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    一種調控靈芝酸合成基因LSS和SQS轉錄活性的靈芝轉錄因子GLHB-1及其編碼基因和應用制造技術

    技術編號:44458302 閱讀:3 留言:0更新日期:2025-02-28 19:05
    本發明專利技術提供一種調控靈芝酸合成基因LSS和SQS轉錄活性的靈芝轉錄因子GLHB?1及其編碼基因和應用,屬于分子生物學及基因工程技術領域。本申請基于轉錄組的靈芝酸合成調控關鍵基因篩選出了轉錄因子GLHB?1,該轉錄因子能夠調控靈芝酸合成積累途徑中的關鍵基因SQS和LSS的表達,在研究靈芝酸調控機制、調控靈芝酸合成積累以及培育靈芝酸新品種等方面具有重要意義。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬于分子生物學及基因工程,具體涉及一種調控靈芝酸合成基因lss和sqs轉錄活性的靈芝轉錄因子glhb-1及其編碼基因和應用。


    技術介紹

    1、靈芝 (ganoderma?lucidum)是我國傳統的藥食同源類大型真菌,具有補氣安神,止咳平喘等功效。靈芝含有多種生物活性成分,具有極高的營養保健價值。三萜類是靈芝中主要的生物活性次級代謝產物,其中靈芝三萜酸,簡稱靈芝酸(ganoderic?acids,gas),是靈芝藥用功效的核心成分。研究表明,靈芝酸在腫瘤治療、抗氧化、抑制膽固醇合成、抑制血管緊張素轉換酶活性、抑制組胺釋放、抗hiv等方面具有重要作用。然而,目前獲得靈芝酸的主要方式是從靈芝子實體和孢子中進行提取,而靈芝中靈芝酸的含量相對較低。因此,解析靈芝酸生物合成途徑及其調控機制對于培育高產靈芝酸的靈芝品種具有重要意義。

    2、靈芝酸是以乙酰輔酶a為前體物質,再通過甲羥戊酸途徑(mevalonate?pathway,mva)合成的。在mva途徑中,靈芝酸合成有兩個重要分支,一個分支是法尼基焦磷酸到牻牛兒基焦磷酸,另一個分支是法尼基焦磷酸到羊毛甾醇。這兩個分支已克隆和報道的關鍵基因有fps、mvd、aact、ls、hmgr、hmgs、idi、sqs和osc基因,這些基因直接調控靈芝酸的合成,是靈芝酸合成積累的關鍵。其中,鯊烯合酶(squalene?synthase,sqs)是催化mva途徑轉向三萜生物合成的第一個關鍵酶,也是參與靈芝酸合成代謝的關鍵酶,可催化異戊二烯途徑中的碳流向三萜生物合成,sqs活性與角鯊烯等三萜化合物的產量相關,是角鯊烯等三萜類化合物合成過程中的關鍵酶。近年來已有研究對不同植物如人參、水稻、重樓等植物的sqs基因進行了克隆與載體構建,實現了在分子水平上探討植物中三萜類化合物合成的機理和通過基因轉化來探究基因表達的最佳條件;羊毛固醇合成酶(lss)是膽固醇合成途徑中的一個關鍵酶,催化(s)-2,3-環氧角鯊烯轉化成羊毛固醇。lss雙等位基因突變的患者不僅會表現少毛癥、白內障、脫發伴智力低下(alopecia?with?mental?retardation?,apmr)綜合征、隱形神經外胚層綜合征等疾病。

    3、基于以上背景,本專利通過對靈芝sqs基因和lss基因與轉錄因子hb-1的相互作用機制進行研究,為靈芝酸的調控機制提供一定基礎,也培育優質靈芝新品種具有重要意義。


    技術實現思路

    1、為了解決上述問題,本專利技術提供了一種調控靈芝酸合成基因lss和sqs轉錄活性的靈芝轉錄因子glhb-1及其編碼基因和應用。

    2、一方面,本專利技術提供了一種調控靈芝酸合成基因lss和sqs轉錄活性的靈芝轉錄因子glhb-1。

    3、具體地,所述轉錄因子glhb-1的氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

    4、seq?id?no.2:msrsaadatfsapsnptdarrrqksprrsssgspsrhtlptdphttqgastssnivsqdhpatassrvytpsapapssdpesshrrrkrersspsgsssqgdmadtemeggpskpstsesapegappkkkrtrtlttphqaavlhallaqsrfpttqmreevgrsiglsarkvqnqrqkarrprgqatttsapltrppqfgpftnappgtasdispiamihsgssvegffprgpggisemqyssagpssrgpperfapthrdaylgeeygrsgipptqlagpgipgssrrgllddprwrrpsqgfpappstsaiellemyratprpgrppgeegpeltlslppvatrtrgpgsspisplsagpyptlaslsalefsasahrtrssdearrnlppadvdfstprpplnipppftlqpqplwddpafspynrrrsspeqphgappsfgesptalhspfgaeplpsistivpmapsgpspvrsplspghrtrfdpirstagrappehpvrpgthdytdepprnf。

    5、另一方面,本專利技術提供了一種核酸。

    6、具體地,所述核酸為轉錄因子glhb-1的編碼基因。

    7、進一步具體地,所述核酸的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    8、seq?id?no.1:atgtcacgcagcgccgcagacgcgacatcctctgctcccagcaacccatccgacgaacggcgacgacagaagagcccccgccgctcgtcctcggccgcttccccctccagacacacgctccctacacccccacacacgaccacgggagcaccctccaccagcaacattgtttcgcaagacctccccactgcttccgcttcacgcgtccccaccccctccgcccccaccccctccgcccccaccccctcccctgacctcgagtccagccaccgaagaaggaaacgcgagcgctcgagcccttcgggatcctcctcccaaggcgacatggcggatacggaaatggaaggcgagcccggcaagccttctacctccgagagcgcacccgaaggtgccccgccgaagaagaagcggacacggactttgactacgccacatcaggcggctgtccttcatgctctactcgcgcagtcgcggtttcctactacccagatgcgcgaggaggtggggaggtccattgggttgagtgctcgtaaagtccagaaccaacgccagaaggctcgtcggccccgcggacaagcgaccaccacatctgcgcctcttacgcgcccaccacagtttgggcccttcacgaacgcgcccccaagcacgacgagcgacatcagcccaacagccatgacgatacactcagggtcgagcgtagaaggcttcttcccgcgcggtccccgtggcatcagcgagatgccatacagcaccgcggggccgtcttctctcggtcccctcgagcggtccgcgcccgcccatcgagatgcatatctccccgaggagtacagacgtcccggcgtaccccccgctcaacttgcaggccctggtattcccggttcgagtcgtcgtaacctgctggaagaccctgcttggcggagaccctcgcagggattttctacgccactatccatgtccgccaacgacccgctggagatgtacagagcaacgccgcgtcctggccgccctccaggcgaacagggacccgagctaaccctgagcttgcctccggttgcaacgcgcacacgcgggcccgtcg本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.一種轉錄因子GLHB-1,其特征在于,所述轉錄因子GLHB-1的氨基酸序列如SEQ?IDNO.2所示,所述轉錄因子GLHB-1通過調節SQS和/或LSS的表達完成對靈芝酸合成的調控。

    2.一種核酸,其特征在于,所述的核酸編碼權利要求1所述的轉錄因子GLHB-1。

    3.根據權利要求2所述的核酸,其特征在于,所述核酸的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

    4.一種重組載體,其特征在于,所述重組載體包含如權利要求2-3任一項所述的核酸。

    5.根據權利要求4所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體是通過將SEQ?ID?NO.1整合到pGADT7-AD或pGreen?II?62-SK載體上得到的。

    6.根據權利要求5所述的重組載體,其特征在于,SEQ?ID?NO.1整合到pGADT7-AD載體上,擴增使用的同源重組引物序列如SEQ?ID?NO.5-6所示;整合到pGreen?II?62-SK載體上,擴增使用的SEQ?ID?NO.1的同源重組引物序列如SEQ?ID?NO.7-8所示。

    7.一種基因工程細胞,其特征在于,所述基因工程細胞包含如權利要求1所述的轉錄因子GLHB-1、權利要求2-3任一項所述的核酸和/或如權利要求4-6任一項所述的重組載體。

    8.權利要求1所述的轉錄因子GLHB-1在激活SQS和LSS基因表達中的應用。

    9.根據權利要求8所述的應用,其特征在于,所述SQS基因核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示;所述LSS基因核苷酸序列如SEQ?ID?NO.4所示。

    10.權利要求1所述的轉錄因子GLHB-1、權利要求2-3任一項所述的核酸和/或如權利要求4-6任一項所述的重組載體在生產靈芝酸和/或培育靈芝新品種中的應用。

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    【技術特征摘要】

    1.一種轉錄因子glhb-1,其特征在于,所述轉錄因子glhb-1的氨基酸序列如seq?idno.2所示,所述轉錄因子glhb-1通過調節sqs和/或lss的表達完成對靈芝酸合成的調控。

    2.一種核酸,其特征在于,所述的核酸編碼權利要求1所述的轉錄因子glhb-1。

    3.根據權利要求2所述的核酸,其特征在于,所述核酸的核苷酸序列如seq?id?no.1所示。

    4.一種重組載體,其特征在于,所述重組載體包含如權利要求2-3任一項所述的核酸。

    5.根據權利要求4所述的重組載體,其特征在于,所述重組載體是通過將seq?id?no.1整合到pgadt7-ad或pgreen?ii?62-sk載體上得到的。

    6.根據權利要求5所述的重組載體,其特征在于,seq?id?no.1整合到pgadt7-ad載體上,擴增使用的同源重組...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:李振皓徐志超陳文瀟李振宇李俊熊暉孫偉周莎莎
    申請(專利權)人:浙江壽仙谷醫藥股份有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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