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    一種赤芝發(fā)酵溶胞物及其制備方法和應(yīng)用技術(shù)

    技術(shù)編號(hào):44447228 閱讀:3 留言:0更新日期:2025-02-28 18:53
    本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種赤芝發(fā)酵溶胞物及其制備方法和在制備化妝品中的應(yīng)用。所述赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法包括誘導(dǎo)發(fā)酵、催化降解、膜過濾、噴霧干燥等步驟。本發(fā)明專利技術(shù)通過誘導(dǎo)內(nèi)源酶和金屬離子調(diào)節(jié)催化,能夠環(huán)保、經(jīng)濟(jì)、高效制備得到所述赤芝發(fā)酵溶胞物,制得的赤芝發(fā)酵溶胞物中靈芝多糖含量達(dá)到18%以上,其中β葡聚糖在靈芝多糖中含量大于5%。本發(fā)明專利技術(shù)經(jīng)過實(shí)驗(yàn)證明所述赤芝發(fā)酵溶胞物具有良好的抗氧化活性和延緩衰老功效,在延緩衰老化妝品領(lǐng)域中具有廣闊的市場應(yīng)用前景。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)屬于生物化妝品,具體涉及一種赤芝發(fā)酵溶胞物及其制備方法和應(yīng)用


    技術(shù)介紹

    1、靈芝,又稱為仙草,靈芝菌最早見于《神農(nóng)本草經(jīng)》中的“赤芝”,隨后在《名醫(yī)別錄》、《新修本草》、《中華子本》、《開元本草》中也有記載,《本草綱目》記載靈芝“補(bǔ)中益氣,增智慧,好顏色,久食輕身不老,延年神仙”。靈芝已收錄于《中國藥典》2020版一部,為多孔菌科真菌赤芝ganoderma?lucidum?(leyss.?ex?fr.?)karst.或紫芝?ganoderma?sinensezhao,?xu?et?zhang?的干燥子實(shí)體,其中赤芝為靈芝的代表性品種,具有補(bǔ)氣安神,止咳平喘的功效,用于心神不寧,失眠心悸,肺虛咳喘,虛勞短氣,不思飲食等。研究表明靈芝含有靈芝多糖、靈芝三萜、甾醇、核苷酸、肽聚糖等多種生物活性物質(zhì),具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗炎、調(diào)節(jié)腸道菌群等多種生物活性。

    2、傳統(tǒng)的靈芝生產(chǎn)方式為野生采摘或人工栽培靈芝子實(shí)體,存在生產(chǎn)周期長,受季節(jié)、氣候影響較大,原料質(zhì)量不穩(wěn)定,農(nóng)藥殘留等問題,限制了靈芝資源的開發(fā)利用。研究表明液體發(fā)酵產(chǎn)生的靈芝菌絲體與靈芝子實(shí)體具有相似的活性物含量和生理功能,而且具有物料來源穩(wěn)定,生產(chǎn)過程穩(wěn)定可控,不受環(huán)境影響,生產(chǎn)周期短,無農(nóng)藥殘留等優(yōu)勢,靈芝液體發(fā)酵研究逐漸受到重視。

    3、基于靈芝含有靈芝多糖、靈芝三萜、生物堿等多種生物活性物質(zhì)和生物活性,靈芝破壁提取物在藥品、食品、化妝品中的研究應(yīng)用及產(chǎn)品開發(fā)備受關(guān)注。靈芝破壁的方法有物理法、化學(xué)法、酶解法、生物發(fā)酵法等,如專利201810325349.0公開了一種通過高壓破壁提取靈芝菌絲體多糖的方法。專利zl202111098884.5公開了一種熱水動(dòng)態(tài)提取、微濾膜精濾、樹脂動(dòng)態(tài)脫色的工藝,制備低色度、高多糖含量靈芝提取物的方法。申請(qǐng)?zhí)?02310938577.6的專利公開了一種以赤芝子實(shí)體為原料,通過水提及堿提、分級(jí)醇沉、脫蛋白、離子交換柱層析、分子篩柱層析等步驟,制備具有預(yù)防或治療神經(jīng)退行性疾病的赤芝子實(shí)體多糖的方法。申請(qǐng)?zhí)?02210082453.8的專利公開了一種利用聯(lián)合使用酶解、閃式提取、微波提取,制備用于化妝品的靈芝子實(shí)體提取物的方法。專利zl202210321892.x公開了一種利用哈茨木霉菌對(duì)靈芝進(jìn)行破壁及破壁靈芝的提取方法,利用哈茨木霉菌發(fā)酵靈芝子實(shí)體粉進(jìn)行破壁,再進(jìn)行水提靈芝多糖,乙醇提取靈芝三萜。專利zl202111602728.8公開了一種酵母發(fā)酵靈芝粗提液、復(fù)合酶解制備酵母發(fā)酵靈芝提取物方法。溶劑提取由于細(xì)胞壁沒有破損,活性成分提取率低,而且存在有機(jī)溶劑殘留等問題;超聲波提取、微波提取、高壓均質(zhì)提取對(duì)設(shè)備要求高、能耗高,不利于工業(yè)化生產(chǎn);生物酶法和發(fā)酵法由于反應(yīng)條件比較溫和,產(chǎn)物提取率高,成為靈芝破壁的主要方式,但存在外源添加生物酶和發(fā)酵菌體,提取物成分復(fù)雜,活性功效物質(zhì)不明確等問題。


    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

    1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述問題,本專利技術(shù)的目的是提供了一種赤芝發(fā)酵溶胞物及其制備方法。本專利技術(shù)采用燕麥β葡聚糖超微粉和赤芝菌絲體超微粉補(bǔ)料發(fā)酵,定向誘導(dǎo)提高赤芝發(fā)酵菌絲體的內(nèi)源酶活力,進(jìn)而通過復(fù)合金屬離子催化內(nèi)源酶降解赤芝發(fā)酵菌絲體,經(jīng)濟(jì)高效的制備具有延緩衰老功效的赤芝發(fā)酵溶胞物。

    2、為實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的,本專利技術(shù)采用如下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):

    3、?本專利技術(shù)提供了一株赤芝czdg10,其分類命名為赤芝 ganoderma?lucidum?,保藏于中國典型培養(yǎng)物菌種保藏中心,其保藏編號(hào)為cctcc?no:m20241696。

    4、本專利技術(shù)還提供了一種赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,所述制備方法包括以下步驟:

    5、?(1)將保藏編號(hào)為cctcc:m20241696的赤芝czdg10接種到種子培養(yǎng)基,在25-28℃,140-160rpm培養(yǎng)5-7天,得種子液;

    6、?(2)將步驟(1)的種子液按10%(v/v)接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基,在25-28℃,140-160rpm發(fā)酵培養(yǎng)2天,向赤芝發(fā)酵培養(yǎng)物中添加0.2-0.8%(m/v)的滅菌誘導(dǎo)劑,繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)5-8天,當(dāng)赤芝發(fā)酵上清液葡萄糖含量低于2mg/l時(shí)終止發(fā)酵,離心,收集發(fā)酵菌絲體;

    7、?(3)向步驟(2)的發(fā)酵菌絲體中加入0.5-2倍重量的純化水,8000rpm勻漿5min,80-120mpa高壓均質(zhì)2次,得赤芝發(fā)酵菌絲體均質(zhì)液;

    8、?(4)向步驟(3)的赤芝發(fā)酵菌絲體均質(zhì)液中加入終濃度為1-10mmol/l的金屬離子催化劑,調(diào)節(jié)溫度40-50℃,ph?4.5-5.5,保溫反應(yīng)1-3小時(shí),繼續(xù)升溫至80-90℃反應(yīng)1小時(shí),冷卻至室溫,8000rpm離心10min,收集上清液,得赤芝發(fā)酵菌絲體溶胞液;

    9、?(5)向步驟(4)的赤芝發(fā)酵菌絲體溶胞液中加入0.5-1%(m/v)的活性炭吸附1小時(shí),0.45μm濾膜過濾,收集濾過液i,將濾過液i用截留分子量100kda的超濾膜超濾,收集濾過液ii,將濾過液ii用截留分子量200-300da的納濾膜納濾濃縮,濃縮至可溶性固形物濃度8-30%,收集截留液;

    10、?(6)將步驟(5)的截留液噴霧干燥得赤芝發(fā)酵溶胞物。

    11、進(jìn)一步的,所述步驟(1)中種子培養(yǎng)基為:葡萄糖?20g/l,酵母粉5g/l,磷酸二氫鉀1.5g/l,mgso4?0.5?g/l,硫胺素5mg/l。

    12、進(jìn)一步的,所述步驟(2)中發(fā)酵培養(yǎng)基為:葡萄糖?25g/l,酵母粉8g/l,磷酸二氫鉀2g/l,mgso4?1g/l,硫胺素8mg/l。

    13、進(jìn)一步的,所述步驟(2)中誘導(dǎo)劑為燕麥β葡聚糖超微粉和赤芝菌絲體超微粉,燕麥β葡聚糖超微粉:赤芝菌絲體超微粉的重量比為1:2。

    14、進(jìn)一步的,所述誘導(dǎo)劑濃度選用0.2%-0.8%,誘導(dǎo)劑粒徑選擇為500目-1000目。

    15、進(jìn)一步的,所述步驟(4)中金屬離子催化劑為k+、zn2+和mn2+的混合物,金屬離子添加量為1mmol/l-10mmol/l。

    16、進(jìn)一步的,所述k+:zn2+:mn2+摩爾濃度比為1:2:2。

    17、進(jìn)一步的,k+為kcl、k2so4、k2co4中的一種,zn2+為zncl2、znso4中的一種,mn2+為mncl2、mnso4中的一種。

    18、本專利技術(shù)還提供了所述的制備方法制備得到的赤芝發(fā)酵溶胞物,所述赤芝發(fā)酵溶胞物能夠顯著提高sod酶的活力,有效抑制h2o2誘導(dǎo)的col-i損失,顯著促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生,顯著降低mmp-1的基因表達(dá),發(fā)揮抗氧化功能和延緩細(xì)胞衰老功能,靈芝多糖含量大于18%,β葡聚糖在靈芝多糖中含量大于5%。

    19、本專利技術(shù)還提供了所述的赤芝發(fā)酵溶胞物在制備延緩衰老功效化妝品中的應(yīng)用。

    20、在本專利技術(shù)的一種實(shí)施方式中,所述延緩衰老功效化妝品為面膜、精華、乳液、膏霜、噴霧、水劑或粉劑。

    21、與現(xiàn)本文檔來自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

    1.一株赤芝CZDG10,其特征在于:其分類命名為赤芝Ganoderma?lucidum,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,其保藏編號(hào)為CCTCC?NO:M?20241696。

    2.一種赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括以下步驟:

    3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述步驟(2)中誘導(dǎo)劑為燕麥β葡聚糖超微粉和赤芝菌絲體超微粉,燕麥β葡聚糖超微粉:赤芝菌絲體超微粉的重量比為1:2。

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述誘導(dǎo)劑濃度選用0.2%-0.8%,誘導(dǎo)劑粒徑選擇為500目-1000目。

    5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述步驟(4)中金屬離子催化劑為K+、Zn2+和Mn2+的混合物,金屬離子添加量為1mmol/L-10mmol/L。

    6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述K+:Zn2+:Mn2+摩爾濃度比為1:2:2。

    7.權(quán)利要求1所述的赤芝CZDG10發(fā)酵產(chǎn)生的赤芝發(fā)酵溶胞物或權(quán)利要求2-6任一項(xiàng)所述的制備方法制備得到的赤芝發(fā)酵溶胞物。

    8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的赤芝發(fā)酵溶胞物,其特征在于,所述赤芝發(fā)酵溶胞物能夠顯著提高SOD酶的活力,有效抑制H2O2誘導(dǎo)的COL-I損失,顯著促進(jìn)彈性蛋白產(chǎn)生,顯著降低MMP-1的基因表達(dá),發(fā)揮抗氧化功能和延緩細(xì)胞衰老功能,靈芝多糖含量大于18%,β葡聚糖在靈芝多糖中含量大于5%。

    9.權(quán)利要求5所述的赤芝發(fā)酵溶胞物在制備具有延緩衰老功效的化妝品中的應(yīng)用。

    10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用,其特征在于,所述化妝品為面膜、精華、乳液、膏霜、噴霧、水劑或粉劑。

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    【技術(shù)特征摘要】

    1.一株赤芝czdg10,其特征在于:其分類命名為赤芝ganoderma?lucidum,保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,其保藏編號(hào)為cctcc?no:m?20241696。

    2.一種赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述制備方法包括以下步驟:

    3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述步驟(2)中誘導(dǎo)劑為燕麥β葡聚糖超微粉和赤芝菌絲體超微粉,燕麥β葡聚糖超微粉:赤芝菌絲體超微粉的重量比為1:2。

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述誘導(dǎo)劑濃度選用0.2%-0.8%,誘導(dǎo)劑粒徑選擇為500目-1000目。

    5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的赤芝發(fā)酵溶胞物的制備方法,其特征在于,所述步驟(4)中金屬離子催化劑為k+、zn2+和mn2+的混合物,金屬離子添加量為1mmol/l-...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:孫彥慶張京良馮郭君男宗雯雯朱宗敏江曉路尚麗麗沈照鵬樊芳
    申請(qǐng)(專利權(quán))人:青島黛優(yōu)佳生物科技有限公司
    類型:發(fā)明
    國別省市:

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