【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術屬于微生物香料制備，具體涉及一種生物杏香料的制備方法及其應用。
技術介紹
1、在當今全球化的香精香料產(chǎn)業(yè)格局中，生物發(fā)酵技術利用微生物體內代謝通路，能經(jīng)酶促反應，生產(chǎn)結構精巧、香氣獨特的香料分子，廢液廢渣少，更加環(huán)保，且代謝產(chǎn)物各具風味，按需開發(fā)研究，可以精準滿足多元市場味蕾。
2、在煙用香料細分賽道，釀酒酵母發(fā)酵杏煙用香料尚處“無人區(qū)”。卷煙作為全球流行快消品，煙味品質改良需求強烈，對香料安全性、適配性要求較高。既要有馥郁甜香、清新果香為煙氣“加分添彩”，提升吸食舒適度，又要嚴守安全底線，杜絕有害化學物質殘留。釀酒酵母作為一種廣泛應用于食品和飲料工業(yè)的微生物，具有良好的發(fā)酵性能和代謝特性，能夠在發(fā)酵過程中產(chǎn)生多種有益的化合物，開發(fā)釀酒酵母發(fā)酵杏香料，契合高品質煙用杏香料市場剛需。
技術實現(xiàn)思路
1、本專利技術的目的在于提供一種生物杏香料的制備方法及其應用，以滿足當下對杏香料的高品質需求。
2、為實現(xiàn)上述目的，本申請是通過以下技術方案實現(xiàn)的：
3、一種生物杏香料的制備方法，包括以下步驟：
4、s1、取微生物菌制劑，按處理菌量為1.85×108?-?2.83×108cfu/g?標準，將懸浮液接種至滅菌干杏汁中，隨后置于溫度30℃、轉速150?rpm?的搖床中發(fā)酵36-48?小時；
5、s2、將s1步驟中發(fā)酵完成的杏汁加入75%乙醇，加熱回流提取2h，之后真空抽濾分離出濾液和濾渣，濾渣中繼續(xù)加入75%乙醇，重復上述操
6、進一步的，步驟s1中，微生物菌為釀酒酵母，所述釀酒酵母分類命名為saccharomyces?cerevisiae，菌株名為hs-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為cgmcc?no.30677。
7、進一步的，所述釀酒酵母hs-1在ypd固體培養(yǎng)基平板上呈乳白色圓形菌落，表面光滑濕潤，質地致密且容易挑起。
8、進一步的，所述釀酒酵母的培養(yǎng)方法為：將釀酒酵母液按1%的接種量，接種至ypd液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件：溫度30℃，轉速150?rpm，培養(yǎng)時間12-18?h。
9、進一步的，所述ypd液體培養(yǎng)基配方為：蛋白胨20g/l，葡萄糖20g/l，酵母粉10g/l，ypd固體培養(yǎng)基配方為：蛋白胨20g/l，葡萄糖20g/l，酵母粉10g/l，瓊脂20g/l。
10、進一步的，微生物菌制劑的制備方法，利用上述任一項的釀酒酵母，包括以下步驟：
11、s11、釀酒酵母活化液制備：
12、在30℃、150?r/min的條件下對釀酒酵母進行活化培養(yǎng)，震蕩培養(yǎng)12?h后獲得釀酒酵母活化液；
13、s12、單菌落培養(yǎng)：
14、將步驟s11中所得釀酒酵母活化液十倍稀釋后，取100μl均勻涂布至ypd固體培養(yǎng)基，于30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72?h，直至觀察到清晰的釀酒酵母單菌落；
15、s13、種子液制備：
16、挑取步驟s12所得釀酒酵母單菌落，接種至ypd液體培養(yǎng)基，在30℃、150?r/min的條件下震蕩培養(yǎng)，至培養(yǎng)液od?600nm值達到0.8-1.0，得到種子液；
17、s14、微生物菌制劑制備：
18、將步驟s13中所得的種子液高速離心，離心條件：4℃，10000?rpm/min，8?min，棄去上清液，等量無菌水復溶，重復上述離心操作后再次用等量無菌水復溶，最終得到微生物菌制劑。
19、一種應用，上述任一項制備的生物杏香料在卷煙上的應用。
20、進一步的，所述生物杏香料在卷煙上的施加量為煙絲質量的0.25-0.35%。
21、本專利技術的有益效果是：
22、本申請利用釀酒酵母發(fā)酵制備生物杏香料，通過微生物發(fā)酵作用，提高杏香料的香氣，感官評價及gc-ms分析結果都顯示較好，通過卷煙加香感官評價后發(fā)現(xiàn)，甜香、果香香韻，增加煙氣甜潤感、降低刺激性；gc-ms分析香味成分后發(fā)現(xiàn)3-羥基-2-丁酮、月桂酸等香味物質含量提高，并生成了異戊醇、乙酸異戊酯、苯乙醇、乙酸苯乙酯等新的香味物質。
23、該生物杏香料應用于卷煙中能明顯提高卷煙甜香、果香香韻，增加煙氣甜潤感、降低刺激性。
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1.一種生物杏香料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權利要求1所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，步驟S1中，微生物菌為釀酒酵母，所述釀酒酵母分類命名為Saccharomyces?cerevisiae，菌株名為HS-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為CGMCC?No.30677。
3.根據(jù)權利要求2所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，所述釀酒酵母在YPD固體培養(yǎng)基平板上呈乳白色圓形菌落，表面光滑濕潤，質地致密且容易挑起。
4.根據(jù)權利要求3所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，所述釀酒酵母的培養(yǎng)方法為：將釀酒酵母液按1%的接種量，接種至YPD液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件：溫度30℃，轉速150rpm，培養(yǎng)時間12-18?h。
5.根據(jù)權利要求4所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，所述YPD液體培養(yǎng)基配方為：蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉10g/L，YPD固體培養(yǎng)基配方為：蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，酵母粉10g/L，瓊脂20g/L。
6.根據(jù)權利要求1所
7.一種應用，其特征在于，上述權利要求1至6中任一項制備的生物杏香料在卷煙上的應用。
8.根據(jù)權利要求7所述的應用，其特征在于，所述生物杏香料在卷煙上的施加量為煙絲質量的0.25-0.35%。
...【技術特征摘要】
1.一種生物杏香料的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據(jù)權利要求1所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，步驟s1中，微生物菌為釀酒酵母，所述釀酒酵母分類命名為saccharomyces?cerevisiae，菌株名為hs-1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為cgmcc?no.30677。
3.根據(jù)權利要求2所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，所述釀酒酵母在ypd固體培養(yǎng)基平板上呈乳白色圓形菌落，表面光滑濕潤，質地致密且容易挑起。
4.根據(jù)權利要求3所述的生物杏香料的制備方法，其特征在于，所述釀酒酵母的培養(yǎng)方法為：將釀酒酵母液按1%的接種量，接種至ypd液體培養(yǎng)基...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：王清福，李蕾，陳芝飛，蘆昶彤，趙嘉鳴，席高磊，王澤寧，趙永振，曹雪穎，劉前進，陳浩洋，張榴可，
申請(專利權)人：河南中煙工業(yè)有限責任公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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