一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法技術(shù)

技術(shù)編號(hào)：44409618 閱讀：2 留言：0更新日期：2025-02-25 10:22

本發(fā)明專利技術(shù)涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法。用含有濃度為1x105CFU/mL的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)中華絨螯蟹抱卵蟹進(jìn)行兩次浸泡刺激，刺激后的抱卵蟹孵化產(chǎn)生的溞狀幼體，即獲得的抗病中華絨螯蟹幼體。采用本發(fā)明專利技術(shù)提供的育苗方法對(duì)抱卵蟹進(jìn)行培育，能夠促進(jìn)中華絨螯蟹胚胎的發(fā)育，提高溞狀幼體對(duì)二尖梅奇酵母侵染的抵抗能力。

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【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖，具體涉及一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法。

技術(shù)介紹

1、酵母是一類在自然界中普遍存在的真菌，許多種類的酵母已經(jīng)被證實(shí)是水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的主要病原菌。例如，莫格球擬酵母(torulopsis?mogii)、葡萄牙假絲酵母(candidalusitaniae)與二尖梅奇酵母(metschnikowia?bicuspidata)等可單獨(dú)或與其他病原菌共同感染多種水產(chǎn)動(dòng)物，誘發(fā)水產(chǎn)動(dòng)物死亡，嚴(yán)重威脅了我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展。其中二尖梅奇酵母于1884年首次在大型蚤(daphnia?magna)上分離得到，現(xiàn)已知其能感染包括羅氏沼蝦(macrobrachium?rosenbergii)、三疣梭子蟹(portunus?trituberculatus)、大鱗大馬哈魚(oncorhynchus?tshawytscha)以及中華絨螯蟹(eriocheir?sinensis)在內(nèi)的多種水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物，目前尚無有效的治療措施。

2、中華絨鰲蟹是我國特有的大型淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)蟹類，具有非常高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。我國是世界上的中華絨螯蟹養(yǎng)殖第一大國，但隨著養(yǎng)殖規(guī)模與養(yǎng)殖密度的不斷擴(kuò)大，中華絨螯蟹的顫抖病、“水癟子”病、爛鰓、腸炎、纖毛蟲等各種病害問題相繼爆發(fā)。2019年首次在遼寧省盤錦市發(fā)現(xiàn)的“牛奶病”引發(fā)了中華絨螯蟹大規(guī)模死亡現(xiàn)象，是一種危害較大的流行病，死亡率超過20％，給養(yǎng)殖戶造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前已有報(bào)道二尖梅奇酵母是誘發(fā)“牛奶病”的病原之一。研發(fā)中華絨螯蟹“牛奶病”的綠色防治技術(shù)迫在眉睫。

<p>技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決
技術(shù)介紹
中的問題，本專利技術(shù)提供了一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法。

2、為達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案為：

3、一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，用含有濃度為1x105cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)中華絨螯蟹抱卵蟹進(jìn)行兩次浸泡刺激，刺激后的抱卵蟹生產(chǎn)溞狀幼體，即獲得抗病中華絨螯蟹幼體。

4、具體為：將中華絨螯蟹前無節(jié)幼體期抱卵蟹用含有濃度為1x105cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水進(jìn)行浸泡刺激，刺激后于正常海水中繼續(xù)養(yǎng)殖至原溞狀幼體期，再將養(yǎng)殖至該時(shí)期的抱卵蟹用含有濃度為1x105cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)其進(jìn)行浸泡刺激，用兩次刺激后抱卵蟹生產(chǎn)溞狀幼體，即獲得抗病中華絨螯蟹幼體。

5、所述含有濃度為1x105?cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水為經(jīng)甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母利用無菌海水調(diào)節(jié)濃度至1x105?cfu/ml。

6、所述甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母為向含二尖梅奇酵母的重懸菌液中加入甲醛溶液孵育，而后離心洗滌獲得甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母；其中，重懸菌液中二尖梅奇酵母濃度調(diào)整為2x107?cfu/ml，重懸菌液中甲醛溶液的終濃度為0.5％(v/v)。

7、所述甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母為將二尖梅奇酵母接種至ypd液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，除去多余培養(yǎng)基后，用無菌蒸餾水反復(fù)重懸酵母，得到重懸菌液；向重懸菌液中加入甲醛溶液混勻后在4℃下孵育24h，得到酵母懸浮液，并離心、洗滌，獲得甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母。

8、所述擴(kuò)增培養(yǎng)溫度為28℃、時(shí)間為24h，轉(zhuǎn)速為180r/min。

9、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有以下效果：

10、本專利技術(shù)首次利用高等動(dòng)物疫苗免疫和無脊椎動(dòng)物免疫致敏的原理，用較低濃度(1x105?cfu/ml)的滅活二尖梅奇酵母對(duì)抱卵蟹進(jìn)行浸泡刺激，建立了一種創(chuàng)新的中華絨螯蟹育苗技術(shù)。通過采用本專利技術(shù)提供的方法對(duì)抱卵蟹進(jìn)行培育，能夠促進(jìn)溞狀幼體的發(fā)育，并增強(qiáng)溞狀i期幼體對(duì)二尖梅奇酵母侵染的抵抗力。

本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

1.一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，將用含有濃度為1x105CFU/mL的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)中華絨螯蟹抱卵蟹進(jìn)行兩次浸泡刺激，刺激后的抱卵蟹生產(chǎn)溞狀幼體，即獲得抗病中華絨螯蟹幼體。

2.按權(quán)利要求1所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，用含有濃度為1x105?CFU/mL的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)中華絨螯蟹前無節(jié)幼體期抱卵蟹進(jìn)行浸泡刺激，刺激后于正常海水中繼續(xù)養(yǎng)殖至原溞狀幼體期，再將養(yǎng)殖至該時(shí)期的抱卵蟹用含有濃度為1x105?CFU/mL的滅活二尖梅奇酵母的海水進(jìn)行浸泡刺激，用兩次刺激后的抱卵蟹生產(chǎn)溞狀幼體，即獲得抗病中華絨螯蟹幼體。

3.按權(quán)利要求1或2所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，所述含有濃度為1x105?CFU/mL的滅活二尖梅奇酵母的海水為經(jīng)甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母利用無菌海水調(diào)節(jié)濃度至1x105?CFU/mL。

4.按權(quán)利要求3所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，所述甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母為向含二尖梅奇酵母的重懸菌液中加入甲醛溶液混勻孵育

5.按權(quán)利要求4所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，所述甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母為將二尖梅奇酵母接種至YPD液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，除去多余培養(yǎng)基后，用無菌蒸餾水反復(fù)重懸酵母，得到重懸菌液；向重懸菌液中加入甲醛溶液混勻后在4℃下孵育24h，得到酵母懸浮液，并離心、洗滌，獲得甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母。

6.按權(quán)利要求4所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，所述擴(kuò)增培養(yǎng)溫度為28℃、時(shí)間為24h，轉(zhuǎn)速為180r/min。

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【技術(shù)特征摘要】

1.一種提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，將用含有濃度為1x105cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)中華絨螯蟹抱卵蟹進(jìn)行兩次浸泡刺激，刺激后的抱卵蟹生產(chǎn)溞狀幼體，即獲得抗病中華絨螯蟹幼體。

2.按權(quán)利要求1所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，用含有濃度為1x105?cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水對(duì)中華絨螯蟹前無節(jié)幼體期抱卵蟹進(jìn)行浸泡刺激，刺激后于正常海水中繼續(xù)養(yǎng)殖至原溞狀幼體期，再將養(yǎng)殖至該時(shí)期的抱卵蟹用含有濃度為1x105?cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水進(jìn)行浸泡刺激，用兩次刺激后的抱卵蟹生產(chǎn)溞狀幼體，即獲得抗病中華絨螯蟹幼體。

3.按權(quán)利要求1或2所述的提高中華絨螯蟹幼體抗病能力的育苗方法，其特征在于，所述含有濃度為1x105?cfu/ml的滅活二尖梅奇酵母的海水為經(jīng)甲醛溶液滅活的二尖梅奇酵母利用無菌海水調(diào)節(jié)濃度至1x105?cfu/...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：宋林生，王偉林，于天齊，王玲玲，周曉旭，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：大連海洋大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：

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