【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及干細胞擴增領域，具體是用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝。
技術介紹
1、臍帶間充質干細胞作為一種具有自我復制和分化潛能的原始細胞，是具備活性的特殊生物產品。但是現有的用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝的工藝參數和設定的參數值范圍相對不穩定，不夠安全。因此，本領域技術人員提供了用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，以解決上述
技術介紹
中提出的問題。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，以解決上述
技術介紹
中提出的問題。
2、為實現上述目的，本專利技術提供如下技術方案：
3、用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，包括如下步驟：
4、s101、取符合要求的臍帶，用沖洗液沖洗干凈后，用剪刀(鑷子)等剔去血管(動脈血管及靜脈血管)，剝離出華通氏膠組織，將所得組織充分剪碎，經組織培養后，形成大小不等的細胞集落，即p0代細胞；
5、s102、所述步驟s101中的p0代細胞經消化收集、洗滌過濾純化和換液等技術操作有效地除去各種異質細胞及雜質，經體外擴增培養得到第一代臍帶間充質干細胞，即p1代細胞；
6、s103、所述步驟s102中的p1代細胞經消化收集、洗滌純化等技術操作有效地提高細胞的純度，約72小時體外擴增培養得到第二代臍帶間充質干細胞，即p2代細胞；
7、s104、符合質量控制標準的p2代細胞經體外擴增培養至p3代細胞～p5代細胞；
8、s105、建立臍帶間充質干細胞的三級細胞庫
9、作為本專利技術進一步的方案：所述步驟s102中p1代細胞培養階段的臍帶間充質干細胞采用適當的凍存保護劑經液氮凍存存入初級細胞庫，三根臍帶同一批次約凍存9—12管，每管細胞數2～3*106個細胞。
10、作為本專利技術進一步的方案：所述步驟s103中p2代細胞需檢測細胞活率、無菌、支原體以及病毒、細胞表型等，合格后需采用適當的凍存保護劑經液氮凍存保存，存入臍帶間充質干細胞的主細胞庫，三根臍帶同一批次約凍存12—16管，每管細胞數2～3*106個細胞。
11、作為本專利技術進一步的方案：所述步驟s104中第五p5代細胞需檢測無菌、支原體、細胞活率、細胞表型、成脂成骨成軟骨誘導分化等，合格后采用適當的凍存保護劑經液氮凍存保存，存入p5代細胞，三根臍帶同一批次約凍存95—120管，每管細胞數2～3*106個細胞。
12、與現有技術相比，本專利技術的有益效果是：
13、本專利技術經過第一、二、三輪臍帶間充質干細胞的擴增工藝是工藝參數和設定的參數值范圍穩定、安全，可在此基礎上進行生產工藝放大，可快速擴增。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：所述步驟S102中P1代細胞培養階段的臍帶間充質干細胞采用適當的凍存保護劑經液氮凍存存入初級細胞庫，三根臍帶同一批次約凍存9—12管，每管細胞數2～3*106個細胞。
3.根據權利要求1所述的用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：所述步驟S103中P2代細胞需檢測細胞活率、無菌、支原體以及病毒、細胞表型等，合格后需采用適當的凍存保護劑經液氮凍存保存，存入臍帶間充質干細胞的主細胞庫，三根臍帶同一批次約凍存12—16管，每管細胞數2～3*106個細胞。
4.根據權利要求1所述的用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：所述步驟S104中第五P5代細胞需檢測無菌、支原體、細胞活率、細胞表型、成脂成骨成軟骨誘導分化等，合格后采用適當的凍存保護劑經液氮凍存保存，存入P5代細胞，三根臍帶同一批次約凍存95—120管，每管細胞數2～3*106個細胞。
【技術特征摘要】
1.用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：所述步驟s102中p1代細胞培養階段的臍帶間充質干細胞采用適當的凍存保護劑經液氮凍存存入初級細胞庫，三根臍帶同一批次約凍存9—12管，每管細胞數2～3*106個細胞。
3.根據權利要求1所述的用于臍帶間充質干細胞的擴增工藝，其特征在于：所述步驟s103中p2代細胞需檢測細胞活率、無菌、支原體以及病毒、細胞...
【專利技術屬性】
技術研發人員：安勝軍，
申請(專利權)人：河北紐西諾生物醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。