【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物醫(yī)學(xué)，尤其是涉及一種光聲探針及其制備方法與應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、腹主動(dòng)脈瘤(abdominal?aortic?aneurysm，aaa)是最常見(jiàn)的主動(dòng)脈病變之一，其最嚴(yán)重的后果來(lái)自于破裂，aaa破裂患者死亡率接近90％；高達(dá)50％的aaa破裂患者到達(dá)手術(shù)室時(shí)已死亡，且破裂患者圍術(shù)期死亡率也高達(dá)50％。由于大多數(shù)aaa在破裂前都沒(méi)有癥狀，許多患者發(fā)現(xiàn)aaa時(shí)病情已經(jīng)十分兇險(xiǎn)。而目前尚無(wú)逆轉(zhuǎn)或中止aaa疾病進(jìn)展的藥物，如果不能早期發(fā)現(xiàn)aaa，并及時(shí)干預(yù)，一旦到了aaa晚期，進(jìn)行急診手術(shù)的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)大大增加。
2、目前臨床上采用動(dòng)脈直徑作為aaa的診斷指標(biāo)和評(píng)估破裂風(fēng)險(xiǎn)的標(biāo)準(zhǔn)，多通過(guò)超聲和計(jì)算機(jī)斷層掃描血管造影等成像方式對(duì)主動(dòng)脈解剖結(jié)構(gòu)進(jìn)行連續(xù)評(píng)估，依賴動(dòng)脈瘤的直徑和形態(tài)來(lái)對(duì)疾病嚴(yán)重程度進(jìn)行分層從而實(shí)現(xiàn)aaa的監(jiān)測(cè)。但由于aaa的直徑擴(kuò)張并非線性進(jìn)展，超聲成像不足以及時(shí)、準(zhǔn)確地提供aaa預(yù)后，預(yù)測(cè)aaa破裂仍然具有很大的挑戰(zhàn)性。且基于大多數(shù)aaa在破裂前都沒(méi)有癥狀，因此亟需有效的檢測(cè)技術(shù)來(lái)精確評(píng)估深層血管的完整性和監(jiān)測(cè)aaa的進(jìn)展和破裂風(fēng)險(xiǎn)，以對(duì)疾病風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行分層，并及時(shí)有效地對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)個(gè)體進(jìn)行干預(yù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問(wèn)題之一。為此，本專利技術(shù)提出連接有解旋膠原靶向分子的光聲探針在制備檢測(cè)或輔助檢測(cè)心血管疾病的產(chǎn)品或制備預(yù)測(cè)或輔助預(yù)測(cè)動(dòng)脈瘤破裂風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
2、本申請(qǐng)還提出一種可以甄別血管壁膠原組織完整
3、本專利技術(shù)還提出了上述制備方法制得的光聲探針。
4、本專利技術(shù)還提出了一種試劑盒。
5、本專利技術(shù)的第一方面，提供了連接有解旋膠原靶向分子的光聲探針在a1)至a2)中任一項(xiàng)應(yīng)用；
6、a1)制備檢測(cè)或輔助檢測(cè)心血管疾病的產(chǎn)品；
7、a2)制備預(yù)測(cè)或輔助預(yù)測(cè)動(dòng)脈瘤破裂風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)品。
8、本專利技術(shù)至少具有如下有益效果：
9、連接有解旋膠原靶向分子的光聲探針可以特異性結(jié)合膠原分子發(fā)生解旋的血管病變組織，可用于動(dòng)脈瘤等血管結(jié)構(gòu)功能紊亂疾病的非侵入性光聲超聲成像檢測(cè)，能夠?qū)崿F(xiàn)aaa的無(wú)創(chuàng)早期檢測(cè)和破裂風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，為臨床aaa的早期干預(yù)和精準(zhǔn)治療提供強(qiáng)有力工具，并有望在多種其它膠原組織損傷的心血管疾病(包括但不限于腹主動(dòng)脈瘤、顱內(nèi)動(dòng)脈瘤、主動(dòng)脈夾層、心肌梗死、動(dòng)脈粥樣硬化、瓣膜病變等)的精準(zhǔn)檢測(cè)中發(fā)揮作用，可活體預(yù)警動(dòng)脈瘤的破裂風(fēng)險(xiǎn)。
10、實(shí)施例的光聲探針可深入穿透生物組織、具有高分辨率，靈敏度高，可活體檢測(cè)動(dòng)脈瘤早期階段(直徑增粗小于50％)的動(dòng)脈擴(kuò)張等，在早期、精準(zhǔn)示蹤aaa等深層組織方面的具有較大的潛在應(yīng)用價(jià)值。
11、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述光聲檢測(cè)產(chǎn)品具有檢測(cè)心血管疾病、預(yù)測(cè)動(dòng)脈瘤破裂風(fēng)險(xiǎn)中的至少一種作用。
12、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述心血管疾病包括腹主動(dòng)脈瘤、顱內(nèi)動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈瘤、主動(dòng)脈夾層、心肌梗死、動(dòng)脈粥樣硬化、瓣膜病變中的至少一種。
13、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述動(dòng)脈瘤包括但不限于腹主動(dòng)脈瘤、顱內(nèi)動(dòng)脈瘤或頸動(dòng)脈瘤。
14、本專利技術(shù)的第二方面，提供了一種光聲探針的制備方法，包括如下步驟：
15、s1、制備血清白蛋白水溶液、花菁染料、脫水溶劑、交聯(lián)劑的混合物，反應(yīng)，即得血清白蛋白-花菁染料納米粒子；
16、所述脫水溶劑包括丙酮、甲醇、乙腈、二氯甲烷、四氫呋喃中的至少一種；
17、s2、所述血清白蛋白-花菁染料納米粒子與解旋膠原靶向分子連接，即得所述光聲探針。
18、根據(jù)本專利技術(shù)實(shí)施例的制備方法，至少具有如下有益效果：
19、前期研究表明，利用吲哚菁綠(icg)對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行近紅外二區(qū)熒光活體成像時(shí)，穿透能力不足，只能活體顯影體表淺表血管，對(duì)腹主動(dòng)脈等位置深的血管顯影效果差，難以實(shí)現(xiàn)活體可視化(如圖1所示)，且無(wú)法進(jìn)行光聲成像。實(shí)施例的制備方法步驟簡(jiǎn)單，可制備得到深入穿透生物組織、具有高分辨率、活體成像效果好的特異性檢測(cè)血管膠原分子解旋的光聲探針。
20、術(shù)語(yǔ)“脫水溶劑”指用于除去水的溶劑。
21、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述花菁染料包括cy7、ir825、ir780、ir806、ir820、ir783、icg、ir1061、fd1080中的至少一種。
22、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述解旋膠原靶向分子包括多肽、抗體、適配體中的至少一種。
23、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述解旋膠原靶向分子包括與解旋膠原雜交結(jié)合的多肽。
24、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述解旋膠原靶向分子包括氨基酸序列為(gfo)n的多肽，n取自6～12之間的正整數(shù)，g為甘氨酸，f為氟代脯氨酸，o為羥脯氨酸。例如：所述n可以為6、7、8、9、10、11或12。
25、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述解旋膠原靶向分子包括氨基酸序列為(gfo)9的多肽。
26、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述交聯(lián)劑包括1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(edc)。
27、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述血清白蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白中的至少一種。
28、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述血清白蛋白水溶液的ph為7.5～9.5。例如：可以為7.5、8、8.5、9或9.5。
29、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述血清白蛋白水溶液中，血清白蛋白濃度為5g/l～50g/l。例如：可以為5g/l、10g/l、15g/l、20g/l、25g/l、30g/l、35g/l、40g/l、45g/l或50g/l。
30、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述血清白蛋白水溶液與所述脫水溶劑的體積比為1：1～5。例如：可以為1：1、1：1.5、1：2、1：2.5、1：3、1：3.5、1：4、1：4.5或1：5。
31、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述花菁染料與血清白蛋白的質(zhì)量比為1：1～10。例如：可以為1：1、1：2、1：3、1：4、1：5、1：6、1：7、1：8、1：9或1：10。
32、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述交聯(lián)劑的用量為0.05～0.5mg/mg血清白蛋白。例如：可以為0.05mg/mg血清白蛋白、0.1mg/mg血清白蛋白、0.2mg/mg血清白蛋白、0.3mg/mg血清白蛋白、0.4mg/mg血清白蛋白或0.5mg/mg血清白蛋白。
33、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述步驟s1的反應(yīng)時(shí)間為2h～8h。例如：可以為2h、2.5h、3h、3.5h、4h、4.5h、5h、5.5h、6h、6.5h、7h、7.5h或8h。
34、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述步驟s1的反應(yīng)溫度為20℃～40℃。例如：可以為20℃、25℃、30℃、35℃或40℃。
35、在本專利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述步驟s1包本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.連接有解旋膠原靶向分子的光聲探針在A1)至A2)中任一項(xiàng)應(yīng)用；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述心血管疾病包括腹主動(dòng)脈瘤、顱內(nèi)動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈瘤、主動(dòng)脈夾層、心肌梗死、動(dòng)脈粥樣硬化、瓣膜病變中的至少一種；
3.一種光聲探針的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述花菁染料包括Cy7、IR825、IR780、IR806、IR820、IR783、ICG、IR1061、FD1080中的至少一種；
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述血清白蛋白水溶液的pH為7.5～9.5；
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S1的反應(yīng)時(shí)間為2h～8h。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟S2包括：所述血清白蛋白-花菁染料納米粒子與DBCO-Sulfo-NHS酯反應(yīng)后，與修飾有疊氮基團(tuán)的解旋膠原靶向分子反應(yīng)，以連接所述血清白蛋白-花菁染料納米粒子和所述解旋膠原靶向分子，得到所述光聲探針。
8.根據(jù)權(quán)利要求7
9.一種光聲探針，其特征在于，由權(quán)利要求3至9任一項(xiàng)所述的制備方法制得。
10.一種試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求9所述的光聲探針。
...【技術(shù)特征摘要】
1.連接有解旋膠原靶向分子的光聲探針在a1)至a2)中任一項(xiàng)應(yīng)用；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述心血管疾病包括腹主動(dòng)脈瘤、顱內(nèi)動(dòng)脈瘤、頸動(dòng)脈瘤、主動(dòng)脈夾層、心肌梗死、動(dòng)脈粥樣硬化、瓣膜病變中的至少一種；
3.一種光聲探針的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述花菁染料包括cy7、ir825、ir780、ir806、ir820、ir783、icg、ir1061、fd1080中的至少一種；
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述血清白蛋白水溶液的ph為7.5～9.5；
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：李剛，朱泳樵，李旸，李滔，李曉靜，李楊，趙素文，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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