【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及醫藥分析，具體涉及一種恩那司他s1中間體中特定雜質的檢測方法。
技術介紹
1、恩那司他s1的中間體，化學名稱為：2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯，cas號為：1044872-40-3，結構式如下：
2、
3、目前恩那司他s1的工藝路線如下：
4、
5、從原料藥雜質研究的控制策略，恩那司他s1中可能的雜質都可以追溯到所使用的關鍵中間體2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯。
6、2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯是恩那司他s1的中間體，結合2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯的合成路線，可能存在2-氨基-4-羥基-6-氧代-1,6-二氫吡啶-3-甲酸甲酯、2-氨基-4-氯-6-氧代哌啶-3-甲酸甲酯和2-氨基-4-氯-6-羥基-3-吡啶甲酸甲酯等雜質，因雜質的存在會影響產品的質量，其質量也決定了所修飾藥物的質量，尤其是某些特定雜質含量對后續產品的純度會產生重大影響，現有技術暫無針對2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯中特定雜質檢測的手段，因此為了研究該類物質中特定雜質控制問題，針對2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯中特定雜質檢測進行了系列研究。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種恩那司他s1中間體中特定雜質的檢測方法，以克服目前沒有專屬的檢測方法和手段來檢測控制其特定雜質，其以液相色譜法檢測2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯中特定雜質，具有響應值高，可以有效分離產
2、本專利技術采用的技術方案如下：一種恩那司他s1中間體中特定雜質的檢測方法，其將供試品溶解，采用液相色譜法進行檢測；
3、所述液相色譜法色譜柱選用十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱；
4、流動相a為含0.1wt％三氟乙酸的水溶液和流動相b為含0.1wt％三氟乙酸的乙腈溶液；
5、液相色譜法柱溫為20℃～40℃、檢測波長為270nm；
6、流動相流速為0.8～1.2ml/min，洗脫方式為梯度洗脫；
7、液相色譜法進樣量為5～15μl；
8、所述特定雜質為2-氨基-4-羥基-6-氧代-1,6-二氫吡啶-3-甲酸甲酯、2-氨基-4-氯-6-氧代哌啶-3-甲酸甲酯和2-氨基-4-氯-6-羥基-3-吡啶甲酸甲酯；
9、所述液相色譜法采用紫外檢測器；
10、所述液相色譜法采用梯度洗脫方式；
11、所述液相色譜法的檢測步驟為：
12、按照色譜條件設置液相色譜儀至基線平穩，等待進樣；
13、雜質貯備溶液配制：取2-氨基-4-羥基-6-氧代-1,6-二氫吡啶-3-甲酸甲酯、2-氨基-4-氯-6-氧代哌啶-3-甲酸甲酯和2-氨基-4-氯-6-羥基-3-吡啶甲酸甲酯各10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻；
14、供試品溶液：取2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯供試品約10mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加二甲基亞砜溶解后稀釋至刻度，搖勻；
15、分離度溶液：取2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯供試品約10mg，精密稱定，置10ml量瓶中，加入1ml的雜質貯備溶液，加二甲基亞砜溶解后稀釋至刻度，搖勻；
16、根據上述色譜條件取分離度溶液進樣，考察雜質2-氨基-4-氯-6-氧代哌啶-3-甲酸甲酯、雜質2-氨基-4-氯-6-羥基-3-吡啶甲酸甲酯、雜質2-氨基-4-羥基-6-氧代-1,6-二氫吡啶-3-甲酸甲酯、產品2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯之間的分離度。
17、根據上述色譜條件取供試品溶液進樣，記錄峰面積，根據面積歸一化法計算雜質含量，計算公式如下：
18、
19、式中：
20、a雜—供試品溶液中雜質的峰面積；
21、a總—供試品溶液中所有色譜峰峰面積的總和。
22、所述液相色譜法采用梯度洗脫方式。
23、所述液相色譜法梯度洗脫程序：
24、 時間，min 流動相a，％ 流動相b，％ 0 85 15 15 60 40 20 30 70 25 30 70 30 85 15 40 85 15
25、本專利技術中，2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯(1)、2-氨基-4-羥基-6-氧代-1,6-二氫吡啶-3-甲酸甲酯(2)、2-氨基-4-氯-6-氧代哌啶-3-甲酸甲酯(3)和2-氨基-4-氯-6-羥基-3-吡啶甲酸甲酯(4)的結構式如下：
26、
27、
28、所述色譜柱為zorbax?eclipse?xdb-c18色譜柱，規格為(4.6×150mm×5μm)。
29、進一步的，所述液相色譜法柱溫為30℃。
30、進一步的，所述液相色譜法流動相流速為0.8-1.2ml/min，包括但不限于0.8ml/min、1.0ml/min、1.2ml/min。
31、進一步的，所述液相色譜法進樣量為10-20μl，包括但不限于10μl、15μl、20μl。
32、有益效果：本專利技術提供的，儀器運作成本低、檢測過程簡單便捷、具有良好的重復性，可用于評價產品質量。本專利技術在系統適用性與專屬性、線性與范圍方面均符合要求。
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1.一種恩那司他S1中間體中特定雜質的檢測方法，其特征在于，將供試品溶解，采用液相色譜法進行檢測；
2.根據權利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述檢測條件為：色譜柱為ZORBAXEclipse?XDB-C18液相色譜柱；所述液相色譜法柱溫為30℃；所述液相色譜法流動相流速為1.0ml/min。
3.根據權利要求1所述的一種恩那司他S1中間體中特定雜質的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法進樣量為10μl，供試品溶液濃度為0.8～1.2mg/ml，雜質定位溶液濃度為0.8～1.2μg/ml。
4.根據權利要求1所述的一種恩那司他S1中間體中特定雜質的檢測方法，其特征在于，2-氨基-4,6-二氯吡啶-3-甲酸甲酯、2-氨基-4-羥基-6-氧代-1,6-二氫吡啶-3-甲酸甲酯、2-氨基-4-氯-6-氧代哌啶-3-甲酸甲酯和2-氨基-4-氯-6-羥基-3-吡啶甲酸甲酯的標準曲線的確定包括：
【技術特征摘要】
1.一種恩那司他s1中間體中特定雜質的檢測方法，其特征在于，將供試品溶解，采用液相色譜法進行檢測；
2.根據權利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述檢測條件為：色譜柱為zorbaxeclipse?xdb-c18液相色譜柱；所述液相色譜法柱溫為30℃；所述液相色譜法流動相流速為1.0ml/min。
3.根據權利要求1所述的一種恩那司他s1中間體中特定雜質的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜...
【專利技術屬性】
技術研發人員：瞿軍，孫星星，
申請(專利權)人：揚州市普林斯醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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