【技術實現步驟摘要】
本申請涉及生物發酵，具體涉及一種枯草芽孢桿菌發酵培養基及發酵培養方法與應用。
技術介紹
1、微生物發酵技術是現代生物技術的重要組成部分，廣泛應用于醫藥、食品、化工等領域。枯草芽孢桿菌作為一種常見的益生菌，在抗生素生產、環境保護、飼料添加劑等方面展現出重要的應用價值。隨著生物技術的發展，人們對枯草芽孢桿菌的利用越來越廣泛，對其發酵培養基的要求也越來越高，以期提高其代謝產物的產量和品質。
2、目前，為提高枯草芽孢桿菌的發酵效率，通常采用各種碳源、氮源和其他營養物質配制發酵培養基。常見的碳源有葡萄糖、蔗糖、乳糖等，常用的氮源則包括蛋白胨、牛肉膏、豆粕等。此外，還會添加適量的無機鹽和微量元素以滿足枯草芽孢桿菌的生長需求。然而，傳統的發酵培養基雖然能夠支持菌種的一般生長，但往往未能充分考慮到各組分之間的協同作用與優化配比問題，導致枯草芽孢桿菌的發酵轉孢率不足，獲得的枯草芽孢桿菌的活菌數與芽孢率較低、穩定性較差。
3、因此，急需提供一種用于枯草芽孢桿菌的特定培養基，來提高枯草芽孢桿菌的發酵轉孢率、降低枯草芽孢桿菌生產成本。
技術實現思路
1、為了克服現有枯草芽孢桿菌發酵培養基存在的發酵轉孢率低、原料成本高等問題，本申請提供一種枯草芽孢桿菌發酵培養基及發酵培養方法與應用。
2、第一方面，本申請提供一種枯草芽孢桿菌發酵培養基，采用如下的技術方案：
3、一種枯草芽孢桿菌發酵培養基，包括以下含量的組分：低溫脫脂大豆粉25-40g/l、赤霉酸發酵濾液30-
4、本申請采用低溫脫脂大豆粉、赤霉酸發酵濾液、蛋白胨等制備出一種枯草芽孢桿菌發酵培養基，該枯草芽孢桿菌發酵培養基的原料成本低，并且能夠顯著提高枯草芽孢桿菌的生長速率和轉孢率。其中，低溫脫脂大豆粉作為高效氮源和碳源，不僅能夠促進芽孢桿菌菌體的快速增殖，還能夠為菌體提供豐富的營養成分(氨基酸和微量元素)，進一步促進菌體的代謝與芽孢生成。赤霉酸發酵濾液是一種工業廢污，本申請的專利技術人通過研究發現，赤霉酸發酵濾液一方面能夠作為營養物質，促進枯草芽孢桿菌的生長繁殖；另一方面能夠刺激芽孢的形成，提高枯草芽孢桿菌的轉孢率，并且赤霉酸發酵濾液還能增強枯草芽孢桿菌的耐熱性和環境適應能力。葡萄糖和蛋白胨的合理配比能夠保證碳氮平衡，使得培養基在較低成本下實現了高產芽孢桿菌的目標。磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀以及硫酸錳和硫酸鐵等多種無機鹽的合理調配，能夠有效維持培養基的ph穩定性以及提供必需的微量元素，從而促進枯草芽孢桿菌的代謝活動與孢子形成，最終提高芽孢桿菌發酵產物的有效成分含量及產物質量。與傳統培養基相比，本申請提供的發酵培養基在保證營養全面的同時，實現了廢棄資源再利用，減少污水排放，能夠使枯草芽孢桿菌的發酵生產過程高效、經濟且環保。
5、可選地，所述枯草芽孢桿菌發酵培養基包括以下含量的組分：低溫脫脂大豆粉30-35g/l、赤霉酸發酵濾液35-45g/l、蛋白胨5-15g/l、葡萄糖10-20g/l、磷酸二氫鉀1-2g/l、磷酸氫二鉀2-4g/l、氯化鉀0.01-0.2g/l、硫酸錳0.01-0.2g/l、硫酸鐵0.01-0.1g/l，溶劑為水。
6、在一些實施方案中，所述低溫脫脂大豆粉的含量可以為25-30g/l、25-35g/l、25-40g/l、30-35g/l、30-40g/l或35-40g/l。
7、在一個具體的實施方案中，所述低溫脫脂大豆粉的含量還可以為25g/l、30g/l、35g/l或40g/l。
8、在一些實施方案中，所述赤霉酸發酵濾液的含量可以為30-35g/l、30-40g/l、30-45g/l、30-50g/l、35-40g/l、35-45g/l、35-50g/l、40-45g/l、40-50g/l或45-50g/l。
9、在一個具體的實施方案中，所述赤霉酸發酵濾液的含量還可以為30g/l、35g/l、40g/l、45g/l或50g/l。
10、一種枯草芽孢桿菌發酵培養基的制備方法，包括以下步驟：首先將低溫脫脂大豆粉、赤霉酸發酵濾液與水混勻，然后加入其余組分，于40-45℃下攪拌0.5-1h，獲得枯草芽孢桿菌發酵培養基。
11、可選地，所述赤霉酸發酵濾液的制備方法為：將赤霉酸菌渣濾液在70-80℃下保溫滅活30-60min，然后在6500-7500rpm的條件下離心，獲得含菌絲體的上層輕相，調節上層輕相ph至5.5±0.2，獲得赤霉酸發酵濾液。
12、在一些實施方案中，所述離心的轉速可以為6000-6500rpm、6000-7000rpm、6000-7500rpm、6500-7000rpm、6500-7500rpm、6500-8000rpm、7000-7500rpm、7000-8000rpm或7500-8000rpm。
13、在一個具體的實施方案中，所述離心的轉速還可以為6000rpm、6500rpm、7000rpm、7500rpm或8000rpm。
14、第二方面，本申請提供一種枯草芽孢桿菌的發酵培養方法。
15、一種枯草芽孢桿菌的發酵培養方法，包括以下步驟：將枯草芽孢桿菌種子液接種到枯草芽孢桿菌發酵培養基中，于28-30℃下發酵培養18-24h，接著升溫至35-40℃發酵培養2-3h，最后以2-5℃/min的速率降溫至常溫，獲得芽孢桿菌發酵液。
16、本申請提供的枯草芽孢桿菌的發酵培養方法中，通過兩段式發酵工藝，一方面能夠促進枯草芽孢桿菌生長，提高其生長與代謝活性；另一方面有利于枯草芽孢桿菌菌體內抗逆性的休眠體構造—芽孢的形成和保持，從而顯著提高枯草芽孢桿菌的轉孢率。本申請通過試驗探究發現，將兩段式發酵的溫度與時間控制在上述范圍內，能夠使枯草桿菌的發酵轉孢率達到99％以上。
17、可選地，所述枯草芽孢桿菌種子液的濃度為1-10億cfu/ml，枯草芽孢桿菌種子液在發酵培養基中的接種體積百分比為5-10％。
18、可選地，所述發酵培養過程中的溶解氧濃度保持在25％以上；發酵培養過程中還需要攪拌，攪拌的速度為170-240r/min。
19、第三方面，本申請提供一種枯草芽孢桿菌發酵物，采用所述的枯草芽孢桿菌的發酵培養方法制備獲得。
20、第四方面，本申請提供一種枯草芽孢桿菌制劑，包含所述的枯草芽孢桿菌發酵培養基或權利要求7所述的枯草芽孢桿菌發酵物。
21、可選地，以枯草芽孢桿菌制劑的總重量為100％計，所述枯草芽孢桿菌制劑包括以下含量的組分：枯草芽孢桿菌發酵物8-12％、木質素4-6％、黃原膠0.4-0.6％、氯化鈉0.8-1.2％、糊精0.8-1.2％，余量為水。
22、第五方面，本申請提供的枯草芽孢桿菌發酵本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種枯草芽孢桿菌發酵培養基，其特征在于，包括以下含量的組分：低溫脫脂大豆粉25-40g/L、赤霉酸發酵濾液30-50g/L、蛋白胨5-15g/L、葡萄糖10-20g/L、磷酸二氫鉀1-2g/L、磷酸氫二鉀2-4g/L、氯化鉀0.01-0.2g/L、硫酸錳0.01-0.2g/L、硫酸鐵0.01-0.1g/L，溶劑為水。
2.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌發酵培養基，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌發酵培養基包括以下含量的組分：低溫脫脂大豆粉30-35g/L、赤霉酸發酵濾液35-45g/L、蛋白胨5-15g/L、葡萄糖10-20g/L、磷酸二氫鉀1-2g/L、磷酸氫二鉀2-4g/L、氯化鉀0.01-0.2g/L、硫酸錳0.01-0.2g/L、硫酸鐵0.01-0.1g/L，溶劑為水。
3.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌發酵培養基，其特征在于，所述赤霉酸發酵濾液的制備方法為：將赤霉酸菌渣濾液在70-80℃下保溫滅活30-60min，然后在6500-7500rpm的條件下離心，獲得含菌絲體的上層輕相，調節上層輕相pH至5.5±0.2，獲得赤霉酸發酵濾液。
...【技術特征摘要】
1.一種枯草芽孢桿菌發酵培養基，其特征在于，包括以下含量的組分：低溫脫脂大豆粉25-40g/l、赤霉酸發酵濾液30-50g/l、蛋白胨5-15g/l、葡萄糖10-20g/l、磷酸二氫鉀1-2g/l、磷酸氫二鉀2-4g/l、氯化鉀0.01-0.2g/l、硫酸錳0.01-0.2g/l、硫酸鐵0.01-0.1g/l，溶劑為水。
2.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌發酵培養基，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌發酵培養基包括以下含量的組分：低溫脫脂大豆粉30-35g/l、赤霉酸發酵濾液35-45g/l、蛋白胨5-15g/l、葡萄糖10-20g/l、磷酸二氫鉀1-2g/l、磷酸氫二鉀2-4g/l、氯化鉀0.01-0.2g/l、硫酸錳0.01-0.2g/l、硫酸鐵0.01-0.1g/l，溶劑為水。
3.根據權利要求1所述的枯草芽孢桿菌發酵培養基，其特征在于，所述赤霉酸發酵濾液的制備方法為：將赤霉酸菌渣濾液在70-80℃下保溫滅活30-60min，然后在6500-7500rpm的條件下離心，獲得含菌絲體的上層輕相，調節上層輕相ph至5.5±0.2，獲得赤霉酸發酵濾液。
4.一種枯草芽孢桿菌的發酵培養方法，其特征在于，包括以下步驟：將枯草芽孢桿菌種子液接種到權利要求1-3中任一項所述的枯草芽孢桿菌發酵培養基中，于28-30℃下發酵培養18-24h，接著升溫至35-40...
【專利技術屬性】
技術研發人員：吳燁飛，朱建新，許殷銘，魯明閩，常宏，沈波，俞海燕，成玉彤，陸建衛，司文，錢江偉，
申請(專利權)人：浙江啟潮生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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