【技術實現步驟摘要】
本公開涉及新型納米材料及免疫層析檢測，具體地，涉及一種磁性熒光納米膜探針及其制備方法和應用。
技術介紹
1、目前一些成熟的病毒檢測技術已廣泛應用于實驗室和醫院檢查，如病毒分離、實時逆轉錄聚合酶鏈反應（rt-pcr）、基因組測序和酶聯免疫吸附測定（elisa）。然而，這些方法需要潔凈的房間、復雜的前處理和大型輸出儀器。因此不適合在條件有限或資源匱乏的地區使用。
2、免疫層析（ica）技術是目前最成熟、最受歡迎的poct檢測方法之一，具有快速、低成本和便攜等明顯的優勢。ica在個人健康自檢領域有著廣泛的應用。目前用于病毒檢測的ica技術的原理一般是基于雙抗體夾心格式，直接檢測病毒抗原(病毒粒子或病毒蛋白)，通常需要一對抗體（一個檢測抗體和一個捕獲抗體）修飾ica條帶的納米探針和測試線。抗體的種類和性能對ica的檢測性能有很大影響。針對新出現病毒的特異性抗體的制備需要較長的時間（一般為3-6個月），而且成本高昂。此外，納米探針表面修飾的抗體易變性，重復性差。在ica-上檢測多種病毒抗原需要多對特異性抗體，進一步增加了病毒檢測的難度。此外，目前主流的納米探針（如膠體aunps、乳膠微球和熒光微球）等球形納米探針在復雜的臨床樣品中只能產生一般的信號強度和較弱的穩定性，靈敏度不足。因此，亟需開發基于非抗體修飾的捕獲探針建立一種通用的ica技術同時和靈敏地監測多種病毒。
技術實現思路
1、為了解決上述技術問題，本公開的目的是提供一種磁性熒光納米膜探針，該磁性熒光納米膜探針具有強熒光性
2、為了實現上述目的，本公開第一方面提供一種磁性熒光納米膜探針，所述探針包括沿層疊方向依次設置的磁性基底膜層和量子點殼層；
3、所述量子點殼層為量子點層和第三陽離子聚合物夾層交替形成的多層層疊結構，沿所述層疊結構的層疊方向上的第一層和最后一層各自獨立地為所述量子點層，且在所述最后一層量子點層的背向氧化石墨烯納米片層的一側的表面偶聯有氨基苯硼酸。
4、可選地，所述層疊結構具有3層；所述量子點層中的量子點為cdse/zns-mpa量子點。
5、可選地，所述磁性基底膜層包括沿層疊方向依次設置的氧化石墨烯納米片層、第一陽離子聚合物夾層、fe3o4磁性納米顆粒層和第二陽離子聚合物夾層；其中，在所述氧化石墨烯納米片層中，氧化石墨烯納米片的平均直徑為100-2000nm，優選為500-800nm；在所述fe3o4磁性納米顆粒層中，fe3o4磁性納米顆粒的平均粒徑為20-200nm，優選為50-100nm。
6、可選地，所述第一陽離子聚合物夾層、第二陽離子聚合物夾層和第三陽離子聚合物夾層各自獨立地為聚乙烯亞胺。
7、本公開第二方面提供第一方面所述的磁性熒光納米膜探針的制備方法，該方法包括如下步驟：
8、s1、將氧化石墨烯納米片的水分散液與第一陽離子聚合物的水溶液混合并進行第一超聲處理，得到go@pei納米片；
9、s2、將所述go@pei納米片的水分散液與fe3o4磁性納米顆粒的水分散液混合并進行第二超聲處理，得到gofe磁性納米膜；
10、s3、將所述gofe磁性納米膜的水分散液與第二陽離子聚合物的水溶液混合并進行第三超聲處理，得到gofe@pei磁性基底膜；
11、s4、將cdse/zns-mpa量子點加入到所述gofe@pei磁性基底膜的水分散液中并進行第四超聲處理，得到gofe@qd磁性納米膜；
12、將所述gofe@qd磁性納米膜的水分散液與第三陽離子聚合物的水溶液混合并進行第五超聲處理，得到gofe@qd@pei磁性納米膜；
13、將cdse/zns-mpa量子點加入到所述gofe@qd@pei磁性納米膜的水分散液中并進行第六超聲處理，得到gofe@dqd磁性納米膜；
14、s5、將所述gofe@dqd磁性納米膜與氨基苯硼酸的水溶液混合進行孵育處理。
15、可選地，在步驟s1中，所述氧化石墨烯納米片的平均直徑為100-2000nm，優選為500-800nm；所述氧化石墨烯納米片的水分散液的質量濃度為0.1-5mg/ml；所述第一陽離子聚合物的水溶液的質量濃度為0.1-5mg/ml；所述氧化石墨烯納米片的水分散液與第一陽離子聚合物的水溶液的體積比為0.5-5：1；
16、在步驟s2中，所述fe3o4磁性納米顆粒的平均粒徑為20-200nm，優選為50-100nm；所述fe3o4磁性納米顆粒的水分散液的質量濃度為5-20mg/ml；所述go@pei納米片的水分散液的質量濃度為0.1-20mg/ml；所述go@pei納米片的水分散液與fe3o4磁性納米顆粒的水分散液的體積比為500-1000：1；
17、在步驟s3中，所述gofe磁性納米膜的水分散液的質量濃度為0.1-20mg/ml；所述第二陽離子聚合物的水溶液的質量濃度為0.1-5mg/ml；所述gofe磁性納米膜的水分散液與第二陽離子聚合物的水溶液的體積比為1-5：1；
18、在步驟s4中，所述gofe@pei磁性基底膜的水分散液的質量濃度為0.1-20mg/ml；相對于每100ml的gofe@pei磁性基底膜的水分散液，所述cdse/zns-mpa量子點的添加量為0.01-0.1mg；所述第三陽離子聚合物的水溶液的質量濃度為0.1-5mg/ml；所述gofe@qd磁性納米膜的水分散液的質量濃度為0.1-20mg/ml；所述gofe@qd磁性納米膜的水分散液與第三陽離子聚合物的水溶液的體積比為1-5：1；所述gofe@qd@pei磁性納米膜的水分散液質量濃度為0.1-20mg/ml；相對于每100ml的gofe@qd@pei磁性納米膜的水分散液，所述cdse/zns-mpa量子點的添加量為0.01-0.1mg；
19、在步驟s5中，所述氨基苯硼酸的水溶液的質量濃度為0.01-0.5mg/ml；相對于每100ml的氨基苯硼酸的水溶液，所述gofe@dqd磁性納米膜的添加量為0.01-0.1mg。
20、本公開第三方面提供第一方面所述的磁性熒光納米膜探針或第二方面所述的方法制備得到的磁性熒光納米膜探針在非疾病診斷和/或治療目的的免疫層析法檢測病毒糖蛋白中的應用，或者在制備檢測病毒糖蛋白的產品中的應用。
21、本公開第四方面提供一種用于檢測病毒糖蛋白的試劑盒，所述試劑盒包括第一方面所述的磁性熒光納米膜探針或第二方面所述的方法制備得到的磁性熒光納米膜探針。
22、可選地，所述試劑盒還包括免疫層析試紙條，所述免疫層析試紙條包括依次相連接的樣品墊、層析膜和吸收墊，所述層析膜上設置有多條檢測線和質控線；每條所述檢測線分別負載抗病毒糖蛋白抗體；所述質控線負載鏈霉親和素。
23、可選地，所述檢測線為3條，3條檢測線分別負載抗sars-cov-2抗原刺突蛋白抗體、抗mpxva29本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種磁性熒光納米膜探針，其特征在于，所述探針包括沿層疊方向依次設置的磁性基底膜層和量子點殼層；
2.根據權利要求1所述的磁性熒光納米膜探針，其中，所述層疊結構具有3層；
3.根據權利要求1所述的磁性熒光納米膜探針，其中，所述磁性基底膜層包括沿層疊方向依次設置的氧化石墨烯納米片層、第一陽離子聚合物夾層、Fe3O4磁性納米顆粒層和第二陽離子聚合物夾層；
4.根據權利要求3所述的磁性熒光納米膜探針，其中，所述第一陽離子聚合物夾層、第二陽離子聚合物夾層和第三陽離子聚合物夾層各自獨立地為聚乙烯亞胺。
5.權利要求1-4中任意一項所述的磁性熒光納米膜探針的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：
6.根據權利要求5所述的方法，其中，在步驟S1中，所述氧化石墨烯納米片的平均直徑為100-2000nm，優選為500-800nm；所述氧化石墨烯納米片的水分散液的質量濃度為0.1-5mg/mL；所述第一陽離子聚合物的水溶液的質量濃度為0.1-5mg/mL；所述氧化石墨烯納米片的水分散液與第一陽離子聚合物的水溶液的體積比為0.5-5：1
7.權利要求1-4中任意一項所述的磁性熒光納米膜探針或權利要求5-6中任意一項所述的方法制備得到的磁性熒光納米膜探針在非疾病診斷和/或治療目的的免疫層析法檢測病毒糖蛋白中的應用，或者在制備檢測病毒糖蛋白的產品中的應用。
8.一種用于檢測病毒糖蛋白的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1-4中任意一項所述的磁性熒光納米膜探針或權利要求5-6中任意一項所述的方法制備得到的磁性熒光納米膜探針。
9.根據權利要求8所述的試劑盒，其中，所述試劑盒還包括免疫層析試紙條，所述免疫層析試紙條包括依次相連接的樣品墊、層析膜和吸收墊，所述層析膜上設置有多條檢測線和質控線；
10.根據權利要求9所述的試劑盒，其中，所述檢測線為3條，3條檢測線分別負載抗SARS-CoV-2抗原刺突蛋白抗體、抗MPXVA29包膜蛋白抗體和抗EBOV糖蛋白抗體。
...【技術特征摘要】
1.一種磁性熒光納米膜探針，其特征在于，所述探針包括沿層疊方向依次設置的磁性基底膜層和量子點殼層；
2.根據權利要求1所述的磁性熒光納米膜探針，其中，所述層疊結構具有3層；
3.根據權利要求1所述的磁性熒光納米膜探針，其中，所述磁性基底膜層包括沿層疊方向依次設置的氧化石墨烯納米片層、第一陽離子聚合物夾層、fe3o4磁性納米顆粒層和第二陽離子聚合物夾層；
4.根據權利要求3所述的磁性熒光納米膜探針，其中，所述第一陽離子聚合物夾層、第二陽離子聚合物夾層和第三陽離子聚合物夾層各自獨立地為聚乙烯亞胺。
5.權利要求1-4中任意一項所述的磁性熒光納米膜探針的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：
6.根據權利要求5所述的方法，其中，在步驟s1中，所述氧化石墨烯納米片的平均直徑為100-2000nm，優選為500-800nm；所述氧化石墨烯納米片的水分散液的質量濃度為0.1-5mg/ml；所述第一陽離子聚合物的水溶液的質量濃度...
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