本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種ACE抑制肽及其篩選方法與應(yīng)用，屬于生物活性肽技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種ACE抑制肽，所述ACE抑制肽的氨基酸序列如RF、RW或KF所示。按照本發(fā)明專利技術(shù)方法以大菱鲆肌肉蛋白為研究對(duì)象，利用虛擬酶解輔助活性預(yù)測(cè)，結(jié)合生物信息學(xué)方法進(jìn)行了初步篩選，采用半柔性分子對(duì)接的方法將多肽與ACE三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行對(duì)接進(jìn)一步篩選得到ACE抑制肽，本發(fā)明專利技術(shù)篩選得到的ACE抑制肽對(duì)ACE抑制率為76.61％、80.71％、79.18％，相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)提取ACE抑制肽的方法無(wú)需進(jìn)行酶解，耗時(shí)少，并且成本更低。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物活性肽，尤其涉及一種ace抑制肽及其篩選方法與應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、ace，又稱激酶ⅱ，是一種依賴于鋅離子(zn2+)體現(xiàn)活性，在血壓調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用的二肽基羧肽酶。ace抑制肽被認(rèn)為是輔助預(yù)防高血壓的有效成分。與人工合成肽相比，食源性ace抑制肽具有無(wú)副作用、種類多、易制備等優(yōu)點(diǎn)。2005年，我國(guó)首次從魚(yú)蛋白水解物中分離得到高純度的ace抑制肽，目前，國(guó)際上已報(bào)道上百種海洋生物(蛤蜊、沙丁魚(yú)、比目魚(yú)等)來(lái)源的ace抑制肽。食源性海洋生物活性肽是預(yù)防/治療生活習(xí)慣病更為健康、自然的替代選擇。大菱鲆，又稱多寶魚(yú)，肉質(zhì)鮮嫩、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高。我國(guó)大菱鲆產(chǎn)業(yè)規(guī)模居全球鲆鰈類養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)之首，是我國(guó)海水魚(yú)類的支柱產(chǎn)業(yè)之一，其蛋白含量豐富，魚(yú)蛋白水解產(chǎn)物(fphs)均具有較高的消化率，具有很高的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。
2、食源性活性肽的提取方法有水解法、酶解法、微生物發(fā)酵法、超聲波輔助提取法和微波輔助提取法等。其中酶解法是目前最為常用的方法之一。通過(guò)酶解法制備的多肽能夠高效選擇性地切斷特定的肽鍵，獲得較高純度的目標(biāo)肽段，而且酶解過(guò)程不會(huì)破壞其生物活性的核心結(jié)構(gòu)，酶解產(chǎn)物具有更強(qiáng)的活性。但酶解過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng)、成本高是亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題。
3、基于此，提出本專利技術(shù)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于提供一種ace抑制肽及其篩選方法與應(yīng)用，以解決現(xiàn)有技術(shù)中ace抑制肽提取方法耗時(shí)長(zhǎng)、成本高的問(wèn)題。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)提供以下技術(shù)方案：</p>3、本專利技術(shù)提供了一種ace抑制肽，所述ace抑制肽的氨基酸序列如rf、rw或kf所示。
4、本專利技術(shù)提供了所述的ace抑制肽的篩選方法，包括如下步驟：
5、(1)將蛋白在溫度為23～27℃下進(jìn)行虛擬酶解，得到多肽；
6、(2)將步驟(1)得到的多肽進(jìn)行數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)，篩選出具有ace抑制活性的肽段；
7、(3)對(duì)步驟(2)篩選得到的肽段進(jìn)行生物活性預(yù)測(cè)，篩選活性評(píng)分＞0.5的肽段作為活性肽；
8、(4)對(duì)步驟(3)得到的活性肽進(jìn)行水溶性和毒性分析，同時(shí)對(duì)步驟(3)得到的活性肽構(gòu)建三維結(jié)構(gòu)，與ace三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行半柔性分子對(duì)接，水溶性好、無(wú)毒并且-cdockerinteraction?energy對(duì)接值和-cdocker?energy對(duì)接值均＞60的活性肽即為ace抑制肽。
9、優(yōu)選的，步驟(1)中所述蛋白為大菱鲆肌球蛋白。
10、優(yōu)選的，步驟(1)中所述虛擬酶解的酶為堿性蛋白酶，所述虛擬酶解的ph值為8～10。
11、優(yōu)選的，步驟(2)中所述數(shù)據(jù)庫(kù)為biopep-uwm和ahtpdb。
12、優(yōu)選的，步驟(4)中所述水溶性分析包括對(duì)活性肽凈電荷和等電點(diǎn)的分析。
13、優(yōu)選的，步驟(4)中所述ace三維結(jié)構(gòu)的制備方法為去除ace天然晶體三維結(jié)構(gòu)中的水分子，保留zn2+和cl-。
14、優(yōu)選的，步驟(4)中所述半柔性分子對(duì)接的半徑為半柔性分子對(duì)接的中心坐標(biāo)為x：38.977；y：38.645；z：50.183。
15、本專利技術(shù)還提供了所述的ace抑制肽或所述的篩選方法篩選得到的ace抑制肽在制備治療和/或預(yù)防高血壓的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
16、本專利技術(shù)具有如下技術(shù)效果和優(yōu)點(diǎn)：
17、本專利技術(shù)提供了一種ace抑制肽及其篩選方法與應(yīng)用，以大菱鲆肌肉蛋白為研究對(duì)象，利用虛擬酶解輔助活性預(yù)測(cè)，結(jié)合生物信息學(xué)方法進(jìn)行了初步篩選，采用半柔性分子對(duì)接的方法將多肽與ace三維結(jié)構(gòu)進(jìn)行對(duì)接進(jìn)一步篩選得到ace抑制肽，本專利技術(shù)篩選得到的ace抑制肽對(duì)ace抑制率為76.61％、80.71％、79.18％，相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)提取ace抑制肽的方法無(wú)需進(jìn)行酶解，耗時(shí)少，并且成本更低。
本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種ACE抑制肽，其特征在于，所述ACE抑制肽的氨基酸序列如RF、RW或KF所示。
2.權(quán)利要求1所述的ACE抑制肽的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(1)中所述蛋白為大菱鲆肌球蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(1)中所述虛擬酶解的酶為堿性蛋白酶，所述虛擬酶解的pH值為8～10。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(2)中所述數(shù)據(jù)庫(kù)為BIOPEP-UWM和AHTPDB。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(4)中所述水溶性分析包括對(duì)活性肽凈電荷和等電點(diǎn)的分析。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(4)中所述ACE三維結(jié)構(gòu)的制備方法為去除ACE天然晶體三維結(jié)構(gòu)中的水分子，保留Zn2+和Cl-。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(4)中所述半柔性分子對(duì)接的半徑為半柔性分子對(duì)接的中心坐標(biāo)為X：38.977；Y：38.645；Z：50.183。
>9.權(quán)利要求1所述的ACE抑制肽或權(quán)利要求2～8任意一項(xiàng)所述的篩選方法篩選得到的ACE抑制肽在制備治療和/或預(yù)防高血壓的產(chǎn)品中的應(yīng)用。...
【技術(shù)特征摘要】
1.一種ace抑制肽，其特征在于，所述ace抑制肽的氨基酸序列如rf、rw或kf所示。
2.權(quán)利要求1所述的ace抑制肽的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(1)中所述蛋白為大菱鲆肌球蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(1)中所述虛擬酶解的酶為堿性蛋白酶，所述虛擬酶解的ph值為8～10。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方法，其特征在于，步驟(2)中所述數(shù)據(jù)庫(kù)為biopep-uwm和ahtpdb。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的篩選方...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：趙慧，盧航，田元勇，魯雪峰，王天雨，簡(jiǎn)恒源，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：大連海洋大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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