【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于藥物分析，一種替諾福韋及對映異構體的高效液相色譜分離檢測方法。
技術介紹
1、替諾福韋是一款核苷酸類逆轉錄酶抑制藥，對人類免疫缺陷病毒(hiv)及乙型肝炎病毒(hbv)具有抑制作用，該藥物可通過直接競爭性地與天然脫氧核糖底物相結合而抑制病毒聚合酶，及通過插入dna中終止dna鏈。在體外，本品可有效對抗多種病毒，包括那些對核苷類逆轉錄酶抑制劑耐藥的毒株。化學名稱為：r-9-(2-磷酸甲氧基丙基)腺嘌呤，其化學結構式如下：
2、
3、替諾福韋存在一個手性中心，根據替諾福韋的合成工藝路線及合成中所使用的起始物料，可知，本品的合成路線中存在對映異構體。
4、因對映異構體很難在普通的高效液相色譜上進行分離，因此開發替諾福韋的對映異構體檢測方法，檢測和分離出替諾福韋對映異構體，可以保證替諾福韋產品的有效性和安全性。
5、對于制備替諾福韋過程中產生的異構體，不論是在原料藥還是制劑中均需要進行嚴格控制。目前各國藥典中均沒有對映異構體檢測方法，文獻中替諾福韋對映異構體檢測方法，均采用手性色譜柱，手性色譜柱的費用較高，且對流動相使用有一定的限制，且在使用時色譜柱維護比較麻煩。
6、因此需要開發簡單可行、靈敏度高、專屬性好的替諾福韋及對映異構體分析檢測方法，用于替諾福韋的質量控制，對于實現對替諾福韋的安全性保證具有極其重要的意義。
技術實現思路
1、本專利技術提供了一種替諾福韋及對映體的高效液相色譜分離檢測方法。具有簡便、高效和準
2、本專利技術針對
技術介紹
中的不足，提供了一種替諾福韋對映異構體的檢測方法，具有簡便、高效和準確度高等優點，可準確反映替諾福韋原料藥中對映異構體的含量，從而能夠更好地控制和掌握產品質量，并提高臨床用藥的安全性。
3、本專利技術采用以下技術方案：
4、本專利技術提供了一種有效分離替諾福韋及其對映異構體的高效液相色譜。
5、分析方法。所述方法包括：照高效液相色譜法測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，以磷酸鹽緩沖液(取d-苯丙氨酸0.16g、五水硫酸銅0.76g與磷酸二氫銨2.31g，加水1000ml溶解后，用氨水調節ph值至4.0)-甲醇為流動相，在一定條件下進行等度洗脫。包括以下步驟：
6、在高效液相色譜儀上進行檢測
7、色譜柱填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠
8、柱溫：33℃-37℃
9、流速：0.8ml/min-1.2ml/min
10、檢測波長：262nm
11、流動相：磷酸鹽緩沖液(取d-苯丙氨酸0.16g、五水硫酸銅0.76g與磷酸二氫銨2.31g，加水1000ml溶解后，用氨水調節ph值至4.0)-甲醇
12、稀釋液：水
13、系統適用性溶液配制：取對映異構體對照品和替諾福韋對照品適量，加水溶解并稀釋成每1ml中約含替諾福韋1mg和對映異構體5μg的混合溶液，作為系統適用性溶液；
14、樣品溶液配制：取替諾福韋待測樣品，用稀釋液配制成濃度為0.8mg～1.2mg/ml的溶液，作為供試品溶液；
15、所述色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，優選inertsil?ods-sp(250mm×4.6mm,5μm)色譜柱。
16、所述流動相磷酸鹽緩沖液(取d-苯丙氨酸0.16g、五水硫酸銅0.76g與磷酸二氫銨2.31g，加水1000ml溶解后，用氨水調節ph值至4.0)-甲醇的體積比為80～95:20～5，優選85～95:15～5。
17、所述柱溫為33℃-37℃，優選35℃。
18、所述流速為0.8ml/min-1.2ml/min，優選1.0ml/min。
19、所述波長為262nm。
20、所述的系統適用性溶液中各峰之間均能夠達到基線分離，分離度≥1.5。
21、采用本專利技術提供的檢測方法，能夠使替諾福韋與其對映異構體有效分離，保證檢測的有效性，能夠準確嚴格地控制替諾福韋的質量，該方法專屬性強，靈敏度高，準確度與耐用性良好。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種替諾福韋及對映異構體的檢測分析方法，特征在于：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相為混合水溶液(D-苯丙氨酸、五水硫酸銅與磷酸二氫銨)和甲醇的混合溶液，所述混合水溶液-甲醇的體積比為85～95:15～5。
2.如權利要求1要求所述的替諾福韋對映異構體的檢測方法，其特征在于：所述混合水溶液-甲醇的體積比為90:10。
3.如權利要求2要求所述的替諾福韋、對映異構體的檢測方法，其特征在于：所述高效液相色譜檢測采用如下任選的色譜條件：流動相流速為0.8～1.2ml/min；色譜柱溫度為33～37℃；
4.如權利要求3要求所述的替諾福韋對映異構體的檢測方法，其特征在于：所述流動相流速為1.0ml/min；所述色譜柱溫度為35℃。
5.如權利要求1至4任一項所述的替諾福韋對映異構體的檢測方法，其特征在于：所述檢測方法包括供試品溶液的制備、系統適用性溶液的制備和測定三個步驟：
6.如權利要求1-5任一項所述的分離檢測方法，其特征在于所述方法中替諾福韋與對映異構體峰之間的分離度不低于1.5，且方法的重復性、準確度及靈敏度均能
...【技術特征摘要】
1.一種替諾福韋及對映異構體的檢測分析方法，特征在于：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相為混合水溶液(d-苯丙氨酸、五水硫酸銅與磷酸二氫銨)和甲醇的混合溶液，所述混合水溶液-甲醇的體積比為85～95:15～5。
2.如權利要求1要求所述的替諾福韋對映異構體的檢測方法，其特征在于：所述混合水溶液-甲醇的體積比為90:10。
3.如權利要求2要求所述的替諾福韋、對映異構體的檢測方法，其特征在于：所述高效液相色譜檢測采用如下任選的色譜條件：流動相流速為0.8～1.2ml/min...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張健，朱志雄，馬仕珉，翁蘊凡，
申請(專利權)人：蘇州朗科生物技術股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。