【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及檢測，尤其是涉及一種基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法。
技術介紹
1、化合物1為靶向性urat1抑制劑、化學名為2-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4h-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸，現有技術wo2017215589a1、wo2019114838a1、wo2021249468a1分別公開了化合物1的結構、晶型及其制備方法。
2、
3、2015年12月美國fda批準了阿斯利康第一個靶向性urat1抑制劑lesinurad，并批準了其200mg/day劑量與黃嘌呤氧化酶抑制劑xoi(如febuxostat等)聯用用于高尿酸血癥和痛風性關節炎的治療。但是對于一個代謝類疾病的長期用藥，藥物的安全問題就顯得特別重要。
4、因此，準確反映化合物1的原料藥或制劑中基因毒雜質溴乙酸甲酯的含量，開發一種基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法是非常必要的。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術要解決的技術問題在于提供一種基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法，本專利技術提供的檢測方法分離度、專屬性和耐用性好，響應度高，結果準確。
2、本文術語“包括”、“包含”和“具有”之間可互換使用，旨在表示方案的包含性，意味著所述方案可存在除所列出的元素之外的其他元素。同時應當理解，在本文中使用“包括”、“包含”和“具有”描述，也提供“由……組成”方案。
3、本申請中，術語“和/或”，描述關聯對象的關聯關系，表示可以存在三種關系
4、本申請中，“至少一個”是指一個或者多個，“多個”是指兩個或兩個以上。“以下至少一項(個)”或其類似表達，是指的這些項中的任意組合，包括單項(個)或復數項(個)的任意組合。
5、應理解，在本申請的各種實施例中，下述各過程的序號的大小并不意味著執行順序的先后，部分或全部步驟可以并行執行或先后執行，各過程的執行順序應以其功能和內在邏輯確定，而不應對本申請實施例的實施過程構成任何限定。
6、為了準確反映化合物1的原料藥或制劑中基因毒雜質的含量，可以為質量標準的制定提供合理的依據，以便能夠更好的控制和掌握產品質量，從而提高臨床用藥的安全性，本專利技術提供一種化合物1和基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法。該檢測方法具有較高的準確度和精密度，耐用性強，適合醫藥工業上化合物1基因毒雜質的檢查及質量控制。
7、本專利技術提供了一種化合物2-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4h-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸中基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
8、a)將化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑反應，得到供試品溶液；所述化合物為-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4h-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸；
9、b)將溴乙酸甲酯、溶劑、三乙胺和衍生化試劑反應，得到對照品溶液；
10、c)將供試品溶液和對照品溶液分別進行高效液相色譜檢測，得到供試品色譜圖和對照品色譜圖；
11、具體色譜參數如下：
12、流動相a：0.1％甲酸溶液，流動相b：乙腈；
13、洗脫程序為：
14、0～7min，?a相?54％、b相?46％；
15、7～11min?a相?54～52％、b相?46％～48％；
16、11～18min?a相?52～50％、b相?48～50％；
17、18～20min?a相?50％、b相?50％；
18、20～22min?a相?50％～5％、b相?50％～95％；
19、22～28min?a相?5％、b相?95％；
20、28～28.1min?a相?5％～54％、b相?95％～46％；
21、28.1～35min?a相?54％、b相?46％；
22、d)根據所述對照品濃度、所述對照品溶液在色譜圖中的峰面積以及供試品溶液中與所述對照品溶液相對應的成分在色譜圖中的峰面積，且基于步驟c)中的檢測條件，以外標法計算溴乙酸甲酯的含量。
23、本專利技術提供的化合物2-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4h-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸中基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法首先將化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑反應，得到供試品溶液。
24、按照本專利技術，化合物采用溶劑溶解后，加入三乙胺、衍生化試劑混合，反應，靜置，得到供試品溶液。
25、本專利技術所述化合物為-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4h-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸。
26、結構如式(i)所示：
27、
28、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述衍生化試劑為四苯基苯硫酚。
29、本專利技術人創造性的發現，以四苯基苯硫酚為衍生化試劑時，衍生化試劑中的雜質對目標衍生峰干擾最小。
30、本專利技術所述溶劑包括但不限于乙腈。
31、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述反應溫度為25～35℃；反應時間為6～55min。
32、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述反應溫度為25～35℃；反應時間為8～40min。
33、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述反應溫度為25～33℃；反應時間為8～13min。
34、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述反應溫度為25～30℃；反應時間為8～10min。
35、本專利技術人創造性的發現，在上述衍生化溫度和時間內，衍生化結果好。
36、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑的質量-體積比為(10～100mg)：7ml：(40～60μl)：(25～40μl)。
37、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑的質量-體積比為(10～100mg)：7ml：(45～60μl)：(25～35μl)。
38、在本專利技術一部分優選實施方式中，所述化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑的質量-體積比為(10～100mg)：7ml：50μl：25μl。
39、在上述配比范圍內，本專利技術衍生化完全，峰面積無顯著性差異，目標峰分離度良好。
40、將溴乙酸甲酯、溶劑、三乙胺和衍生化試劑反應，得到對照品溶液。
41、本專利技術所述溶劑包括但不限于乙腈。
42、按照本專利技術，上述反應優選具體為25～35℃反應6～55min；優選為8～15min；更優選為25～33℃反應8～13min；最優選為25℃～30℃反應8min。
43、實驗結果表明，本專利技術所述溴乙酸甲酯的濃度在21.39ng/ml-213.88ng/ml呈良好的線性本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種化合物2-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4H-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸中基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述衍生化試劑為四苯基苯硫酚。
3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟A)所述反應溫度為25～35℃；反應時間為6～55min。
4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟A)所述化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑的質量-體積比為(20mg)：7mL：(20～60μL)：(20μL～50μL)。
5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜柱為ACE?EXCEL?3C18-PFP，色譜柱規格為4.6×150mm，3μm；色譜柱溫度為45℃。
6.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述流動相流速為1.0mL/min；進樣量為10～100μL。
7.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測波長為278nm。
8.根據權利要求1所述的檢測方
9.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述溴乙酸甲酯的檢出限濃度為10.69ng/ml；定量限濃度為21.39ng/ml。
10.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述步驟A)溶劑為乙腈；步驟B)溶劑為乙腈；
...【技術特征摘要】
1.一種化合物2-((5-溴-4-(2-氯-4-環丙基萘基-1-基)-4h-1,2,4-三氮唑-3-基)-硫)乙酸中基因毒雜質溴乙酸甲酯的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述衍生化試劑為四苯基苯硫酚。
3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟a)所述反應溫度為25～35℃；反應時間為6～55min。
4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，步驟a)所述化合物、溶劑、三乙胺和衍生化試劑的質量-體積比為(20mg)：7ml：(20～60μl)：(20μl～50μl)。
5.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述色譜柱為ace?excel?3c18...
【專利技術屬性】
技術研發人員：肖偉，王雪，張偉，何小蓮，夏雨虹，王振中，郭慶明，章晨峰，
申請(專利權)人：江蘇康緣藥業股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
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