【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及香菇活性成分測定，具體而言，涉及一種同時檢測香菇中麥角硫因、麥角甾醇、過氧化麥角甾醇和香菇嘌呤的方法。
技術介紹
1、香菇是一種廣泛栽培的食用和藥用真菌，含有豐富的營養成分和生物活性化合物。近年來，隨著功能性食品研究的深入，麥角硫因、香菇嘌呤、麥角甾醇及過氧化麥角甾醇作為香菇的重要活性成分，受到了越來越多的關注。
2、其中，麥角硫因是一種源于真菌和藍藻的天然氨基酸衍生物，具有強大的抗氧化功能，已在多種研究中被證明能夠抵御氧化應激、保護細胞免受損傷。香菇嘌呤是一種生物堿，最早從香菇中提取出來，香菇也被認為是香菇嘌呤的主要來源。香菇嘌呤能夠通過抑制s-腺苷-l-高半胱氨酸水解酶(sah水解酶)來減少膽固醇的合成，有助于降低血清中的膽固醇水平。麥角甾醇是香菇中含量較高的固醇類化合物，是維生素d2的前體，廣泛存在于真菌細胞膜中，具有抗氧化、抗腫瘤及免疫調節作用。過氧化麥角甾醇則由于其獨特的結構和藥理活性，已在抗癌、抗炎及抗菌研究中引起了廣泛關注。
3、但目前，對于如何有效檢測香菇中麥角硫因、麥角甾醇、過氧化麥角甾醇和香菇嘌呤的含量，還未見有準確可行的同時檢測方法。
4、鑒于此，特提出本專利技術。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種同時檢測香菇中麥角硫因、麥角甾醇、過氧化麥角甾醇和香菇嘌呤的方法，以解決或改善上述技術問題。
2、本專利技術可這樣實現：
3、第一方面，本專利技術提供一種同時檢測香菇中麥角硫因、
4、采用超高效液相色譜-串聯質譜方法按以下條件對香菇提取液進行檢測：
5、色譜條件包括：采用hilic或c18色譜柱；流動相包括流動相a和流動相b，其中，流動相a為含有甲酸的水溶液，流動相b為含有甲酸的甲醇或乙腈溶液；洗脫時間及洗脫時間內流動相b的體積含量如下：0min～0.2min，80％；0.2min～1min，80％～90％；1min～4min，90％～100％；4min～8.5min，100％；8.5min～8.6min，100％～80％；8.6min～11min，80％；
6、質譜條件包括：離子源類型為電噴霧電離源；掃描模式為正離子多重反應監測模式；離子噴霧溫度為315℃～325℃；離子傳輸管溫度為320℃～330℃；離子噴霧電壓為3500v～3700v；鞘氣為25psi～35psi；輔助氣為5psi～15psi；尾氣為0psi。
7、在可選的實施方式中，色譜柱為acquity?uplc?beh?hilic色譜柱或acquitybeh?c18色譜柱。
8、在可選的實施方式中，采用acquitybeh?c18作為色譜柱，色譜柱規格為2.1mm×100mm，1.7μm。
9、在可選的實施方式中，流動相a和流動相b中分別所含的甲酸的體積百分數為0.1％～0.3％。
10、在可選的實施方式中，流動相a和流動相b中分別所含的甲酸的體積百分數為0.2％。
11、在可選的實施方式中，流動相的流速為0.2ml/min～0.4ml/min。
12、在可選的實施方式中，流動相的流速為0.3ml/min。
13、在可選的實施方式中，提取液的進樣量為4μl～6μl，和/或，柱溫箱的溫度為34℃～36℃。
14、在可選的實施方式中，提取液的進樣量為5μl，和/或，柱溫箱的溫度為35℃。
15、在可選的實施方式中，離子噴霧溫度為320℃；離子傳輸管溫度為325℃；離子噴霧電壓為3600v；鞘氣為30psi；輔助氣為10psi；尾氣為0psi。
16、在可選的實施方式中，香菇提取液的制備包括：將待測的鮮香菇樣品進行切塊、液氮浸泡、勻漿處理，隨后加入提取溶劑進行提取，得到提取液；或，將待測的干香菇樣品進行磨粉、過篩處理，隨后加入提取溶劑進行提取，得到提取液。
17、在可選的實施方式中，提取所用的提取溶劑包括甲醇、乙腈、異丙醇和水中的至少一種。
18、在可選的實施方式中，提取所用的提取溶劑為甲醇體積不低于80％的甲醇-水溶液。
19、在可選的實施方式中，提取溶劑為甲醇體積為85％～95％的甲醇-水溶液；
20、在可選的實施方式中，提取溶劑為甲醇體積為90％的甲醇-水溶液。
21、在可選的實施方式中，提取過程中，提取溶劑與待測香菇樣品的固液比為10ml:1g至120ml:1g。
22、在可選的實施方式中，固液比為120ml:1g。
23、在可選的實施方式中，提取采用超聲提取方式。
24、在可選的實施方式中，超聲提取溫度為常溫。
25、在可選的實施方式中，超聲提取時間為10min～160min。
26、在可選的實施方式中，超聲提取時間為30min～60min。
27、在可選的實施方式中，超聲提取時間為60min。
28、本專利技術的有益效果包括：
29、本專利技術實施例提供的香菇中麥角硫因、麥角甾醇、過氧化麥角甾醇和香菇嘌呤的同時檢測分析方法，采用超高效液相色譜-串聯質譜方法檢測香菇中的四種活性化合物，通過對香菇的前處理條件以及對超高效液相色譜-串聯質譜的儀器參數進行優化，使得目標的化合物得到高效提取和高選擇性、高靈敏度精準檢測。
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1.一種同時檢測香菇中麥角硫因、麥角甾醇、過氧化麥角甾醇和香菇嘌呤的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱為ACQUITY?UPLC?BEH?HILIC色譜柱或BEH?C18色譜柱；
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，流動相A和流動相B中分別所含的甲酸的體積百分數為0.1％～0.3％；
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，流動相的流速為0.2mL/min～0.4mL/min；
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，提取液的進樣量為4μL～6μL，和/或，柱溫箱的溫度為34℃～36℃；
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，離子噴霧溫度為320℃；離子傳輸管溫度為325℃；離子噴霧電壓為3600V；鞘氣為30psi；輔助氣為10psi；尾氣為0psi。
7.根據權利要求1～6任一項所述的方法，其特征在于，香菇提取液的制備包括：將待測的鮮香菇樣品進行切塊、液氮浸泡、勻漿處理，隨后加入提取溶劑進行提取，得到提取液；或，將待測的干香菇樣品進行磨粉、過篩
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，提取所用的提取溶劑包括甲醇、乙腈、異丙醇和水中的至少一種；
9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，提取過程中，提取溶劑與待測香菇樣品的固液比為10mL:1g至120mL:1g；
10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，提取采用超聲提取方式；
...【技術特征摘要】
1.一種同時檢測香菇中麥角硫因、麥角甾醇、過氧化麥角甾醇和香菇嘌呤的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，色譜柱為acquity?uplc?beh?hilic色譜柱或beh?c18色譜柱；
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，流動相a和流動相b中分別所含的甲酸的體積百分數為0.1％～0.3％；
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，流動相的流速為0.2ml/min～0.4ml/min；
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，提取液的進樣量為4μl～6μl，和/或，柱溫箱的溫度為34℃～36℃；
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，離子噴霧溫度為320℃；離子傳...
【專利技術屬性】
技術研發人員：翁瑞，孫振英，邱靜，錢永忠，
申請(專利權)人：中國農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所，
類型：發明
國別省市：
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