【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于代謝工程領域，具體涉及一種生產l-高絲氨酸的基因工程菌株、制備方法及其應用。
技術介紹
1、l-高絲氨酸(l-homoserine，2-amino-4-hydroxybutyric?acid，hs)是一種天然存在的非必需氨基酸，是天冬氨酸家族衍生氨基酸生物合成的重要前體。不僅可用作生產許多重要化合物，例如蛋氨酸、四氫呋喃、異丁醇、蘇氨酸和γ-丁內酯等，而且可廣泛應用于食品、飼料、生物醫藥等領域。目前，國內外生產l-高絲氨酸的方法主要有以下幾種：化學法、化學手性拆分法和生物法。生物法主要包括生物酶法及發酵法兩種方式。常見報道的生物酶法工藝是利用丙酮酸和甲醛在醛縮酶和l氨基酸脫氫酶的共同作用下生成l-高絲氨酸。該工藝成本高，需要使用有毒原料甲醛和甲酸，并需使用價格昂貴的輔酶等。而微生物發酵法具有成本低、條件溫和、環境污染少等諸多優點，近年來已經成為生產各類氨基酸的首選工藝。現有技術cn112375726b公開了一種高產l高絲氨酸的基因工程菌，其中所述菌中l高絲氨酸激酶編碼基因thrb的表達被減弱或消除，進一步強化表達天冬氨酸激酶解反饋抑制突變體基因lysc、高絲氨酸脫氫酶解反饋抑制突變體基因hom、過表達天冬氨酸激酶解反饋抑制突變體基因thra以及轉運蛋白基因。此專利技術構建的l高絲氨酸高產菌株能夠產生較高水平l高絲氨酸，在最佳實施例中本專利技術的基因工程菌經過72h發酵，l高絲氨酸含量可達63.2±5.4g/l。現有專利cn113151127a公開了利用基因工程手段改造大腸桿菌，敲除或者弱化支路代謝基因，一個或多個合
2、但是，由于高絲氨酸對于細菌生長具有較強的抑制作用，規模化生產l-高絲氨酸存在產量低，需要昂貴的培養基添加物(如氨基酸、誘導劑、抗生素)等問題，因此對l-高絲氨酸的直接發酵生產具有挑戰性。
技術實現思路
1、本專利技術針對現有技術的不足，提供了一種生產l-高絲氨酸的基因工程菌株及其生產高絲氨酸的方法。
2、為實現上述專利技術目的，本專利技術的技術方案如下：
3、一方面，本專利技術提供了一種l-高絲氨酸的生產菌株shd275，所述的生產菌株shd275來源于大腸埃希氏菌escherichia?coli，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為cgmcc?no.32038。
4、具體的，所述的生產菌株的shd275的16s?rrna序列包含sed?id?no.1所示的核苷酸序列。
5、sed?id?no?1：cctaacacatgcaagtcgaacggtaacaggaaacagc?ttgctgcttcgctgacgagtggcggacgggtgagtaatgtctgggaaactgcctgatggagggggataactactggaaacggtagctaataccgcataacgtcgcaagaccaaagagggggaccttcgggcctcttgccatcggatgtgcccagatgggattagctagtaggtggggtaacggctcacctaggcgacgatccctagctggtctgagaggatgaccagccacactggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagcagtggggaatattgcacaatgggcgcaagcctgatgcagccatgccgcgtgtatgaagaaggccttcgggttgtaaagtactttcagcggggaggaagggagtaaagttaatacctttgctcattgacgttacccgcagaagaagcaccggctaactccgtgccagcagccgcggtaatacggagggtgcaagcgttaatcggaattactgggcgtaaagcgcacgcaggcggtttgttaagtcagatgtgaaatccccgggctcaacctgggaactgcatctgatactggcaagcttgagtctcgtagaggggggtagaattccaggtgtagcggtgaaatgcgtagagatctggaggaataccggtggcgaaggcggccccctggacgaagactgacgctcaggtgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgtcgacttggaggttgtgcccttgaggcgtggcttccggagctaacgcgttaagtcgaccgcctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaaatgaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgatgcaacgcgaagaaccttacctggtcttgacatccacggaagttttcagagatgagaatgtgccttcgggaaccgtgagacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgttgtgaaatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccttatcctttgttgccagcggtccggccgggaactcaaaggagactgccagtgataaactggaggaaggtggggatgacgtcaagtcatcatggcccttacgaccagggctacacacgtgctacaatggcgcatacaaagagaagcgacctcgcgagagcaagcggacctcataaagtgcgtcgtagtccggattggagtctgcaactcgactccatgaagtcggaatcgctagtaatcgtggatcagaatgccacggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccatgggagtgggttgcaaaagaagtaggtagcttaaccttcgggagggcgc。
6、另一方面，本專利技術提供了一種培養物，所述的培養物由前述所述的生產菌株shd275經培養基培養或發酵得到。
7、具體的，所述培養物為培養液、培養液提取物、全菌、全菌提取物、發酵液和/或發酵液提取物。
8、具體的，所述的培養基包括：葡萄糖35-45g、酵母粉fm408?1-3g、磷酸二氫鉀1-3g、硫酸銨10-20g、mgso4·7h2o?0.5g、feso4·7h2o?0.01g、mnso4·7h2o?0.01g、met?100mg/l和thre?100mg/l。
9、在一些實施方案中，所述的培養基包括：葡萄糖40g、酵母粉fm408?2g、磷酸二氫鉀2g、硫酸銨15g、mgso4·7h2o?0.5g、feso4·7h2o?0.01g、mnso4·7h2o?0.01g、met?100mg/l和thre?100mg/l。
10、又一方面，本專利技術提供了一種菌劑，包含前面所述的生產菌株shd275或所述的培養物。
11、具體的，所本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種L-高絲氨酸的生產菌株SHD275，其特征在于，所述生產菌株SHD275來源于大腸埃希氏菌Escherichia?coli，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC?No.32038。
2.一種培養物，其特征在于，所述培養物由權利要求1所述生產菌株SHD275經培養基培養或發酵得到。
3.根據權利要求2所述的培養物，其特征在于，所述培養基包括：葡萄糖35-45g、酵母粉FM408?1-3g、磷酸二氫鉀1-3g、硫酸銨10-20g、MgSO4·7H2O0.5g、FeSO4·7H2O?0.01g、MnSO4·7H2O?0.01g、Met?100mg/L和Thre?100mg/L。
4.根據權利要求2或3所述的培養物，其特征在于，所述培養物為培養液、培養液提取物、全菌、全菌提取物、發酵液和/或發酵液提取物。
5.一種菌劑，其特征在于，包含權利要求1所述的生產菌株SHD275或權利要求2-4中任意一項所述的培養物。
6.根據權利要求5所述的菌劑，其特征在于，所述菌劑為粉劑或液體制劑。>
7.權利要求1所述的生產菌株SHD275或權利要求2-4中任意一項所述的培養物或權利要求5-6中任意一項所述的菌劑在制備L-高絲氨酸中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種l-高絲氨酸的生產菌株shd275，其特征在于，所述生產菌株shd275來源于大腸埃希氏菌escherichia?coli，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為cgmcc?no.32038。
2.一種培養物，其特征在于，所述培養物由權利要求1所述生產菌株shd275經培養基培養或發酵得到。
3.根據權利要求2所述的培養物，其特征在于，所述培養基包括：葡萄糖35-45g、酵母粉fm408?1-3g、磷酸二氫鉀1-3g、硫酸銨10-20g、mgso4·7h2o0.5g、feso4·7h2o?0.01g、mnso4...
【專利技術屬性】
技術研發人員：于國權，呂良忠，張琳，萬麗花，田鋒，
申請(專利權)人：長青湖北生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。