【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及雞育種，具體涉及雞環狀rna?gal-svil_0013在促進雞原代成肌細胞增殖中的應用。
技術介紹
1、我國是雞肉消費大國，龐大的人口數量為雞肉消費提供了廣闊的市場基礎。現在的快節奏生活方式使得快餐迅速發展，肯德基、麥當勞等產品中的炸雞多使用白羽肉雞為原料，雞肉高蛋白、低脂肪、低膽固醇的特點也使得雞肉受到追求健康飲食及有健身需求的人的追捧。急需培育出高品質的雞品種，其中關鍵問題在于開發新的高遺傳力的選育指標，篩選出新的調控雞肌肉發育的關鍵基因。
2、動物骨骼肌的發育受到一系列復雜嚴密的調控，在胚胎發育過程中，中胚層的某些細胞逐漸分化為成肌細胞。成肌細胞不斷增殖并開始融合，形成多核的肌管，這是骨骼肌發育的起始階段。隨著動物的生長，肌纖維的數量基本不再增加，但肌纖維的直徑和長度不斷增大。此時，肌肉組織逐漸成熟，其功能也不斷完善。成肌細胞是骨骼肌發育的關鍵細胞。成肌細胞通過一系列的信號調控，進行定向分化，最終融合形成肌纖維。這種融合過程使得肌纖維具有多核的結構特點，為肌肉的收縮功能提供了基礎。
3、circrna是一類獨特的共價閉環rna分子，沒有5'端帽子結構和3'端poly(a)尾巴，這種環狀結構使得circrna不能通過典型的rna降解途徑降解，需要通過核酸內切酶線性化后才能將其降解，因此具有更高的體內穩定性，半衰期更長。circrna可調節肌肉發生，如直接影響骨骼肌衛星細胞的增殖和分化，這種體內穩定的rna分子或許能夠成為篩選調控雞肌肉發育的關鍵分子。
4、雞的svil基因位
技術實現思路
1、本專利技術的目的是克服現有技術的不足，提供了雞環狀rnagal-svil_0013在促進雞成肌細胞增殖中的應用以及其檢測引物。
2、本專利技術的第一個目的是提供一種雞環狀rnagal-svil_0013作為雞育種標志物的應用。通過檢測不同品種雞中的環狀rnagal-svil_0013的表達水平，篩選出雞肌肉高產的肉雞品種。
3、本專利技術的第二個目的是提供一種熒光定量pcr檢測引物在檢測雞環狀rna?gal-svil_0013的應用。本專利技術的第三個目的是提供一種雞環狀rnagal-svil_0013在促進成肌細胞增殖的應用。
4、本專利技術的第四個目的是提供一種雞環狀rnagal-svil_0013的過表達載體。
5、本專利技術的第五個目的是提供一種雞環狀rnagal-svil_0013的過表達載體在促進成肌細胞增殖的應用。
6、本專利技術的第六個目的是提供一種雞環狀rnagal-svil_0013在雞肌肉的生長發育中的應用。
7、為了實現上述目的，本專利技術是通過以下方案予以實現的：
8、專利技術以傳統慢速生長型本土肉雞(云南大圍山雞)以及快速生長型肉雞(白羽肉雞)為研究對象，這里以云南大圍山雞以及白羽肉雞的原代成肌細胞為研究對象，根據circrna的反向剪切位點序列特征設計引物，通過pcr和測序，克隆其全長并測定gal-svil_0013的環形結構。通過rnase?r和反轉錄實驗探究gal-svil_0013的分子特性，利用rt-qpcr探究gal-svil_0013在不同時期以及不同組織中的表達水平。通過構建過表達載體，結合rt-qpcr、cck-8試驗，探究gal-svil_0013對原代成肌細胞增殖的影響。
9、因此，本專利技術要求保護以下內容：
10、一種雞環狀rna，所述雞環狀rna為gal-svil_0013，其核苷酸序列如seq?id?no：1所示。
11、seq?id?no：1：
12、cgaatctcggtttgagatgtcaacgtcaggcagcgctttgtctgccggtggtgaccgtgaaagagggccgcgaaggccgaggcgctatttcactcctggtgaaaatagaaagacttctgagcgatttaaaacccaacctataacgtcagcagaacgaaaggagacggataggtaggcatgtatgtagctctgcgtggcgttgtggtgcaggtctattatgtgtgctgaaataccaactgctgacgatgaagaaaaattagatgaccgagccaaactaagtgtagctgcaaagagactgctttttagatttgaattctgacatctgtcgtcttaggaaatggaaaaatcttttgaaatgaagaatattcctaaaccacctacgagaagctcagcagtagagagaagaatgcggcgtttgcaggacagatcacacacgcagcctattaccagtgaggaagtggtcattgcagctactgaaactacccctgcttcacgttctgtgaatacccacacagtagtggcaagagtacctagtcccactctagttaagagcactgtacaacctaccag。
13、一種雞環狀rnagal-svil_0013的熒光定量pcr檢測引物，其核苷酸序列如seq?idno：2～3所示。
14、上述熒光定量pcr檢測引物在檢測雞環狀rnagal-svil_0013的應用。
15、上述雞環狀rna在促進成肌細胞增殖的應用。
16、一種含有雞環狀rna的載體在促進成肌細胞增殖的應用，所述載體含有gal-svil_0013，核苷酸序列如seq?id?no：1所示。
17、優選地，所述載體為plo5-cir。
18、與現有技術相比，本專利技術具有如下有益效果：
19、本專利技術通過一系列實驗證明了gal-svil_0013的存在和在雞肉成肌過程中的重要應用。包括：1)發現了在肌肉中svil的環狀轉錄本gal-svil_0013，并克隆獲得了該環狀rna分子的序列全長(圖1a)。2)檢測到了gal-svil_0013是真實存在的：①具有特異的反向剪切位點(跨本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種雞環狀RNA，其特征在于，所述雞環狀RNA為gal-SVIL_0013，其核苷酸序列如SEQID?NO：1所示。
2.雞環狀RNAgal-SVIL_0013的熒光定量PCR檢測引物，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2和SEQ?ID?NO：3所示。
3.權利要求2所述的熒光定量PCR檢測引物在檢測雞環狀RNA?gal-SVIL_0013的應用。
4.一種雞環狀RNA的過表達載體在促進成肌細胞增殖的應用，其特征在于，所述載體含有gal-SVIL_0013的過表達序列。
5.權利要求4所述雞環狀RNAgal-SVIL_0013促進雞成肌細胞增殖的應用。
6.權利要求2所述雞環狀RNA?gal-SVIL_0013作為雞育種標志物的應用。
【技術特征摘要】
1.一種雞環狀rna，其特征在于，所述雞環狀rna為gal-svil_0013，其核苷酸序列如seqid?no：1所示。
2.雞環狀rnagal-svil_0013的熒光定量pcr檢測引物，其特征在于，其核苷酸序列如seq?id?no：2和seq?id?no：3所示。
3.權利要求2所述的熒光定量pcr檢測引物在檢測雞環狀rna?ga...
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