【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物香料，具體涉及一種黃曲霉、微生物菌制劑、杏香料的制備方法及應用。
技術介紹
1、在香精香料生產領域，傳統的人工合成與天然動植物提取方式都存在一定的局限性。人工合成香料雖方法高效，但因其可能使用有害原料和產生副產物，公眾對其安全性存在質疑，長期接觸或攝入可能對人體健康帶來潛在風險。而天然香料提取過程復雜且效率低，受提取工藝局限難以達到應用標準，不僅限制使用范圍還可能造成環境資源浪費。利用微生物發酵技術制備香精香料，通過微生物的代謝作用，過程相對綠色環保，能有效降低對人體健康的潛在風險。同時微生物菌種在發酵過程中會產生不同的代謝產物，賦予香料獨特的香氣和更加豐富的層次感。
2、目前，還沒有黃曲霉發酵煙用杏香料出現，更沒有將其添加到卷煙中應用的報道。利用黃曲霉其獨特代謝特性，生產出具有特色的生物杏煙用香料，有利于滿足市場對高品質香料的需求。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種黃曲霉、微生物菌制劑、杏香料的制備方法及應用，該黃曲霉可作為發酵菌株在杏香料制備過程中發揮作用，提高杏香料中的果香、甜香。
2、為實現上述目的，本申請是通過以下技術方案實現的：
3、一種黃曲霉，分類命名為aspergillus?flavus，菌株名為hs-4，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為cgmcc?no.41231。
4、進一步的，所述黃曲霉hs-4在pda固體培養基平板上呈現乳白色，菌落表面絨毛狀,?中心部分
5、進一步的，述黃曲霉的培養方法為：將黃曲霉液按1%的接種量，接種至pda液體培養基中培養24?h。
6、進一步的，所述黃曲霉的培養條件是溫度28℃，轉速150?rpm。
7、進一步的，所述pda液體培養基配方為：馬鈴薯浸出粉30％，葡萄糖2％，pda固體培養基配方為：馬鈴薯浸出粉30％，葡萄糖2％，瓊脂2％。
8、一種微生物菌制劑的制備方法，包括上述任一項的黃曲霉，包括以下步驟：
9、s1、黃曲霉活化液制備：
10、在28℃、150?r/min的條件下對黃曲霉進行活化培養，震蕩培養24-48?h后獲得黃曲霉活化液；
11、s2、單菌落培養：
12、將步驟s1中所得黃曲霉活化液十倍稀釋后，涂布至pda固體培養基，于28℃恒溫培養箱中培養48-72?h，直至觀察到清晰的黃曲霉單菌落；
13、s3、種子液制備：
14、挑取步驟s2所得黃曲霉單菌落，接種至pda液體培養基，在28℃、150?r/min的條件下震蕩培養，至培養液od?600nm值達到0.8-1.0，得到種子液；
15、s4、微生物菌制劑制備：
16、將步驟s3中所得的種子液高速離心，離心條件：4℃，10000?rpm/min，8?min，棄去上清液，等量無菌水復溶，重復上述離心操作后再次用等量無菌水復溶，最終得到微生物菌制劑。
17、一種杏香料的制備方法，利用上述的微生物菌制劑，包括以下步驟：
18、（1）杏香料發酵：
19、取微生物菌制劑，以處理菌量為106?cfu/g標準，按5%體積比接種至滅菌杏汁中，隨后置于溫度28℃、轉速150?rpm?的搖床中發酵60-72?h；
20、（2）杏香料提取：
21、將步驟（1）中發酵完成的杏汁加入75%乙醇，加熱回流提取2h，之后真空抽濾分離出濾液和濾渣，濾渣中繼續加入75%乙醇，重復上述操作兩次，將三次所得濾液合并，靜置24h后，取上層清液進行減壓濃縮，以獲得生物杏香料。
22、一種應用，上述制備的生物杏香料在卷煙中的應用。
23、本專利技術的有益效果是：
24、本申請利用黃曲霉發酵杏香料，通過微生物代謝作用，提高杏香原料的香氣，感官評價及gc-ms分析結果都顯示較好，通過感官評價后發現，果香、甜香增加；gc-ms分析香味成分后發現乙酸十八酯、月桂酸等香味物質含量提高，并生成了2,3-二氫-3,5二羥基-6-甲基-4(h)-吡喃-4-酮、5-甲基糠醛、鄰苯二甲酸二丁酯等新的香味物質。
25、該黃曲霉可作為發酵菌株在煙用杏香料發酵中發揮作用，提高杏香料的果香、甜香香韻，增加煙氣細膩性，減少刺激。
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1.一種黃曲霉，其特征在于，分類命名為Aspergillus?flavus，菌株名為HS-4，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為CGMCC?No.41231。
2.根據權利要求1所述的黃曲霉，其特征在于，所述黃曲霉在PDA固體培養基平板上呈現乳白色，菌落表面絨毛狀,?中心部分較為致密，邊緣較為擴散，菌落質地干燥。
3.根據權利要求1所述的黃曲霉，其特征在于，述黃曲霉的培養方法為：將黃曲霉液按1%的接種量，接種至PDA液體培養基中培養24?h。
4.根據權利要求3所述的黃曲霉，其特征在于，所述黃曲霉的培養條件是溫度28℃，轉速150?rpm。
5.根據權利要求3所述的黃曲霉，其特征在于，所述PDA液體培養基配方為：馬鈴薯浸出粉30％，葡萄糖2％，PDA固體培養基配方為：馬鈴薯浸出粉30％，葡萄糖2％，瓊脂2％。
6.一種微生物菌制劑的制備方法，包括上述權利要求1至5中任一項的黃曲霉，其特征在于，包括以下步驟：
7.一種杏香料的制備方法，利用上述權利要求6的的微生物菌制劑，其特征在于，包括以
8.一種應用，其特征在于，上述權利要求7制備的生物杏香料在卷煙中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種黃曲霉，其特征在于，分類命名為aspergillus?flavus，菌株名為hs-4，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通生物中心，保藏號為cgmcc?no.41231。
2.根據權利要求1所述的黃曲霉，其特征在于，所述黃曲霉在pda固體培養基平板上呈現乳白色，菌落表面絨毛狀,?中心部分較為致密，邊緣較為擴散，菌落質地干燥。
3.根據權利要求1所述的黃曲霉，其特征在于，述黃曲霉的培養方法為：將黃曲霉液按1%的接種量，接種至pda液體培養基中培養24?h。
4.根據權利要求3所述的黃曲霉，其特征...
【專利技術屬性】
技術研發人員：李蕾，陳芝飛，蘆昶彤，王清福，趙嘉鳴，席高磊，趙永振，王澤寧，寧一博，陳浩洋，張榴可，曹雪穎，楊柳依，
申請(專利權)人：河南中煙工業有限責任公司，
類型：發明
國別省市：
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