【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及伏立康唑檢測，尤其涉及基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法。
技術介紹
1、伏立康唑為氟康唑衍生物，臨床上主要用于治療急性或慢性深部真菌感染，由于它具有抗菌效力強，抗菌譜廣，安全性好等特點，在國內外市場上深受歡迎，商業價值較高，伏立康唑個體差異較大，需要進行治療藥物監測(tdm)，以保障伏立康唑臨床應用的安全與有效。
2、目前對伏立康唑的檢測方法為：(1)取樣品，加乙醇溶解并稀釋制成每1ml中約含0.2mg的溶液，照紫外-可見分光光度法(2010年版藥典二部附錄ⅳa)測定，在261nm與267nm的波長處有最大吸收，在264nm的波長處有最小吸收；(2)樣品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(《藥品紅外光譜集》893圖)一致；(3)樣品顯有機氟化物的鑒別反應(2010年版藥典二部附錄ⅲ)，但是這幾種檢測方法存在不夠全面，不能夠提供準確的數據支持的問題。
3、因此，針對上述不夠全面，不能夠提供準確的數據支持的問題，可以設計一種基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法。
技術實現思路
1、為了克服不夠全面，不能夠提供準確的數據支持的問題。
2、本專利技術的技術方案為：基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，通過紫外吸收光譜(uv)、紅外吸收光譜(ir)、超高分辨質譜(ft-ms)、1d/2d核磁共振(nmr)、熱分析(tga、dsc)及x-射線粉末衍射(xrd)對伏立康唑的結構進行分析，證實伏立康唑的化學結構為(2r,3s)-2-(2,4-
3、
4、作為優選，包括如下步驟：
5、s1：取伏立康唑樣品溶于乙醇中進行稀釋，制得稀釋溶液，放置在紫外可見分光光度計內部，測得溶液紫外吸收光譜；
6、s2：取伏立康唑樣品，采用溴化鉀壓片法將樣品制成壓片，放置在紅外光譜儀內部，測得樣品的紅外圖譜；
7、s3：取伏立康唑樣品，用甲醇：1％甲酸水溶液進行溶解，經微米的濾膜過濾后，直接置于變換質譜儀內部，采用esi正離子模式，進行ft-ms分析，測得高分辨質譜；
8、s4：取伏立康唑樣品，以氘代二甲基亞砜為溶劑，采用直徑為5mm的nmr樣品管，將樣品溶于溶劑，置于核磁共振譜儀中，以tms為內標，bbo寬帶5mm探頭，1h?nmr、13c?nmr和19fnmr的工作頻率分別為600.25mhz、150.81mhz和564.80mhz，1d核磁試驗1h-nmr譜寬12019.23hz，13c-nmr譜寬36057.69hz，19f-nmr譜寬133?928.58hz，2d核磁試驗包括1h-1hcosy、13c-1h?hsqc和13c-1h?hmbc。1h-1h?cosy的f2(1h)和f1(1h)維譜寬均為4?807.69hz，采樣數據點陣t2×t1＝2?048×256；13c-1h?hsqc的f2(1h)和f1(13c)維譜寬分別為4807.69hz和24?906.43hz，13c-1h?hmbc的f2(1h)和f1(13c)維譜寬分別為4?807.69hz和33524.82hz，采樣數據點陣均為t2×t1＝2048×256，測得1h-nmr譜、重氫交換譜、13c-nmr譜、dept135譜、dept90譜、19f-nmr譜、1h-1hcosy譜、13c-1h?hsqc譜、13c-1h?hmbc和1h-1h?noesy；
9、s5：取伏立康唑樣品于al2o3坩堝中，置于熱重分析儀內部分析樣品熔點；
10、s6：取伏立康唑樣品，置于玻璃凹槽，將表面壓平后放置x射線衍射儀試樣臺上，從3°～60°，以步寬角度為0.013°，用pixcel探測器掃描得到譜圖。
11、作為優選，s1中紫外可見分光光度計為lambda35型紫外可見分光光度計；s2中紅外光譜儀為vertex70傅立葉變換紅外光譜儀；s3中變換質譜儀為solarix7.0超高分辨四級桿串聯傅里葉變換質譜儀；s4中核磁共振譜儀為ascendtm?600m超導核磁共振譜儀；s5中熱重分析儀為pyris1?tga熱重分析儀，其檢測項目包括：
12、(1)熱重分析(tga)：在氮氣氛圍下，從30℃以5℃/min升溫到500℃；
13、(2)差熱分析(dsc)：在氮氣氛圍下，以空al皿為參比，從30℃以5℃/min升溫到200℃。
14、作為優選，s1中稀釋溶液的濃度為25μg/ml。
15、作為優選，s2中采用溴化鉀壓片法將樣品制成壓片的步驟為：
16、(1)準備kbr和研磨用具，kbr為分析純或光譜純，研磨用具清洗干凈并烘干；
17、(2)將kbr研磨，并使用200目篩網過篩，然后將kbr粉末烘干；
18、(3)將待測樣品與kbr粉末混合均勻，樣品與kbr粉末的比例為1：100；
19、(4)將(3)中的混合物放入壓片模具中，施加12～25mpa的壓力制成透明薄片，壓片時間為1±0.1分鐘，制成壓片。
20、作為優選，s3中甲醇：1％甲酸水溶液配置步驟為：按照100：1的用量比例，將甲醇和1％甲酸水溶液混合并搖勻，使甲酸充分溶解，得到甲醇：1％甲酸水溶液；伏立康唑樣品溶解后的濃度為0.5～5mg/ml。
21、作為優選，s4中伏立康唑溶于氘代二甲基亞砜后的溶液濃度為0.5～5.5mg/ml。
22、作為優選，選用的伏立康唑樣品經液相色譜法分析，其純度＞99％。
23、本專利技術的有益效果：通過多個維度對伏立康唑進行檢測，檢測更加全面，并且可以提供準確的數據支持，為充分利用核磁hmbc譜的信息，對樣品的構型進行了合理分析，結果與其化學結構一致，各圖譜歸屬合理，x-射線粉末衍射證實其結晶性，熱分析表征了其熔點和熱穩定性，本方法對樣品的要求遠低于單晶檢測，更適合在日常的質控管理中運用，本專利技術的鑒定方法為本類化合物定性研究提供了分析方法和客觀依據，有利于本品的質量控制，對伏立康唑樣品的結構及波譜學數據進行了全面詳細的解析，為伏立康唑質量研究提供更為便捷的參考依據，也為各種波譜學方法在結構鑒定中提供應用實例。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：通過紫外吸收光譜(UV)、紅外吸收光譜(IR)、超高分辨質譜(FT-MS)、1D/2D核磁共振(NMR)、熱分析(TGA、DSC)及X-射線粉末衍射(XRD)對伏立康唑的結構進行分析，證實伏立康唑的化學結構為(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁醇，其結構式如下：
2.根據權利要求1所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：包括如下步驟：
3.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：S1中紫外可見分光光度計為Lambda35型紫外可見分光光度計；S2中紅外光譜儀為VERTEX70傅立葉變換紅外光譜儀；S3中變換質譜儀為Solarix7.0超高分辨四級桿串聯傅里葉變換質譜儀；S4中核磁共振譜儀為AscendTM?600M超導核磁共振譜儀；S5中熱重分析儀為Pyris1?TGA熱重分析儀，其檢測項目包括：
4.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，
5.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：S2中采用溴化鉀壓片法將樣品制成壓片的步驟為：
6.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：S3中甲醇：1％甲酸水溶液配置步驟為：按照100：1的用量比例，將甲醇和1％甲酸水溶液混合并搖勻，使甲酸充分溶解，得到甲醇：1％甲酸水溶液；伏立康唑樣品溶解后的濃度為0.5～5mg/ml。
7.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：S4中伏立康唑溶于氘代二甲基亞砜后的溶液濃度為0.5～5.5mg/ml。
8.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：選用的伏立康唑樣品經液相色譜法分析，其純度＞99％。
...【技術特征摘要】
1.基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：通過紫外吸收光譜(uv)、紅外吸收光譜(ir)、超高分辨質譜(ft-ms)、1d/2d核磁共振(nmr)、熱分析(tga、dsc)及x-射線粉末衍射(xrd)對伏立康唑的結構進行分析，證實伏立康唑的化學結構為(2r,3s)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟嘧啶-4-基)-1-(1h-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁醇，其結構式如下：
2.根據權利要求1所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：包括如下步驟：
3.根據權利要求2所述的基于多維核磁共振的伏立康唑結構鑒定方法，其特征在于：s1中紫外可見分光光度計為lambda35型紫外可見分光光度計；s2中紅外光譜儀為vertex70傅立葉變換紅外光譜儀；s3中變換質譜儀為solarix7.0超高分辨四級桿串聯傅里葉變換質譜儀；s4中核磁共振譜儀為ascendtm?600m超導核磁共振譜儀；s5中熱重分析儀為pyris1?...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張燼，薛兵旺，丁力，郭嘉，姚峰，吳春松，丁元早，王淵韜，吳班，
申請(專利權)人：武漢商學院，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。