【技術實現步驟摘要】
本申請涉及農藥檢測，更具體地說，它涉及一種農藥有效成分含量速測試劑及其制備方法和應用。
技術介紹
1、農藥有效成分含量測試是保障農藥產品質量的重要環節，它直接關系到農藥的防治效果、農產品安全以及環境可持續發展，通過快速測試，，能夠快速、準確地預估農藥樣品中有效成分的含量，可以確保農藥產品中的有效成分含量符合國家安全標準，對于保障食品安全、保護環境和人類健康具有重要意義，是農藥產品質量控制不可或缺的一環。
2、農藥有效成分快速檢測方法主要包括生化測定法和色譜檢測法，其中生化測定法中的酶抑制率法因其快速、靈敏、操作簡便、成本低廉等特點，被列為國家推薦標準方法。在一定條件下，農藥有效成分對酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農藥的有效成分含量呈正相關；如果農藥樣品中的有效成分含量較低，酶的活性就很難被抑制，通過酶作用下的水解產物與顯色劑反應，帶來顏色變化；如果農藥樣品中的有效成分含量較高，酶的活性就會被明顯抑制，從而不顯色或是顏色很淺；通過測量吸光度的變化，并計算抑制率，抑制率越大，則說明農藥樣品中有效成分含量越高，根據實際需要設置閾值進行篩選，可以判斷出農藥有效成分的含量高于或低于預期，進而能夠對大量農藥樣品的有效成分含量進行快速預估，為后期定量分析減輕工作，從而提高檢測效率，降低檢測成本。
3、針對上述中的相關技術，專利技術人認為，酶對溫度和儲存條件非常敏感，必須在特定的溫度下儲存，一般為4℃左右，以確保酶的活性，在而實際應用測試過程中，外部環境溫度往往較高，難以滿足特定的溫度要求，若因溫度影響造成酶活性的顯著
4、因此，目前亟需提出一種方案以解決上述技術問題。
技術實現思路
1、為了降低溫度給酶活性帶來的不利影響，提高農藥有效成分快速檢測結果的準確性，本申請提供一種農藥有效成分含量速測試劑及其制備方法和應用。
2、第一方面，本申請提供一種農藥有效成分含量速測試劑，采用如下的技術方案：一種農藥有效成分含量速測試劑，由包含以下重量份的原料制成：
3、指示劑10-30份；
4、緩沖劑20-40份；
5、抑制劑5-15份；
6、溶劑30-45份；
7、功能助劑5-8份；
8、所述功能助劑由包含聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖的成分組成，其中，聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖的重量份之比為(1.5-3):1:(0.4-0.8)。
9、通過采用上述技術方案，指示劑中含有酶和顯色劑，通過酶的活性受抑制的程度不同，利用顯色劑配合帶來的顏色變化，且具有較高顏色變化的敏感度；緩沖劑的作用是保持溶液中的酸堿度穩定，從而確保測試的準確性；抑制劑用以減緩試劑與農藥有效成分的反應速度，保證檢測的準確性和穩定性。同時，還使用有包含聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖的功能助劑，其中，聚丙烯酰胺凝膠能夠穩定農藥樣品，提供穩定的測試環境，發揮出耐溫保護作用；甘油在高溫環境下能夠提供一個保護層，增強測試的穩定性；海藻糖作為天然保藏劑，能有效地提高酶蛋白的熱穩定性；而將聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖搭配使用時，三者能夠發揮出優異的復配增效作用，不僅能夠作用于酶蛋白表面分子，使酶蛋白分子穩定化，還能夠填補酶空間建構的孔隙，降低由于溫度熱應力引起酶空間結構改變而導致的酶活損失，起到穩定酶的作用，進而在農藥有效成分含量速測試劑的實際應用中，可有效降低溫度給酶活性帶來的不利影響，提高農藥有效成分快速檢測結果的準確性。
10、優選的，所述聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖的重量份之比為2:1:0.5。
11、通過采用上述技術方案，上述重量比的聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖在組合作為功能助劑使用時，相互間配合所發揮的相應效果較為優異，能夠對酶發揮出優異穩定的耐溫保護作用，使得農藥有效成分含量速測試劑應用帶來的檢測結果較為準確。
12、優選的，所述指示劑由包含酶溶液和顯色劑的成分組成，其中，所述酶溶液和顯色劑的體積混合比為1:(0.8-1.2)；
13、所述酶溶液由酶原料制劑與緩沖溶液按1mg:(0.1-0.12)ml的比例混合而得；
14、所述顯色劑由二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的混合物與緩沖溶液按1g:(45-55)ml的比例混合而得，其中，所述二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的重量比為(9-11):1。
15、通過采用上述技術方案，正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物類似物水解，其水解產物與顯色劑二硫代二硝基苯甲酸發生反應，產生黃色物質，通過測量這一反應產生的黃色物質能夠反饋出較為準確的吸光度變化，再通過吸光度的變化計算出酶的抑制率，進而有利于后續對農藥樣品的有效成分含量進行快速準確預估；而上述組成的顯色劑和酶溶液進行搭配時，能夠根據酶活性的受抑制性準確發揮出相應作用，進而保證農藥有效成分快速檢測結果的準確性。
16、優選的，所述酶溶液和顯色劑的體積混合比為1:1。
17、通過采用上述技術方案，上述比例的酶溶液和顯色劑能夠使測試結果更加準確可靠。
18、優選的，所述顯色劑由二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的混合物與緩沖溶液按1g:50ml的比例混合而得，所述二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的重量比為10:1。
19、通過采用上述技術方案，上述比例的原料進行混合時，得到的顯色劑在與酶反應后的產物發生反應后，所產生的顏色變化較為穩定，且在后續吸光度的測定過程中也能夠得到較為精準的結果，進而使得農藥有效成分含量速測試劑在應用后，能夠得到較為準確的農藥有效成分快速檢測結果。
20、優選的，所述緩沖劑為tris-hcl緩沖液、mops緩沖液、hepes緩沖液、pbs緩沖液、epps緩沖液和ssc緩沖液中的任意一種。
21、通過采用上述技術方案，上述種類的緩沖液可以根據實際需要進行選用，并能夠在農藥有效成分含量速測試劑自身的混料體系中發揮穩定作用，以幫助維持測試環境的穩定性，確保測試結果的準確性。
22、優選的，所述抑制劑為抗壞血酸、硫代硫酸鈉、檸檬酸、l-半胱甘酸和蘋果酸中的任意一種。
23、通過采用上述技術方案，上述抑制劑在農藥有效成分含量速測試劑中均能夠發揮穩定作用，以減緩試劑與農藥有效成分的反應速度，帶來穩定的調控作用，進而保證檢測的準確性和穩定性。
24、優選的，所述溶劑為乙腈、丙酮、甲苯、石油醚和乙酸乙酯中的一種或幾種的組合物。
25、通過采用上述技術方案，上述溶劑均適用于農藥有效成分含量速測試劑應用所需，能夠對農藥樣品中的有效成分進行溶解和稀釋，使農藥樣品中的有效成分得以均勻分布，進而與農藥有效成分含量速測試劑快速充分作用，有利于保證農藥有效成分快速檢測結果的準確性。
26、第二方面，本申請提供一種農藥有效成分含量速測試劑的制備方法，采用如下的技術方案：
27、一種農藥有效成分含量速測試劑的制備方法，包括以下步驟：...
【技術保護點】
1.一種農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于，由包含以下重量份的原料制成：
2.根據權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖的重量份之比為2:1:0.5。
3.根據權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述指示劑由包含酶溶液和顯色劑的成分組成，其中，所述酶溶液和顯色劑的體積混合比為1:（0.8-1.2）；
4.根據權利要求3所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述酶溶液和顯色劑的體積混合比為1:1。
5.根據權利要求3所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述顯色劑由二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的混合物與緩沖溶液按1g:50mL的比例混合而得，所述二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的重量比為10:1。
6.根據權利要求3所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述緩沖劑為Tris-HCl緩沖液、MOPS緩沖液、HEPES緩沖液、PBS緩沖液、EPPS緩沖液和SSC緩沖液中的任意一種。
7.根據權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征
8.根據權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述溶劑為乙腈、丙酮、甲苯、石油醚和乙酸乙酯中的一種或幾種的組合物。
9.權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
10.一種農藥有效成分含量速測試劑在有機磷和氨基甲酸酯類農藥有效成分快速檢測中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于，由包含以下重量份的原料制成：
2.根據權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述聚丙烯酰胺凝膠、甘油和海藻糖的重量份之比為2:1:0.5。
3.根據權利要求1所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述指示劑由包含酶溶液和顯色劑的成分組成，其中，所述酶溶液和顯色劑的體積混合比為1:（0.8-1.2）；
4.根據權利要求3所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述酶溶液和顯色劑的體積混合比為1:1。
5.根據權利要求3所述的農藥有效成分含量速測試劑，其特征在于：所述顯色劑由二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的混合物與緩沖溶液按1g:50ml的比例混合而得，所述二硫代二硝基苯甲酸、碳酸鈉的重量...
【專利技術屬性】
技術研發人員：呂鍵，
申請(專利權)人：上海德易檢測技術有限公司，
類型：發明
國別省市：
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