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【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物產物,具體為一種噬鹽菌絲體蛋白及其制備方法。
技術介紹
1、嗜鹽菌絲體蛋白是指在高鹽環境中生存的微生物產生的蛋白,這些微生物屬于極端環境微生物的一類,菌絲體是某些微生物,如真菌和一些細菌,用于生長和結構支撐的一種生物結構,在嗜鹽菌中,它們在高鹽環境下形成菌絲體以適應環境,嗜鹽菌絲體蛋白通常具有特殊的結構和功能,能夠幫助這些微生物在高鹽的極端環境中生存和繁殖,能夠產生多種蛋白質,這些蛋白質可以幫助它們在高滲透壓環境下維持細胞內的正常功能;
2、而目前噬鹽菌絲體蛋白在實際制備過程中,由于其組成成分中缺少輔助營養源,導致在噬鹽菌絲體蛋白制備過程中無法產生更多的蛋白質,同時缺少將全氮量作為衡量標準,使得蛋白質的質量和產量難以進行精確評估。
技術實現思路
1、本專利技術提供一種噬鹽菌絲體蛋白及其制備方法,可以有效解決上述
技術介紹
中提出目前噬鹽菌絲體蛋白在實際制備過程中,由于其組成成分中缺少輔助營養源,導致在噬鹽菌絲體蛋白制備過程中無法產生更多的蛋白質,同時缺少將全氮量作為衡量標準,使得蛋白質的質量和產量難以進行精確評估的問題。
2、為實現上述目的,本專利技術提供如下技術方案:一種噬鹽菌絲體蛋白,包括如下質量份的組分:噬鹽菌絲體1000-3000萬/克、植物蛋白5-25%、動物蛋白8-12%、有機質10-40%、活性酶500-1400萬/克、氨基酸20-50%和全氮量10-35%。
3、根據上述技術方案,所述噬鹽菌絲體選用具有耐鹽性強的噬
4、所述氨基酸用于補充必須的氨基酸,確保蛋白質的結構完整,所述全氮量是混合物中所有形式氮的總量,作為一種衡量標準,用以評估蛋白質的質量和產量。
5、一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,具體包括如下制備步驟:
6、s1、對制備原料進行選擇及準備;
7、s2、通過配置培養基來培養噬鹽菌;
8、s3、對培養的菌絲體進行收獲和處理;
9、s4、對蛋白質進行提取和純化;
10、s5、對提取的噬鹽菌絲體蛋白產物進行分析。
11、根據上述技術方案,所述s1中,噬鹽菌絲體蛋白的制備原料包括噬鹽菌絲體、植物蛋白、動物蛋白、有機質、活性酶、氨基酸和全氮量;
12、其中,噬鹽菌絲體為耐鹽性強、蛋白生產效率高的噬鹽菌,植物蛋白、動物蛋白、有機質和氨基酸是基礎營養成分,會激發噬鹽菌絲體產生更多蛋白質;
13、添加活性酶用來改善后續提取的蛋白質的特性,同時提高蛋白質的消化性,而全氮量是根據具體需要來進行調控,使全氮量的比例保證雜菌不影響噬鹽菌絲的生長;
14、在確定噬鹽菌絲體蛋白的制備原料后,對各原料按照規定的質量份進行分別稱量備用。
15、根據上述技術方案,所述s2中,具體包括培養基的配置和噬鹽菌的培養;
16、在培養基選擇配置過程中,根據噬鹽性能來選擇合適的噬鹽菌株,并根據培養條件配置培養基,培養條件包括營養成分和鹽的濃度,使配置的培養基能夠支持菌絲體在高鹽度條件下的生長;
17、其次,選擇能夠提供高鹽度環境的培養基,控制培養基的鹽度為2%-8%,培養基成分包括水、營養鹽、糖類、植物蛋白、動物蛋白和有機質,其中,糖類作為碳源,植物蛋白、動物蛋白和有機質作為營養源,將培養基的成分進行攪拌處理,確保培養基充分混合。
18、根據上述技術方案,所述s2中,在噬鹽菌的培養過程中,先將嗜鹽菌菌種接種到培養基中,在良好的通風條件和適宜的溫度條件下進行培養,通過對通風條件的控制來調控培養基培養環境的氧氣濃度,而培養基培養的溫度條件為30-37℃。
19、根據上述技術方案,所述s3中,是噬鹽菌在培養基中達到預定的培養時間后,且嗜鹽菌在培養基中生長至一定的密度時,對培養基中的菌絲體進行收獲,在菌絲體收獲時,利用離心處理的方式來進行,具體將含有生長菌絲體的培養基進行離心處理,在離心后進行靜置,此時收集到的沉淀即為菌絲體。
20、根據上述技術方案,所述s3中,在菌絲體經過離心收獲后,需要進一步對菌絲體進行清洗處理,用緩沖液多次洗滌以去除菌絲體中摻雜的培養基中的殘留物質。
21、根據上述技術方案,所述s4中,在對菌絲體進行處理后,對其進行蛋白質提取和純化,先將步驟s3中收獲的菌絲體進行稱量處理,接著通過研磨器來對菌絲體進行研磨破碎處理,通過充分研磨菌絲體來使其細胞壁破裂,釋放其中的蛋白質,確保蛋白質的完整提取;
22、在菌絲體進行充分的研磨破碎處理后,在其內部添加適當的溶劑來幫助蛋白質從細胞內釋放出來并保持其溶解性,然后通過高速離心的方式將蛋白質從細胞碎片中分離出來,收集上清液,離心時間為20-30min;
23、在獲取上清液后,需要進一步分離純化提取的蛋白質,采用鹽析法、色譜法、超濾技術中的一種來進行分離純化,其中色譜法包括離子交換色譜和凝膠過濾色譜,在純化處理后得到的嗜鹽菌絲體蛋白,且通過多步純化處理能夠確保嗜鹽菌絲體蛋白的純度,同時能夠有效去除其內部的雜質。
24、根據上述技術方案,所述s5中,是指對噬鹽菌絲體蛋白進行分析,采用光譜分析、電泳技術和質譜技術來分析鑒定分離得到的蛋白質,并驗證其蛋白純度和生物活性;
25、在噬鹽菌絲體蛋白經過分析鑒定后,向其內部加入防腐劑來避免蛋白變性,防腐劑為甘油或聚乙二醇中的一種,并后續在保存時對制得噬鹽菌絲體蛋白進行冷凍干燥處理,以保持其穩定性。
26、與現有技術相比,本專利技術的有益效果:
27、1、本專利技術在噬鹽菌絲體選擇過程中,選擇耐鹽性強、蛋白生產效率高的噬鹽菌,而將植物蛋白、動物蛋白和有機質作為噬鹽菌的輔助營養源,能夠激發噬鹽菌產生更多蛋白質,而添加的活性酶能夠用于噬鹽菌細胞的裂解,提高蛋白質的消化性,促進細胞內容物的釋放,氨基酸能夠補充噬鹽菌絲體在培養過程的必須氨基酸,確保蛋白質的結構完整性,且將全氮量作為衡量標準方便更為精確的評估蛋白質的質量和產量,同時保證雜菌不影響噬鹽菌絲的正常生長,通過上述組成成分原料制得的噬鹽菌絲體蛋白具有更高的穩定性,同時在提高生物技術產品的穩定性和功能活性等方面都有著重要意義。
28、2、通過離心處理的方式來方便將含有生長菌絲體的培養基進行離心處理,便于對培養基中的菌絲體進行有效的收獲,且通過無鹽或低鹽的緩沖液對菌絲體進行清洗處理,方便去除菌絲體中摻雜的培養基中的殘留物質,從而保證收獲菌絲體具有更高的純度,防止雜質殘留影響后續蛋白質提取和純化的質量;
29、而通過對提取的蛋白質進行分析,方便檢測蛋白質的純度和活性,保證噬鹽菌絲體蛋白的制備質量,接著冷凍干燥處理的手段和添加防腐劑,能夠在保存時,有效的保證噬鹽菌絲體蛋白的穩定性,防止其出現變性的現象。
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1.一種噬鹽菌絲體蛋白,其特征在于:包括如下質量份的組分:噬鹽菌絲體1000-3000萬/克、植物蛋白5-25%、動物蛋白8-12%、有機質10-40%、活性酶500-1400萬/克、氨基酸20-50%和全氮量10-35%。
2.根據權利要求1所述的一種噬鹽菌絲體蛋白,其特征在于:所述噬鹽菌絲體選用具有耐鹽性強的噬鹽菌,所述植物蛋白、動物蛋白和有機質作為噬鹽菌的輔助營養源,所述活性酶是指有益微生物產生的酶類物質,用于噬鹽菌細胞的裂解,促進細胞內容物的釋放;
3.一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,根據權利要求1-2任意一項所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:具體包括如下制備步驟:
4.根據權利要求3所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述S1中,噬鹽菌絲體蛋白的制備原料包括噬鹽菌絲體、植物蛋白、動物蛋白、有機質、活性酶、氨基酸和全氮量;
5.根據權利要求3所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述S2中,具體包括培養基的配置和噬鹽菌的培養;
6.根據權利要求5所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法
7.根據權利要求3所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述S3中,噬鹽菌在培養基中達到預定的培養時間后,且嗜鹽菌在培養基中生長至一定的密度時,對培養基中的菌絲體進行收獲,在菌絲體收獲時,利用離心處理的方式來進行,具體將含有生長菌絲體的培養基進行離心處理,在離心后進行靜置,此時收集到的沉淀即為菌絲體。
8.根據權利要求7所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述S3中,在菌絲體經過離心收獲后,需要進一步對菌絲體進行清洗處理,用緩沖液多次洗滌以去除菌絲體中摻雜的培養基中的殘留物質。
9.根據權利要求7所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述S4中,在對菌絲體進行處理后,對其進行蛋白質提取和純化,先將步驟S3中收獲的菌絲體進行稱量處理,接著通過研磨器來對菌絲體進行研磨破碎處理,通過充分研磨菌絲體來使其細胞壁破裂,釋放其中的蛋白質,確保蛋白質的完整提取;
10.根據權利要求3所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述S5中,是指對噬鹽菌絲體蛋白進行分析,采用光譜分析、電泳技術和質譜技術來分析鑒定分離得到的蛋白質,并驗證其蛋白純度和生物活性;
...【技術特征摘要】
1.一種噬鹽菌絲體蛋白,其特征在于:包括如下質量份的組分:噬鹽菌絲體1000-3000萬/克、植物蛋白5-25%、動物蛋白8-12%、有機質10-40%、活性酶500-1400萬/克、氨基酸20-50%和全氮量10-35%。
2.根據權利要求1所述的一種噬鹽菌絲體蛋白,其特征在于:所述噬鹽菌絲體選用具有耐鹽性強的噬鹽菌,所述植物蛋白、動物蛋白和有機質作為噬鹽菌的輔助營養源,所述活性酶是指有益微生物產生的酶類物質,用于噬鹽菌細胞的裂解,促進細胞內容物的釋放;
3.一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,根據權利要求1-2任意一項所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:具體包括如下制備步驟:
4.根據權利要求3所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述s1中,噬鹽菌絲體蛋白的制備原料包括噬鹽菌絲體、植物蛋白、動物蛋白、有機質、活性酶、氨基酸和全氮量;
5.根據權利要求3所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述s2中,具體包括培養基的配置和噬鹽菌的培養;
6.根據權利要求5所述的一種噬鹽菌絲體蛋白的制備方法,其特征在于:所述s2中,在噬鹽菌的培養過程中,先將嗜鹽菌菌種接種到培養基中,在通風條件和適宜的溫度條件下進行培養,通過對通風...
【專利技術屬性】
技術研發人員:賈玉麗,蘇道林,
申請(專利權)人:黑龍江省農意美農業科技有限公司,
類型:發明
國別省市:
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