【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域及日化領(lǐng)域,具體涉及高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷組織提取物的制備方法。
技術(shù)介紹
1、痤瘡是毛囊皮脂腺單位的一種慢性炎癥性皮膚病，主要好發(fā)于青少年，據(jù)資料顯示，痤瘡疾病約占皮膚科就診患者的15％。流行病學(xué)研究顯示，大約80％～90％青少年不同程度患有痤瘡。對(duì)青少年的心理和社交影響很大。
2、痤瘡丙酸桿菌的分布和數(shù)量在不同年齡人群的不同部位間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在頭面部等皮脂腺豐富的部位最多，而軀干中部、下肢和上臂最少。有學(xué)者比較痤瘡丙酸桿菌的檢出率，在11-15歲，痤瘡患者與正常人群的檢出率之比高達(dá)15000:1，說明青春期后痤瘡丙酸桿菌在痤瘡患者與正常人群之間無差異。
3、痤瘡丙酸桿菌的結(jié)構(gòu)、分布和生理特點(diǎn)決定其在痤瘡發(fā)病中的重要作用，尤其與痤瘡的炎癥損害及嚴(yán)藿程度密切有關(guān)。目前，針對(duì)痤瘡丙酸桿菌的痤瘡治療方法眾多，包括應(yīng)用四環(huán)素類、克林霉素、紅霉索等治療和過氧苯甲酰或5一氨基酮戊酸光動(dòng)力療法等。但長(zhǎng)期使用抗菌藥物或激素藥物治療痤瘡，易出現(xiàn)細(xì)菌耐藥、藥物依賴等不良后果,耐藥性痤瘡丙酸桿菌攜帶情況呈逐年上升的趨勢(shì)，其中最常見的是紅霉素耐藥；發(fā)現(xiàn)經(jīng)過抗生素治療的患者耐藥菌攜帶率明顯高于未接受治療的患者，治療無效或者病情復(fù)發(fā)者耐藥菌的攜帶率高于有療效的患者，提示口服或外用抗生素均可誘導(dǎo)痤瘡丙酸桿菌產(chǎn)生耐藥性，與治療失敗有關(guān)。
4、痤瘡是毛囊皮脂腺單位的一種慢性炎癥性皮膚病，主要好發(fā)于青少年，對(duì)青少年的心理和社交影響很大。痤瘡丙酸桿菌與痤瘡炎癥的發(fā)生密切相關(guān)，開發(fā)一款替
5、本專利技術(shù)旨在突破雪蓮愈傷細(xì)胞擴(kuò)繁和懸浮培養(yǎng)大量制備的新技術(shù)，建立誘導(dǎo)培養(yǎng)促進(jìn)愈傷細(xì)胞提取物對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑制效果，擴(kuò)大雪蓮愈傷細(xì)胞提取物在祛痘化妝品中的應(yīng)用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的就是提供一種高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷細(xì)胞提取物制備方法，在建立有效的提取方法的同時(shí)研究其在抑制痤瘡丙酸桿菌和/或抗氧化效果，開拓其在化妝品領(lǐng)域的應(yīng)用。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本專利技術(shù)提供了如下方案：
3、本專利技術(shù)提供一種高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷細(xì)胞提取物制備方法，制備方法包括以下步驟：
4、步驟s1：配制雪蓮愈傷細(xì)胞組培瓶培養(yǎng)基(g/l)：b5培養(yǎng)基3.2，蔗糖30，6-芐氨基嘌呤(6-ba)0.0002，萘乙酸(naa)0.004，聚乙烯吡咯啉酮2，瓊脂粉8-10；
5、步驟s2：在無菌超凈臺(tái)用鑷子挑選質(zhì)地松散的愈傷組織顆粒分成小塊轉(zhuǎn)接到組培瓶中進(jìn)行繼代培養(yǎng)。每擱10天繼代一次。
6、優(yōu)選地，步驟s2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)去掉褐化的細(xì)胞，挑選顏色、狀態(tài)良好的愈傷進(jìn)行繼代培養(yǎng)。
7、進(jìn)一步優(yōu)選地：步驟s2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)挑選淺黃色的愈傷細(xì)胞轉(zhuǎn)接到新鮮的愈傷組織培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)增繁殖。
8、優(yōu)選地，步驟s2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)若愈傷組織表面含有很多的非胚性白色絮狀物，可以用解剖刀將白色的絮狀物先刮掉然后再進(jìn)行切塊培養(yǎng)。
9、步驟s3:將誘導(dǎo)劑按照需要的添加比例添加到組培瓶培養(yǎng)基中，滅菌后溫度降到50攝氏度左右，將培養(yǎng)基分裝到組培瓶中，待凝固后，將長(zhǎng)好的愈傷細(xì)胞顆粒轉(zhuǎn)接到培養(yǎng)瓶中。放到培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
10、優(yōu)選地，步驟s3中所述誘導(dǎo)劑為甜菜堿，質(zhì)量濃度在0.5-5％。
11、進(jìn)一步優(yōu)選地：步驟s3中所述誘導(dǎo)劑為甜菜堿，質(zhì)量濃度在1-3％。
12、更進(jìn)一步優(yōu)選地：步驟s3中所述誘導(dǎo)劑為甜菜堿，質(zhì)量濃度為2％。
13、再一方面，本專利技術(shù)還提供了一種上述的雪蓮愈傷組織物在制備在抑制痤瘡丙酸桿菌和/或抗氧化化妝品中的應(yīng)用。
14、又一方面，本專利技術(shù)還提供了一種抑制痤瘡丙酸桿菌化妝品，包括上述的雪蓮愈傷組織提取物。
15、又一方面，本專利技術(shù)還提供了一種抗氧化化妝品，包括上述的雪蓮愈傷組織提取物。
16、本專利技術(shù)公開了以下技術(shù)效果：
17、使用本專利技術(shù)得到的雪蓮愈傷細(xì)胞，通過甜菜堿誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的愈傷細(xì)胞提取物對(duì)痤瘡丙酸桿菌的抑制效果更為明顯，抑制效達(dá)到了88.5％以上；添加量0.20mg/ml甜菜堿誘導(dǎo)愈傷細(xì)胞提取物的濃度下，還具有較強(qiáng)的抗氧化性。
18、本專利技術(shù)所述雪蓮愈傷細(xì)胞提取物可進(jìn)一步開發(fā)用于祛痘化妝品。
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1.一種高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷細(xì)胞提取物制備方法，其特征在于，本專利技術(shù)提供一種高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷細(xì)胞提取物制備方法，制備方法包括以下步驟：
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，采用的培養(yǎng)基組成為：(g/L)：B5培養(yǎng)基3.2，蔗糖30，6-芐氨基嘌呤(6-BA)0.0002，萘乙酸(NAA)0.004，聚乙烯吡咯啉酮2，瓊脂粉8-10。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟S2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)去掉褐化的細(xì)胞，挑選顏色、狀態(tài)良好的愈傷進(jìn)行繼代培養(yǎng)。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在繼代時(shí)挑選淺黃色的愈傷細(xì)胞轉(zhuǎn)接到新鮮的愈傷組織培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)增繁殖。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟S2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)若愈傷組織表面含有很多的非胚性白色絮狀物，可以用解剖刀將白色的絮狀物先刮掉然后再進(jìn)行切塊培養(yǎng)。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟S3中所述誘導(dǎo)劑為甜菜堿，質(zhì)量濃度在0.5-5％。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟S3中所
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟S3中所述誘導(dǎo)劑為甜菜堿，質(zhì)量濃度2％。
9.一種權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的雪蓮愈傷組織提取物在抑制痤瘡丙酸桿菌和/或抗氧化化妝品中的應(yīng)用。
10.一種抑制痤瘡丙酸桿菌的化妝品，其特征在于，包括權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的雪蓮愈傷組織提取物。
11.一種抗氧化的化妝品，其特征在于，包括權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的雪蓮愈傷組織提取物。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷細(xì)胞提取物制備方法，其特征在于，本發(fā)明提供一種高效抑制痤瘡丙酸桿菌的雪蓮愈傷細(xì)胞提取物制備方法，制備方法包括以下步驟：
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，采用的培養(yǎng)基組成為：(g/l)：b5培養(yǎng)基3.2，蔗糖30，6-芐氨基嘌呤(6-ba)0.0002，萘乙酸(naa)0.004，聚乙烯吡咯啉酮2，瓊脂粉8-10。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)去掉褐化的細(xì)胞，挑選顏色、狀態(tài)良好的愈傷進(jìn)行繼代培養(yǎng)。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在繼代時(shí)挑選淺黃色的愈傷細(xì)胞轉(zhuǎn)接到新鮮的愈傷組織培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)增繁殖。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s2中所述繼代培養(yǎng)，在繼代時(shí)若愈...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：王愛嘉，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：王愛嘉，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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