【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種計數芯片，具體為一體化細胞計數芯片，屬于生物醫學檢測。
技術介紹
1、細胞計數是一種非常重要的檢測方法和工具，主要用于對人體細胞，以及各類細菌、真菌甚至一些特定顆粒進行數量的統計分析，獲得各類細胞懸液的濃度、活率等參數，為研究人員或臨床醫生提供人體、生物反應體系等的狀態信息。
2、目前細胞染色與計數方法有人工計數和儀器自動化計數兩種，其計數過程和步驟大致相同，區別是最終計數方式。人工計數采用肉眼的方式，而儀器自動化計數則采用計算機采集圖像并經處理獲得結果。以臺盼藍為例，兩者的檢測步驟為：
3、步驟1：配置染色試劑，通常需要將臺盼藍稀釋成0.4％左右的溶液；
4、步驟2：染色，向細胞懸液中加入0.4％的臺盼藍溶液，并使得細胞懸液中臺盼藍最終濃度約為0.04％；
5、步驟3：計數，將染色完的細胞懸液添加至細胞計數芯片中，使用顯微成像設備如顯微鏡，通過肉眼或計算機處理的方式獲得細胞濃度和活率。
6、其中，步驟1、步驟2都需要人工使用移液器數次移液，并使用相應的離心管、移液器槍頭等耗材；而步驟3中，不僅需要人工移液，還需要使用專用的細胞計數芯片。從步驟1至步驟3不難看出，現有的無論人工計數還是自動細胞計數的過程都頗為繁瑣復雜，涉及的耗材包括細胞計數芯片、多個移液器槍頭與離心管等，成本較高，耗時長，且與當今醫學檢測的高通量自動化相悖，阻礙了細胞計數領域高通量檢測的發展，為此，提出一種一體化細胞計數芯片及細胞染色與計數方法。
技術實現思
1、有鑒于此，并得益于微流控芯片技術的發展，在微流控芯片內部實現流體的定量、輸運、混合成為可能，本專利技術提供一種一體化細胞計數芯片及細胞染色與計數方法，拋棄了現有技術中步驟1至步驟3的繁瑣過程，以解決或緩解現有技術中存在的技術問題，至少提供有益的選擇。
2、本專利技術實施例的技術方案是這樣實現的：一種一體化細胞計數芯片，包括本體，所述細胞計數芯片還包括位于本體內的裝夾接口、細胞計數腔體、進樣口和細胞染色試劑；
3、其中，所述進樣口與細胞計數腔體之間設有第一流道，所述裝夾接口與所述細胞計數腔體之間連接有第二流道，所述細胞染色試劑封裝在本體的內部；
4、其中，所述進樣口用于深入細胞懸液中吸取細胞樣本；
5、其中，所述第一流道用于將進樣口吸取的細胞樣本輸送至細胞計數腔體內；
6、其中，所述細胞計數腔體用于容納細胞懸液，并外接成像裝置進行細胞成像；
7、其中，所述第二流道用于傳輸空氣；
8、其中，所述裝夾接口用于外接負壓裝置與細胞計數芯片的連接。
9、進一步優選的，所述裝夾接口處本體的外徑小于9.5mm，徑向方向最大寬度小于9.5mm。
10、進一步優選的，所述細胞計數腔體為扁平形狀的腔體，深度范圍為：10μm-300μm；面積范圍為：1mm2-300mm2；
11、其中，所述細胞計數腔體的形狀包括但不限于限于圓形、長方形；
12、所述細胞計數腔體的兩側為具有光學透明度的表面。
13、進一步優選的，所述細胞染色試劑包括但不限于臺盼藍、ao/pi染色試劑；細胞染色試劑的封裝方式包括但不限于風干、凍干。
14、進一步優選的，所述細胞計數芯片還包括試劑腔體；
15、其中，所述試劑腔體位于第一流道和細胞計數腔體之間，所述細胞染色試劑位于試劑腔體的內部；
16、所述試劑腔體的深度為10μm-500μm，面積為1mm2-200mm2；
17、細胞染色試劑被封裝在本體內的試劑腔體中。
18、進一步優選的，所述細胞計數芯片還包括一個或多個混合流道，所述混合流道連接于細胞計數腔體和進樣口之間，用于對吸入的細胞懸液或對細胞懸液和細胞染色試劑進行混勻；
19、其中，所述混合流道的深度為100μm-1000μm；
20、所述細胞計數腔體和試劑腔體的深度均小于第一流道、第二流道和混合流道的深度。
21、進一步優選的，所述混合流道為平面或立體結構，其形狀包括但不限于蛇形流道、具有局部收縮與擴展的流道和具有內部障礙物的流道，三者之間的任意組合，組合后的混合流道高度方向上相同。
22、進一步優選的，所述細胞計數芯片還包括節流口、固定結構和用于顯微成像的對焦結構，所述節流口為局部流道尺寸急劇增加或急劇減小的結構，所述節流口位于第二流道和裝夾接口之間，用于對從細胞計數腔體中流出的液體進行節流，阻礙其進入裝夾接口；
23、所述固定結構設于所述本體外側；
24、所述對焦結構的位置包括但不限于本體的表面和細胞計數腔體的內壁，所述對焦結構的形狀包括但不限于線條、圖案或兩者組合。
25、進一步優選的，所述細胞計數芯片還包括氣孔，所述氣孔開設于所述本體的外側，并與所述第二流道連通，所述氣孔用于排氣。
26、一種一體化細胞染色與計數方法，包括以下步驟：
27、s1、通過細胞計數芯片利用與外接壓力裝置進行連接固定；
28、s2、在外接壓力裝置的驅動下，利用進樣口吸入細胞懸液，體積為10μl-30μl；
29、s3、細胞懸液通過第一流道進入試劑腔體內，對細胞染色試劑進行溶解；
30、s4、通過混合流道對流經的細胞懸液和細胞染色試劑進行充分混勻，完成細胞染色；
31、s5、染色后的細胞懸液進入細胞計數腔體內；
32、s6、通過顯微成像裝置直接獲取細胞計數腔體內的細胞圖像信息，并利用圖像識別技術計算細胞活率。
33、本專利技術實施例由于采用以上技術方案，其具有以下優點：本專利技術通過在芯片內部集成裝夾接口、細胞計數腔體、進樣口，以及將細胞染色試劑設置在芯片內部，以便外接負壓源裝置通過細胞計數芯片吸取細胞懸液樣品時，細胞懸液流入細胞計數芯片內部對細胞染色試劑進行溶解，完成染色，然后利用細胞計數腔體配合外接成像裝置完成計數，從而僅需一次吸取樣品，便可完成細胞計數操作，簡化了細胞計數步驟，提高了細胞計數檢測通量和效率。
34、上述概述僅僅是為了說明書的目的，并不以任何方式進行限制。除上述描述的示意性的方面、實施方式和特征之外，通過參考附圖和以下的詳細描述，本專利技術進一步的方面、實施方式和特征將會是容易明白的。
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1.一種一體化細胞計數芯片，包括本體(1)，其特征在于，所述細胞計數芯片還包括位于本體(1)內的裝夾接口(101)、細胞計數腔體(103)、進樣口(105)和細胞染色試劑(109)；
2.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述裝夾接口(101)處本體(1)的外徑小于9.5mm，徑向方向最大寬度小于9.5mm。
3.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數腔體(103)為扁平形狀的腔體，深度范圍為：10μm-300μm；面積范圍為：1mm2-300mm2；
4.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞染色試劑(109)包括但不限于臺盼藍、AO/P?I染色試劑；所述細胞染色試劑(109)的封裝方式包括但不限于風干、凍干。
5.根據權利要求4所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數芯片還包括試劑腔體(107)；
6.根據權利要求4所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數芯片還包括一個或多個混合流道(104)，所述混合流道(104)連接于細胞計數腔
7.根據權利要求6所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述混合流道(104)為平面或立體結構，其形狀包括但不限于蛇形流道、具有局部收縮與擴展的流道和具有內部障礙物的流道，三者之間的任意組合，組合后的混合流道(104)高度方向上相同。
8.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數芯片還包括節流口(110)、固定結構(108)和用于顯微成像的對焦結構(111)，所述節流口(110)為局部流道尺寸急劇增加或急劇減小的結構，所述節流口(110)位于第二流道(106)和裝夾接口(101)之間，用于對從細胞計數腔體(103)中流出的液體進行節流，阻礙其進入裝夾接口(101)；
9.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數芯片還包括氣孔(112)，所述氣孔(112)開設于所述本體(1)的外側，并與所述第二流道(106)連通，所述氣孔(112)用于排氣。
10.一種一體化細胞染色與計數方法，其特征在于，包括以下步驟：
...【技術特征摘要】
1.一種一體化細胞計數芯片，包括本體(1)，其特征在于，所述細胞計數芯片還包括位于本體(1)內的裝夾接口(101)、細胞計數腔體(103)、進樣口(105)和細胞染色試劑(109)；
2.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述裝夾接口(101)處本體(1)的外徑小于9.5mm，徑向方向最大寬度小于9.5mm。
3.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數腔體(103)為扁平形狀的腔體，深度范圍為：10μm-300μm；面積范圍為：1mm2-300mm2；
4.根據權利要求1所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞染色試劑(109)包括但不限于臺盼藍、ao/p?i染色試劑；所述細胞染色試劑(109)的封裝方式包括但不限于風干、凍干。
5.根據權利要求4所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數芯片還包括試劑腔體(107)；
6.根據權利要求4所述的一體化細胞計數芯片，其特征在于：所述細胞計數芯片還包括一個或多個混合流道(104)，所述混合流道(104)連接于細胞計數腔體(103...
【專利技術屬性】
技術研發人員：周武平，牟波，石亞輝，張挺，
申請(專利權)人：上海漢贊迪生命科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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