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    FgGCV1基因及其敲除突變體在防控禾谷鐮刀菌中的應用制造技術

    技術編號:44413301 閱讀:4 留言:0更新日期:2025-02-25 10:28
    本發明專利技術公開了FgGCV1基因及其敲除突變體在防控禾谷鐮刀菌中的應用,屬于微生物技術領域。本發明專利技術首次公開敲除FgGCV1基因后能夠抑制禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的產生,進而防控禾谷鐮刀菌,防治小麥赤霉病,FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。FgGCV1基因缺失突變體特異調控禾谷鐮刀菌有性生殖過程子囊孢子的成熟,而子囊孢子作為小麥赤霉病的重要初級侵染源,因此敲除FgGCV1基因后能夠阻斷小麥赤霉病的傳播途徑,因此本發明專利技術對禾谷鐮刀菌防治和綠色生態防控具有重要的作用,也是研究絲狀子囊真菌有性生殖過程的重要資源。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及微生物,更具體地說是涉及 fggcv1基因及其敲除突變體在防控禾谷鐮刀菌中的應用。


    技術介紹

    1、禾谷鐮刀菌( fusarium?graminearum)是一種同宗配合的植物病原絲狀子囊真菌,主要侵染小麥、大麥、玉米等禾谷類經濟作物,引起小麥赤霉病和玉米莖腐病,降低糧食作物的產量及品質,并通過有性生殖在小麥麥穗、秸稈處產生大量子囊殼。子囊殼是禾谷鐮刀菌在田間越冬的重要形式,在小麥揚花期階段,子囊殼噴射產生成熟的子囊孢子,隨風、雨水或昆蟲傳播至小麥上,作為初級侵染源侵染小麥穗部,引起小麥赤霉病。

    2、子囊孢子在禾谷鐮刀菌侵染循環中起著至關重要的作用。因此,鑒定禾谷鐮刀菌中特異調控有性生殖過程中子囊孢子發育相關基因及其突變體,不僅能夠揭示有性生殖過程子囊孢子的形成機理,而且能為小麥赤霉病的綠色生態防治和傳播提供科學的策略。ph-1菌株是禾谷鐮刀菌第一個全基因組測序的菌株,被廣泛應用于禾谷鐮刀菌遺傳轉化與基因功能研究當中。

    3、然而,盡管當前對禾谷鐮刀菌有性生殖和子囊孢子發育相關基因的功能研究取得了一定進展,但許多基因的具體功能和作用機制仍不清楚。


    技術實現思路

    1、有鑒于此,本專利技術的目的是針對現有技術的不足,提供敲除 fggcv1基因及其敲除突變體在防控禾谷鐮刀菌中的應用。

    2、本專利技術對禾谷鐮刀菌野生型ph-1菌株中一個氨甲基轉移酶(aminomethyltransferase)基因進行基因敲除,發現了一個不影響生長及子囊殼產生,卻特異阻斷子囊殼中子囊孢子產生的突變體,將其命名為δ fggcv1,對應的基因命名為 fggcv1,并研究上述基因及其敲除突變體的應用。

    3、為了實現上述目的,本專利技術采用如下技術方案:

    4、第一方面,本專利技術提供 fggcv1基因在以下(1)-(3)任一項中的應用:

    5、(1)防控禾谷鐮刀菌;

    6、(2)抑制禾谷鐮刀菌子囊孢子形成;

    7、(3)防治小麥赤霉??;

    8、其中,所述 fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    9、進一步地,所述 fggcv1基因抑制禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的產生,進而防治禾谷鐮刀菌。

    10、第二方面,本專利技術提供一種禾谷鐮刀菌 fggcv1基因敲除突變體δ fggcv1,所述突變體δ fggcv1為通過引物擴增目的片段、利用雙關節pcr(double-joint?pcr)方法構建同源重組片段,并將其導入禾谷鐮刀菌菌株ph-1的原生質體中,通過同源重組敲除 fggcv1基因而獲得,所述 fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    11、第三方面,本專利技術提供一種抗小麥赤霉病的藥劑,所述藥劑中含有抑制 fggcv1基因表達的物質,所述 fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    12、第四方面,本專利技術提供一種防治禾谷鐮刀菌引起的小麥赤霉病的方法,包括以下步驟:在小麥生長過程中,外源噴施能夠抑制 fggcv1基因表達的物質,所述 fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    13、與現有技術相比,本專利技術的有益效果在于:

    14、本專利技術從禾谷鐮刀菌基因組中發現了一個新的特異調控有性生殖過程的基因 fggcv1,將 fggcv1基因從禾谷鐮刀菌中成功敲除后,所得到的禾谷鐮刀菌敲除突變體δ fggcv1的營養菌絲生長、分生孢子形成、子囊殼產生及產量均不受影響,但禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子形成顯著受到影響。有性生殖實驗結果顯示,該敲除突變體δ fggcv1在胡蘿卜誘導培養基上能形成正常大小的子囊殼,子囊殼壓片結果顯示突變體δ fggcv1子囊孢子的成熟過程受到阻礙,進一步子囊殼噴射實驗也顯示突變體δ fggcv1無法噴射子囊孢子。上述結果說明 fggcv1基因特異調控禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的形成及發育,因此, fggcv1基因及其編碼的蛋白和敲除突變體均可作為重要的候選靶標,對禾谷鐮刀菌的傳播和綠色生態防治具有重要的意義,以該基因或蛋白為靶標所研制的抗小麥赤霉病藥劑可以有效防控真菌病害, fggcv1基因也是研究絲狀子囊真菌有性生殖過程作用機制的重要基因資源。

    本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.FgGCV1基因在防控禾谷鐮刀菌中的應用,其特征在于,所述FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

    2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述FgGCV1基因抑制禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的產生,進而防治禾谷鐮刀菌。

    3.FgGCV1基因在抑制禾谷鐮刀菌子囊孢子形成中的應用,其特征在于,所述FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

    4.FgGCV1基因在防治小麥赤霉病中的應用,其特征在于,所述FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

    5.根據權利要求4所述的應用,其特征在于,所述FgGCV1基因抑制禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的產生,進而防治赤霉病。

    6.一種禾谷鐮刀菌FgGCV1基因敲除突變體ΔFgGCV1,其特征在于,所述突變體ΔFgGCV1通過引物擴增目的片段、利用雙關節PCR方法構建同源重組片段,并將其導入禾谷鐮刀菌菌株PH-1的原生質體中,然后利用同源重組敲除FgGCV1基因而獲得,所述FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

    7.如權利要求6所述的禾谷鐮刀菌FgGCV1基因敲除突變體ΔFgGCV1在防治小麥赤霉病中的應用。

    8.一種抗小麥赤霉病的藥劑,其特征在于,所述藥劑中含有抑制FgGCV1基因表達的物質,所述FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

    9.一種防治禾谷鐮刀菌引起的小麥赤霉病的方法,其特征在于,包括以下步驟:在小麥生長過程中,外源噴施能夠抑制FgGCV1基因表達的物質,所述FgGCV1基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

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    【技術特征摘要】

    1.fggcv1基因在防控禾谷鐮刀菌中的應用,其特征在于,所述fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述fggcv1基因抑制禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的產生,進而防治禾谷鐮刀菌。

    3.fggcv1基因在抑制禾谷鐮刀菌子囊孢子形成中的應用,其特征在于,所述fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    4.fggcv1基因在防治小麥赤霉病中的應用,其特征在于,所述fggcv1基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    5.根據權利要求4所述的應用,其特征在于,所述fggcv1基因抑制禾谷鐮刀菌有性生殖過程中子囊孢子的產生,進而防治赤霉病。

    6.一種禾谷鐮刀菌fggcv1基因敲除突變體δfgg...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:王潔,于彥春,阮班普陳飛張燕莉武麗敏,
    申請(專利權)人:杭州師范大學,
    類型:發明
    國別省市:

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