技術的一個最優選的實施方案，將本專利技術的融合多肽zt002基因序列插入到質粒pet21a上的限制性酶切位點之間，使該核苷酸序列位于啟動子的下游并受其調控，得到重組表達質粒pet21a-zt002。
19、本專利技術還提供了包含上述多肽基因的重組菌株，優選為重組大腸桿菌菌株bl21(de3)-zt002。
20、本專利技術還提供上述多肽的應用，尤其是作為cx43抑制劑的作用，本專利技術的多肽分子對于cx43具有特異性抑制作用，可用于制備治療神經退行性疾病的藥物，例如，帕金森氏癥的藥物，或阿爾茲海默癥的藥物。
21、本專利技術的peg修飾多肽分子peg-zt002包含tat細胞穿透肽、中間連接肽、通道蛋白特異性抑制肽和peg修飾，其血漿半衰期可達到80小時，在腦內半衰期可達到120小時；對cx43具有特異性抑制作用；可用于治療帕金森氏癥和阿爾茲海默癥；可抑制神經免疫反應，阻斷由此產生的神經損傷；可促進神經生長因子產生，修復神經損傷，提高神經遞質水平，降低疾病產生的神經損傷。
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1.?一種多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1、SEQ?ID?NO.2或SEQID?NO.3所示。
2.?權利要求1所述的多肽的編碼基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示。
3.包含權利要求2所述的編碼基因的重組表達載體。
4.包含權利要求2所述的編碼基因的重組菌株。
5.制備權利要求1所述的多肽的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，對于純化的多肽的C端進行PEG化學修飾，獲得PEG修飾的多肽分子。
7.權利要求1所述的多肽的應用。
8.權利要求1所述的多肽在制備Cx43抑制劑方面的應用。
9.權利要求1所述的多肽在制備治療神經退行性疾病的藥物中的應用。
【技術特征摘要】
1.?一種多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如seq?id?no.1、seq?id?no.2或seqid?no.3所示。
2.?權利要求1所述的多肽的編碼基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq?id?no.4所示。
3.包含權利要求2所述的編碼基因的重組表達載體。
4.包含權利要求2所述的編碼基因的重組菌株。
5.制備權利...
【專利技術屬性】
技術研發人員：周輝，
申請(專利權)人：天津智泰生物醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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