【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物檢測領域，具體涉及一種新型抗組織纖溶酶原激活物抗體及其應用。
技術介紹
1、組織纖溶酶原激活物是一種單鏈糖蛋白，主要由血管內皮細胞合成、分泌、不斷釋放入血液，廣泛存在于機體的各種組織內，肝臟是組織纖溶酶原激活物滅活的主要場所。它對纖維蛋白有高度的親和力，然后將酪氨酸纖溶酶原形成纖溶酶，降解纖維蛋白(原)和部分凝血因子，是纖溶系統的關鍵物質。
2、當組織纖溶酶原激活物含量降低，提示著纖溶活性降低，常見于血栓前狀態和血栓性疾病中，如動脈血栓形成、深部靜脈血栓形成、缺血性腦卒中等。在臨床中，為了治療血栓類疾病，常常會進行組織纖溶酶原激活物(tpa)療法，tpa是缺血性卒中的唯一有效醫學治療并且它還降低急性心肌梗死患者的死亡率，但tpa治療顯著地增加嚴重或致命性出血的風險。當組織纖溶酶原激活物含量升高，纖溶活性亢進，常帶來原發性和繼發性纖溶亢進，如彌散性血管內凝血、急性早幼粒細胞白血病、肝病、冠心病、高脂血癥、應激反應等。
3、因此，檢測組織纖溶酶原激活物的含量對于檢測血栓類疾病具有重要的價值，最常用的檢測方法就是利用抗原抗體的免疫反應，通過高特異性的抗體實現對蛋白的高親和力結合，再利用生化、化學發光等方式實現對蛋白的定性、定量檢測；此外，特異性的抗體可以與組織纖溶酶原激活物結合，減少因為其過量帶來的出血風險，但目前對于組織纖溶酶原激活物的特異性抗體研究較少，無法充分滿足市場上的需求。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種新型抗組織纖溶酶
2、為實現上述目的，根據本專利技術的一個方面，提供了一種新型抗組織纖溶酶原激活物抗體，所述抗體具有如下互補決定區：
3、重鏈互補決定區：
4、hcdr1，其包含seq?id?no:1所示的氨基酸序列，或由其組成；
5、hcdr2，其包含seq?id?no:2所示的氨基酸序列，或由其組成；
6、和hcdr3，其包含seq?id?no:3所示的氨基酸序列，或由其組成；
7、和輕鏈互補決定區：
8、lcdr1，其包含seq?id?no:4所示的氨基酸序列，或由其組成；
9、lcdr2，其包含seq?id?no:5所示的氨基酸序列，或由其組成；和
10、lcdr3，其包含seq?id?no:6所示的氨基酸序列，或由其組成。
11、所述互補決定區采用kabat的方式決定。
12、本專利技術中“抗體”：包括多克隆抗體及單克隆抗體以及這些抗體的抗原化合物結合片段，包括fab、f(ab’)2、fd、fv、scfv、雙特異抗體和抗體最小識別單位，以及這些抗體和片段的單鏈衍生物。抗體的類型可以選擇igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige、igd。此外，“抗體”此用語包括天然發生的抗體以及非天然發生的抗體，包括例如嵌合型(chimeric)、雙功能型(bifunctional)和人源化(humanized)抗體，以及相關的合成異構形式(isoforms)。“抗體”此用語可和“免疫球蛋白”互換使用。
13、在本專利技術中，重鏈互補決定區用hcdr表示，其包括hcdr1、hcdr2和hcdr3；輕鏈互補決定區用lcdr表示，其包括lcdr1、lcdr2和lcdr3。本領域常用的cdr標示方法包括：kabat編號方案、imgt編號方案、chothia和lesk編號方案以及1997年lefranc等人為免疫球蛋白超家族的所有蛋白質序列引入的新的標準化編號系統。kabat等人是第一個為免疫球蛋白可變區提出標準化編號方案的人。在過去的幾十年中，序列的積累導致了kabatman數據庫的創建，kabat編號方案通常被認為是編號抗體殘基廣泛采用的標準。本專利技術采用kabat注釋標準標示cdr區，但其他方法標示的cdr區也屬于本專利技術的保護范圍。
14、在本專利技術中，抗體重鏈可變區和輕鏈可變區中除cdr之外的區域為框架區；其中，重鏈框架區可以被進一步細分成被cdr分隔開的毗鄰區域，包含hfr1、hfr2、hfr3和hfr4框架區；輕鏈框架區可以被進一步細分成被cdr分隔開的毗鄰區域，包含lfr1、lfr2、lfr3和lfr4框架區。
15、通常情況下，重鏈和輕鏈的可變區可由以下編號的cdr與fr按如下組合排列連接獲得：fr1-cdr1-fr2-cdr2-fr3-cdr3-fr4。
16、優選的，所述抗組織纖溶酶原激活物抗體為單克隆抗體。
17、更優選的，所述單克隆抗體重鏈可變區和輕鏈可變區的氨基酸序列分別是seq?idno.7和seq?id?no.8所示的氨基酸序列。
18、本專利技術中抗體的“可變區”是指抗體的重鏈或輕鏈的氨基端結構域。這些結構域通常是抗體的最可變的部分，并含有抗原結合位點。輕鏈或重鏈可變區由被三個稱為“互補決定區”或“cdr”的高變區打斷的構架區構成。構架區和cdr的范圍已被精確定義，例如在kabat(參見《免疫重要的蛋白質的序列》(sequences?of?proteins?ofimmunologicalinterest)，e.kabat等，美國衛生與人類服務部(u.s.department?ofhealth?and?humanservices)，(1983))和chothia中。抗體的構架區，即構成要件輕鏈和重鏈的組合的構架區，起到定位和對齊cdr的作用，所述cdr主要負責與抗原的結合。在本專利技術中，術語“互補性決定區”、“cdr”是指免疫球蛋白的重鏈和輕鏈的高度可變區，指包含一種或多種或者甚至全部的對抗體或抗原結合片段與其識別的抗原或表位的結合親和力起作用的主要氨基酸殘基的區域。在本專利技術具體實施方式中，cdr是指所述抗體的重鏈和輕鏈的高度可變區。
19、在可選的實施方式中，所述抗體還包含恒定區。
20、在可選的實施方式中，所述恒定區包括重鏈恒定區和/或輕鏈恒定區。
21、在可選的實施方式中，所述重鏈恒定區選自igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige或igd的重鏈恒定區，所述輕鏈恒定區選自κ型或λ型輕鏈恒定區。
22、在可選的實施方式中，所述恒定區的種屬來源為牛、駱駝、馬、乳牛、豬、綿羊、山羊、大鼠、小鼠、狗、貓、兔、驢、鹿、貂、雞、鴨、鵝、火雞、斗雞或人。
23、在可選的實施方式中，所述恒定區的種屬來源為小鼠。
24、另一方面，本專利技術提供一種分離的核酸分子，所述核酸分子為dna或rna，其編碼所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體。
25、另一方面，本專利技術提供一種載體，其包含所述的分離的核酸分子。
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1.一種新型抗組織纖溶酶原激活物抗體，其特征在于，所述抗體具有如下互補決定區：
2.根據權利要求1所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體，其特征在于，所述抗組織纖溶酶原激活物抗體為單克隆抗體。
3.根據權利要求1或2所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體，其特征在于，所述單克隆抗體重鏈可變區和輕鏈可變區的氨基酸序列分別是SEQ?ID?NO.7和SEQ?ID?NO.8所示的氨基酸序列。
4.一種分離的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子為DNA或RNA，其編碼權利要求1-3中任意一項所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體。
5.一種載體，其特征在于，其包含權利要求4中所述的分離的核酸分子。
6.一種宿主細胞，其特征在于，其被權利要求5中所述的載體轉化。
7.制備權利要求1-3中任意一項所述組織纖溶酶原激活物抗體的方法。
8.一種組合物，其特征在于，所述組合物包含權利要求1-3中任意一項所述抗組織纖溶酶原激活物抗體。
9.權利要求1-3中任意一項所述抗組織纖溶酶原激活物抗體用于制備治療或預防TPA誘導的出血的藥物的
10.一種治療或預防TPA誘導的出血的方法，其特征在于，包括向有需求的受試者施用有效量的權利要求1-3中任意一項所述抗組織纖溶酶原激活物抗體。
...【技術特征摘要】
1.一種新型抗組織纖溶酶原激活物抗體，其特征在于，所述抗體具有如下互補決定區：
2.根據權利要求1所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體，其特征在于，所述抗組織纖溶酶原激活物抗體為單克隆抗體。
3.根據權利要求1或2所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體，其特征在于，所述單克隆抗體重鏈可變區和輕鏈可變區的氨基酸序列分別是seq?id?no.7和seq?id?no.8所示的氨基酸序列。
4.一種分離的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子為dna或rna，其編碼權利要求1-3中任意一項所述的抗組織纖溶酶原激活物抗體。
5.一種載體，其特征在于，其...
【專利技術屬性】
技術研發人員：蔣鳴燕，李晉蓉，
申請(專利權)人：四川大學華西第二醫院，
類型：發明
國別省市：
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