【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物，具體為一種用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑及其制備方法與應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、二氯丙醇是一種應(yīng)用廣泛的化學(xué)原料，同時(shí)也是環(huán)氧氯丙烷生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的主要中間產(chǎn)物，在經(jīng)典的或替代的環(huán)氧氯丙烷生產(chǎn)工藝中均能產(chǎn)生2,3-二氯丙醇(dcp)和1,3-二氯-2-丙醇。另外，在優(yōu)先治理污染物1,2,3-三氯丙烷的生物代謝過(guò)程中，二氯丙醇也作為降解產(chǎn)物被生成。dcp和1,3-二氯丙醇均具有致畸畸、致癌、致突變等高毒性作用，但dcp對(duì)人體的毒性顯著高于1,3-二氯丙醇，并且比1,3-二氯丙醇更穩(wěn)定，更難降解，即使低濃度的dcp暴露對(duì)生態(tài)環(huán)境和人體健康也會(huì)造成巨大威脅。因此，dcp污染的防控和治理具有重要的科學(xué)和社會(huì)意義，急需開展相關(guān)的研究工作。
2、常用的修復(fù)技術(shù)主要有物理修復(fù)技術(shù)、化學(xué)修復(fù)技術(shù)和生物修復(fù)技術(shù)三種，其中，生物修復(fù)技術(shù)因具有綠色、經(jīng)濟(jì)、無(wú)二次污染、適用于大面積污染修復(fù)等優(yōu)勢(shì)，是治理dcp污染的理想手段。在生物修復(fù)技術(shù)中，基于高效菌劑投加的生物強(qiáng)化技術(shù)被認(rèn)為是將污染物質(zhì)從環(huán)境中徹底去除的根本途徑。但由于dcp具有較高的化學(xué)穩(wěn)定性和較強(qiáng)的生物降解抗性，目前僅有少量能以dcp為唯一碳源和能源進(jìn)行生長(zhǎng)代謝的菌株被報(bào)道。因此，若想實(shí)現(xiàn)dcp高效降解為h2o、co2或其他無(wú)毒無(wú)害物質(zhì)，從環(huán)境中分離純化高效降解菌株，并構(gòu)建高效降解菌群至關(guān)重要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、針對(duì)上述情況，為彌補(bǔ)上述現(xiàn)有缺陷，本專利技術(shù)提供了一種用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的制備方法，用于
2、本專利技術(shù)的另一目的是提供一種用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑。
3、本專利技術(shù)上述目的通過(guò)以下技術(shù)實(shí)現(xiàn)：
4、為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本專利技術(shù)首先提供了一種復(fù)合菌劑(記為復(fù)合菌劑1)，所述復(fù)合菌劑1含有(或其活性成分為)紅球菌菌株(rhodococcussp.strain)dc-20、拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcusbaikonurensisstrain)dc-21、紅球菌菌株(rhodococcussp.strain)dt-18和蠟樣芽孢桿菌(bacilluscereusstrain)dbc-6；
5、所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏編號(hào)為cgmcc?no.30357；
6、所述拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcus?baikonurensis?strain)dc-21在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏編號(hào)為cgmcc?no.30416；
7、所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏編號(hào)為cgmcc?no.30417；
8、所述蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏編號(hào)為cgmcc?no.30356。
9、進(jìn)一步方案中，上述復(fù)合菌劑1中所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20、所述拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcus?baikonurensis?strain)dc-21、所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18與所述蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6的活菌數(shù)之比為1:2:2:2。
10、其次，本專利技術(shù)還提供了一種復(fù)合菌劑(記為復(fù)合菌劑2)，所述復(fù)合菌劑2含有(或其活性成分為)所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcus?baikonurensis?strain)dc-21，或含有權(quán)利要求1中所述述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述紅紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18，或含有權(quán)利要求1中所述述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6。
11、上述復(fù)合菌劑2中所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcus?baikonurensis?strain)dc-21的活菌數(shù)之比可為1：2；所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18的活菌數(shù)之比可為1：2；所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6的活菌數(shù)之比可為1：2。
12、進(jìn)一步方案中，上述復(fù)合菌劑1與復(fù)合菌劑2可為具有如下1)或2)或3)或4)用途的菌劑：
13、1)降解2,3-二氯丙醇；
14、2)制備降解2,3-二氯丙醇的產(chǎn)品；
15、3)修復(fù)2,3-二氯丙醇污染環(huán)境；
16、4)制備修復(fù)2,3-二氯丙醇污染環(huán)境產(chǎn)品。
17、進(jìn)一步方案中，所述復(fù)合菌劑1與所述復(fù)合菌劑2還可以包括載體。
18、優(yōu)選地，所述載體可為固體載體或液體載體。所述固體載體可為礦物材料、植物材料或高分子化合物；所述礦物材料可為粘土、滑石、高嶺土、蒙脫石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一種；所述植物材料可為玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一種；所述高分子化合物可為聚乙烯醇和/或聚二醇。所述液體載體可為磷酸鹽緩沖液、培養(yǎng)基、植物油、礦物油或水。所述菌劑中，所述活性成分可以以被培養(yǎng)的活細(xì)胞、活細(xì)胞的發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)物的濾液或細(xì)胞與濾液的混合物的形式存在。所述組合物的劑型可為多種劑型，如液劑、乳劑、懸浮劑、粉劑、顆粒劑、可濕性粉劑或水分散粒劑。
19、所述磷酸鹽緩沖液中每升含21.759g?k2hpo4·h2o，33.48g?na2hpo4·12h2o，8.79gkh2po4,5.09g?nh4cl，ph為7.4。
20、根據(jù)需要，所述菌劑中還可添加表面活性劑(如吐溫20、吐溫80等)、粘合劑、穩(wěn)定劑(如抗氧化劑)、ph調(diào)節(jié)劑等。
21、本專利技術(shù)還提供了所述復(fù)合菌劑1與所述復(fù)合菌劑2的下述任一應(yīng)用：
22、1)降解dcp；
23、2)制備降解dcp的產(chǎn)品；
24、3)修復(fù)dcp污染環(huán)境；
25、4)制備修復(fù)dcp污染環(huán)境產(chǎn)品。
26、具體，優(yōu)選地，所述復(fù)合菌劑1的制備方法，包括如下步驟：
27、將所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20或其發(fā)酵產(chǎn)物、所述拜登羅爾紅球菌菌株(rhodoc本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于，含有紅球菌菌株(Rhodococcussp.strain)DC-20、拜登羅爾紅球菌菌株(Rhodococcus?baikonurensis?strain)DC-21、紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DT-18和蠟樣芽孢桿菌(Bacillus?cereus?strain)DBC-6；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述復(fù)合菌劑中紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DC-20、拜登羅爾紅球菌菌株(Rhodococcusbaikonurensis?strain)DC-21、紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DT-18和蠟樣芽孢桿菌(Bacillus?cereus?strain)DBC-6的活菌數(shù)之比為1:2:2:2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述復(fù)合菌劑含有權(quán)利要求1中所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DC-20與所述拜登羅爾紅球
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于：所述復(fù)合菌劑為具有如下1)或2)或3)或4)用途的菌劑：
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于：所述復(fù)合菌劑具有如下1)或2)或3)或4)的用途：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于，降解2,3-二氯丙醇的方法包括：在含有2,3-二氯丙醇的樣品中添加權(quán)利要求1-3中任一所述復(fù)合菌劑進(jìn)行反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)2,3-二氯丙醇的降解。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于，所述反應(yīng)在30℃、pH為7.0缺氧的條件下進(jìn)行；
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于，還包括降解1,2,3-三氯丙烷(TCP)的方法，具體為：向經(jīng)鹵代烷烴脫鹵酶水解后的TCP中添加權(quán)利要求1-3中任一所述復(fù)合菌劑進(jìn)行反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)TCP高效、徹底降解。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：將權(quán)利要求1中所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DC-20或其發(fā)酵產(chǎn)物、所述拜登羅爾紅球菌菌株(Rhodococcus?baikonurensis?strain)DC-21或其發(fā)酵產(chǎn)物、所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DT-18或其發(fā)酵產(chǎn)物與所述蠟樣芽孢桿菌(Bacillus?cereus?strain)DBC-6或其發(fā)酵產(chǎn)物混合，即得到復(fù)合菌劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：將權(quán)利要求1中所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DC-20或其發(fā)酵產(chǎn)物與所述拜登羅爾紅球菌菌株(Rhodococcus?baikonurensis?strain)DC-21或其發(fā)酵產(chǎn)物混合，或?qū)?quán)利要求1中所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DC-20或其發(fā)酵產(chǎn)物與所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DT-18或其發(fā)酵產(chǎn)物混合，或?qū)?quán)利要求1中所述紅球菌菌株(Rhodococcus?sp.strain)DC-20或其發(fā)酵產(chǎn)物與所述蠟樣芽孢桿菌(Bacillus?cereus?strain)DBC-6或其發(fā)酵產(chǎn)物混合即得到復(fù)合菌劑。
...【技術(shù)特征摘要】
1.用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于，含有紅球菌菌株(rhodococcussp.strain)dc-20、拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcus?baikonurensis?strain)dc-21、紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18和蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述復(fù)合菌劑中紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20、拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcusbaikonurensis?strain)dc-21、紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18和蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6的活菌數(shù)之比為1:2:2:2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述復(fù)合菌劑含有權(quán)利要求1中所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述拜登羅爾紅球菌菌株(rhodococcus?baikonurensis?strain)dc-21，或含有權(quán)利要求1中所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dt-18，或含有權(quán)利要求1中所述紅球菌菌株(rhodococcus?sp.strain)dc-20與蠟樣芽孢桿菌(bacillus?cereus?strain)dbc-6。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑，其特征在于：所述復(fù)合菌劑為具有如下1)或2)或3)或4)用途的菌劑：
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于：所述復(fù)合菌劑具有如下1)或2)或3)或4)的用途：
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的用于降解2,3-二氯丙醇的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：代小麗，張忠國(guó)，單悅，喬鵬煒，何沛然，魏婷，張健，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京市科學(xué)技術(shù)研究院資源環(huán)境研究所北京市土地修復(fù)工程技術(shù)研究中心，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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