【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及藥物檢測，具體為一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法。
技術(shù)介紹
1、細(xì)菌性陰道炎病癥為白帶增多，有腥臭味，性交后加重，可伴有外陰瘙癢或燒灼感。但10％～40％的患者并無任何癥狀，只是在體檢中才被發(fā)現(xiàn)。
2、念珠菌性陰道炎病癥為外陰瘙癢，外陰及陰道灼痛，白帶增多呈豆腐渣樣，有時(shí)伴有尿頻、尿痛，性交痛，婦科檢查時(shí)可見小陰唇內(nèi)側(cè)及陰道粘膜上附著白色膜狀物，擦除后露出紅腫粘膜面，急性期可見受損的糜爛面。
3、硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊，適應(yīng)癥為細(xì)菌性陰道病、滴蟲性陰道炎、念珠菌性外陰陰道炎、陰道混合感染。硝呋太爾為硝基呋喃類衍生物，具有廣譜抗微生物作用，對滴蟲、細(xì)菌、白色念珠菌等均具有活性。
4、目前的硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊在生產(chǎn)后，通常會對其進(jìn)行微生物限度檢查，但是當(dāng)前通常只采用一種環(huán)境對微生物限度進(jìn)行檢查，進(jìn)而可能會存在檢查精確度低的現(xiàn)象。因此，專利技術(shù)一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、鑒于上述和/或現(xiàn)有一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法中存在的問題，提出了本專利技術(shù)。
2、因此，本專利技術(shù)的目的是提供一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，能夠解決上述提出現(xiàn)有的問題。
3、為解決上述技術(shù)問題，根據(jù)本專利技術(shù)的一個方面，本專利技術(shù)提供了如下技術(shù)方案：
4、一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其包括具體步
5、s1，菌液制備：
6、制備懸液a、懸液b和懸液c；
7、s2，供試液制備：
8、將10g的硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊置于容器中，接著往容器中加入100ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，之后，將其搖勻，接著，加入10ml的懸液a，并進(jìn)行離心，在離心后，取清層作為1：10供試液a；
9、將10g的硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊置于容器中，接著往容器中加入100ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，之后，將其搖勻，接著，加入10ml的懸液b，并進(jìn)行離心，在離心后，取清層作為1：10供試液b；
10、將10g的硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊置于容器中，接著往容器中加入100ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，之后，將其搖勻，接著，加入10ml的懸液c，并進(jìn)行離心，在離心后，取清層作為1：10供試液c；
11、s3，需氧菌、細(xì)菌、霉菌和酵母菌的總數(shù)測定：
12、s31，實(shí)驗(yàn)組a：將1ml的1：10供試液a注入微生物限度用薄膜過濾器中，并用容量為500ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液進(jìn)行5次沖洗，在最后一次沖洗時(shí)，往無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液中加入懸液a，之后，在過濾后，取出濾膜，并使細(xì)菌朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，之后，將其置于30～40℃的環(huán)境下培養(yǎng)24～48h，接著，使白念珠菌和黑曲霉面朝上貼于玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上，并將其置于25～30℃的環(huán)境中培養(yǎng)24～72h，在這過程中，需逐日觀察結(jié)果，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)；
13、實(shí)驗(yàn)組b：將1ml的1：10供試液b注入微生物限度用薄膜過濾器中，并用容量為500ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液進(jìn)行5次沖洗，在最后一次沖洗時(shí)，往無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液中加入懸液b，之后，在過濾后，取出濾膜，并使細(xì)菌朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，之后，將其置于30～40℃的環(huán)境下培養(yǎng)24～48h，接著，使白念珠菌和黑曲霉面朝上貼于玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上，并將其置于25～30℃的環(huán)境中培養(yǎng)24～72h，在這過程中，需逐日觀察結(jié)果，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)；
14、實(shí)驗(yàn)組c：將1ml的1：10供試液c注入微生物限度用薄膜過濾器中，并用容量為500ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液進(jìn)行5次沖洗，在最后一次沖洗時(shí)，往無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液中加入懸液c，之后，在過濾后，取出濾膜，并使細(xì)菌朝上貼于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，之后，將其置于30～40℃的環(huán)境下培養(yǎng)24～48h，接著，使白念珠菌和黑曲霉面朝上貼于玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基平板上，并將其置于25～30℃的環(huán)境中培養(yǎng)24～72h，在這過程中，需逐日觀察結(jié)果，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)；
15、s32，菌液a組：重復(fù)實(shí)驗(yàn)組a，將供試液a替換成其容量為1ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；
16、菌液b組：重復(fù)實(shí)驗(yàn)組b，將供試液b替換成其容量為1ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；
17、菌液c組：重復(fù)實(shí)驗(yàn)組c，將供試液c替換成其容量為1ml的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；
18、s33，供試品對照組a：重復(fù)實(shí)驗(yàn)組a，將懸液a替換成無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；
19、供試品對照組b：重復(fù)實(shí)驗(yàn)組b，將懸液b替換成無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；
20、供試品對照組c：重復(fù)實(shí)驗(yàn)組c，將懸液c替換成無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液；
21、s34，進(jìn)行需氧菌、細(xì)菌、霉菌和酵母菌的總數(shù)測定：
22、試驗(yàn)組菌落數(shù)減去供試品組菌落數(shù)的值與菌液組菌落數(shù)的比值在0.5～2范圍內(nèi)即為合格；
23、s4，控制菌的檢查：
24、s41，檢查方法：
25、供試品組a：將10ml的1：10供試液a分3份注入微生物限度用薄膜過濾器中，并用無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗5次，其每次沖洗時(shí)都會加入10～100cfu的金黃色葡萄球菌試驗(yàn)菌和白念珠菌和銅綠假單胞菌，且在第一次沖洗時(shí)加入3％的卵磷脂，最后一次沖洗時(shí)加入試驗(yàn)菌，之后，取膜加入100ml的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基和膽鹽乳糖培養(yǎng)基，搖勻，培養(yǎng)24～72h，接著，取出培養(yǎng)物，劃線接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂平板和溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板上，培養(yǎng)24～72h；
26、供試品組b：將10ml的1：10供試液b分3份注入微生物限度用薄膜過濾器中，并用無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗5次，其每次沖洗時(shí)都會加入10～100cfu的金黃色葡萄球菌試驗(yàn)菌和白念珠菌和銅綠假單胞菌，且在第一次沖洗時(shí)加入3％的卵磷脂，最后一次沖洗時(shí)加入試驗(yàn)菌，之后，取膜加入100ml的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基和膽鹽乳糖培養(yǎng)基，搖勻，培養(yǎng)24～72h，接著，取出培養(yǎng)物，劃線接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂平板和溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板上，培養(yǎng)24～72h；
27、供試品組c：將10ml的1：10供試液c分3份注入微生物限度用薄膜過濾器中，并用無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液沖洗5次，其每次沖洗時(shí)都會加入10～100cfu的金黃色葡萄球菌試驗(yàn)菌和白念珠菌和銅綠假單胞菌，且在第一次沖洗時(shí)加入3％的卵磷脂，最后一次沖洗時(shí)加入試驗(yàn)菌，之后，取膜加入100ml的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基和膽鹽乳糖培養(yǎng)基，搖勻，培養(yǎng)24～72h，接著，取出培養(yǎng)物，劃線接種于甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂平板和溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板上，培養(yǎng)24～72h；
28、陰性對照組：將供試品組中本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，包括具體步驟如下：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的溫度為45℃，無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液中含有1％的聚山梨酯80，無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的pH值為7.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述懸液A為金黃色葡萄球菌懸液、銅綠假單胞菌懸液、枯草芽孢桿菌懸液、白色念珠菌懸液、黑曲霉孢子懸液和大腸埃希菌懸液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述懸液B為厭氧菌懸液、金黃色葡萄球菌懸液、銅綠假單胞菌懸液、枯草芽孢桿菌懸液、白色念珠菌懸液、黑曲霉孢子懸液和大腸埃希菌懸液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述懸液C為青霉素懸液、金黃色葡萄球菌懸液、銅綠假單胞菌懸液、枯草芽孢桿菌懸液、白色念珠菌懸液、黑曲霉孢子懸液和大腸埃希
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述金黃色葡萄球菌懸液的制備方法是取經(jīng)30～40℃培養(yǎng)18～24小時(shí)的金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物，用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1mL含菌數(shù)為60～100cfu的菌懸液。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述銅綠假單胞菌懸液的制備方法是取經(jīng)30～40℃培養(yǎng)18～24小時(shí)的銅綠假單胞菌新鮮培養(yǎng)物，用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1mL含菌數(shù)為60～100cfu的菌懸液。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌懸液的制備方法是取經(jīng)30～40℃培養(yǎng)18～24小時(shí)的枯草芽孢桿菌新鮮培養(yǎng)物，用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1mL含菌數(shù)為60～100cfu的菌懸液。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述白色念珠菌懸液的制備方法是取經(jīng)20～30℃培養(yǎng)2～3天的白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物，用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1mL含菌數(shù)為60～100cfu的菌懸液。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述黑曲霉孢子懸液的制備方法是取經(jīng)20～30℃培養(yǎng)5～6天的黑曲霉的新鮮培養(yǎng)物，加3～4mL含0.05％聚山梨酯80的0.9％無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫，吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用0.9％無菌氯化鈉溶液制成每1mL含孢子數(shù)為60～100cfu的孢子懸液。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，包括具體步驟如下：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的溫度為45℃，無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液中含有1％的聚山梨酯80，無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的ph值為7.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述懸液a為金黃色葡萄球菌懸液、銅綠假單胞菌懸液、枯草芽孢桿菌懸液、白色念珠菌懸液、黑曲霉孢子懸液和大腸埃希菌懸液。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述懸液b為厭氧菌懸液、金黃色葡萄球菌懸液、銅綠假單胞菌懸液、枯草芽孢桿菌懸液、白色念珠菌懸液、黑曲霉孢子懸液和大腸埃希菌懸液。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述懸液c為青霉素懸液、金黃色葡萄球菌懸液、銅綠假單胞菌懸液、枯草芽孢桿菌懸液、白色念珠菌懸液、黑曲霉孢子懸液和大腸埃希菌懸液。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種硝呋太爾制霉菌素陰道軟膠囊的微生物限度檢查方法，其特征在于，所述金黃色葡萄球菌懸液的制備方法是取經(jīng)30～40℃培養(yǎng)18～24小時(shí)的金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物，用0.9％...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李興洲，張忠民，劉崢瑞，
申請(專利權(quán))人：江蘇征瑞醫(yī)藥科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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