【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及植物病害防控和轉(zhuǎn)基因，主要涉及水稻ostfdp基因及其在水稻抗水稻條紋病毒中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、水稻是世界上一半以上人口的主要食物來源，隨著全球人口的不斷增長，對(duì)糧食產(chǎn)量的需求也在日益加劇。水稻在生長過程中會(huì)遭受不同植物病原菌侵染，嚴(yán)重影響水稻質(zhì)量與產(chǎn)量。水稻條紋病毒(rice?stripe?virus,rsv)由于種植面積增加、品種的遺傳基礎(chǔ)狹窄以及對(duì)衰弱性疾病的易感性，目前被認(rèn)為是東亞地區(qū)最重要的水稻病毒病原體之一。自然條件下，rsv能侵染禾本科的幾種植物，包括水稻(oryza?sativa?l.)、小麥(triticumaestivum?l.)、大麥(hordeum?vulgare?l.)、燕麥(avena?sativa?l.)、谷子(setariaitalica?l.)、高粱(sorghum?bicolor?l.)等重要作物。rsv侵染水稻后，植株通常表現(xiàn)出萎黃、不連續(xù)的黃色條紋、新葉壞死和生長遲緩等癥狀。水稻條紋病毒的傳毒介體是灰飛虱，以持久性循回方式在昆蟲體內(nèi)繁殖，還可經(jīng)卵傳播，不僅終身帶毒，還能代代傳毒。水稻條紋病毒rsv屬于纖細(xì)病毒屬(tenuivirus)，其基因組由4條單鏈rna組成，總大小約為17kb，依據(jù)其大小分別命名rna1，rna2，rna3和rna4共編碼7個(gè)蛋白。每個(gè)病毒蛋白都具有不同的功能以促進(jìn)病毒的侵染復(fù)制。
2、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子dp-1(tfdp-1)是e2f家族的一員，該家族包括3個(gè)dp亞基，8個(gè)e2f亞基典型和非典型的e2f轉(zhuǎn)錄因子都是細(xì)胞周期蛋白d/r
3、目前，水稻病毒病一旦發(fā)生將無藥可治，只能把整個(gè)病株或病區(qū)焚燒，所以農(nóng)業(yè)上一般采取預(yù)防為主的防治方法，通過噴施化學(xué)藥劑殺死傳毒介體進(jìn)行防治。是用化學(xué)農(nóng)藥雖然高效，但是長期使用會(huì)造成嚴(yán)重的環(huán)境污染，不利于綠色農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展和生態(tài)平衡。因此，挖掘抗性基因，培育抗性品種有利于更好地防治水稻病毒病。基于目前的研究，培育抗病毒水稻植株品系是目前最為有效的防治水稻病毒病的手段。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、基于現(xiàn)有技術(shù)的缺陷和不足，本專利技術(shù)涉及一種水稻e2f轉(zhuǎn)錄因子伴侶基因ostfdp及其在抗水稻條紋病毒中的應(yīng)用；
2、一方面，一種水稻e2f轉(zhuǎn)錄因子伴侶蛋白tfdp編碼基因ostfdp，其核苷酸和蛋白序列如下所ostfdp的核苷酸序列：
3、seq?id?no:1
4、atggcgcctccctgcggcgatgccgcggcggctgcctccgccgcgcccggcctggccaacctgctca
5、ttcgcgaaggcgccggcctcccttcgcgtcccgaacggtacccgccattccggccctgtacttctgat
6、tcctttgctccaatctctagggaaggggacgatattcccccccaaaaaaaatcggtttctttacgcag
7、cggcggcggcggcaatgcggcagagagggaggagggcggtgcgaacaggaacgggaagaaggag
8、aagaccggggcgcagaggatcaccgggtgggggctccgtgagttcagcaagatagtttctaagaaa
9、gttgaggccaaaggaagaaccacatataatgaggttgccgatgagatttttgcggagctgaagtcca
10、ttacgcagaacggtctggagtttgatgagaagaatattaggcggagggtatatgatgctttcaatgtg
11、ctcattgcaattcgtgttattgcaaaagataaaaaggagataaagtggatgggccttactaattataga
12、tacgaaaagatacagaagttggaggaagttcacaaagaactcatcaccaggatcaagaataagaag
13、aagcttctccaggaaattgaaaagcagtttgatgaccttcagaatattacattacgcaaccaggctag
14、tcagaggccagcagaaagtgttaatggcatcctccttccgttcttattgatcaagacatcccgaaaag
15、caagggtggaaattgagatttcggaagattcgaagtttgcacggttcgacttcaacggtgcaccatt
16、caccatgcatgatgatgtatcaatccttgaagccatcaggcgtaacaaaggaagagctggcctctcca
17、ttcacccttaa
18、密碼子優(yōu)化核苷酸序列：
19、seq?id?no:2
20、atggcacctccatgtggtgatgcagctgcagcagcctcagcagctccagggctggcaaatttgctgat
21、cagggagggggctggacttccttcaagaccagagcgttaccctcccttccgtccatgcacctcagac
22、tcatttgctcccatatctcgggaaggagatgacattccacctcagaagaagagtgtaagtcttagaag
23、cggtggcggcggaaatgctgcggagagagaggaaggtggtgccaatagaaatgggaagaaggaga
24、agactggagctcaaaggataacaggatggggtctccgagagttcagcaagattgtctccaagaaagt
25、tgaagctaagggaagaactacatataatgaggttgctgatgagatatttgcagaattgaagagcataa
26、cgcagaatggtcttgaatttgatgaaaagaata本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種水稻E2F轉(zhuǎn)錄因子伴侶蛋白TFDP在抗纖細(xì)病毒屬(Tenuivirus)病毒的禾本科糧食作物育種中的應(yīng)用；所述水稻E2F轉(zhuǎn)錄因子伴侶蛋白TFDP的編碼基因：OsTFDP基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1-SEQ?ID?NO:2任一項(xiàng)所示。
2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述OsTFDP基因的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:3所示。
3.權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，所述纖細(xì)病毒屬(Tenuivirus)包括水稻條紋病毒(Rice?stripe?virus,RSV)、玉米條紋病毒(Maize?stripe?virus,MSpV)；優(yōu)選水稻條紋病毒(Rice?stripe?virus,RSV)。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，所述禾本科糧食作物選自水稻，玉米，小麥，燕麥和大麥；優(yōu)選水稻，更優(yōu)選中花11、淮稻5號(hào)、日本晴、武育粳3號(hào)，最優(yōu)選中花11。
5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，所述禾本科糧食作物為水稻。
6.一種抗性轉(zhuǎn)基因水稻的制備方法，包括如下步驟：對(duì)出發(fā)水稻轉(zhuǎn)入OsTFDP基因過表達(dá)載體，得到抗
7.一種鑒定水稻條紋病毒抗性水稻的方法，包括如下步驟：提取待檢測水稻植株總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，以水稻的OsUBQ5基因作為內(nèi)參，采用OsTFDP和OsUBQ5特異性引物進(jìn)行檢測，根據(jù)基因表達(dá)量檢測結(jié)果判斷待檢測水稻植株是否為抗性水稻。
8.權(quán)利要求7所述的方法，所述特異性引物序列如下：
9.權(quán)利要求7-8任一項(xiàng)所述的方法，所述判斷方法為：如待檢測水稻植株的OsTFDP基因相對(duì)表達(dá)量顯著高于對(duì)照，則為抗性水稻。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種水稻e2f轉(zhuǎn)錄因子伴侶蛋白tfdp在抗纖細(xì)病毒屬(tenuivirus)病毒的禾本科糧食作物育種中的應(yīng)用；所述水稻e2f轉(zhuǎn)錄因子伴侶蛋白tfdp的編碼基因：ostfdp基因的核苷酸序列如seq?id?no:1-seq?id?no:2任一項(xiàng)所示。
2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，所述ostfdp基因的氨基酸序列如seq?id?no:3所示。
3.權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，所述纖細(xì)病毒屬(tenuivirus)包括水稻條紋病毒(rice?stripe?virus,rsv)、玉米條紋病毒(maize?stripe?virus,mspv)；優(yōu)選水稻條紋病毒(rice?stripe?virus,rsv)。
4.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，所述禾本科糧食作物選自水稻，玉米，小麥，燕麥和大麥；優(yōu)選水稻，更優(yōu)選中花11、淮稻5號(hào)、日本晴、武育粳3號(hào)，最優(yōu)選中花11。
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：孫宗濤，徐世強(qiáng)，楊子航，李路路，張合紅，李雁軍，陳劍平，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：寧波大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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