【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
技術介紹
1、生物或化學研究中的各種方案涉及在局部支撐表面上或在預定義的反應室內進行大量受控反應。然后可觀察或檢測指定的反應，并且隨后的分析可有助于識別或揭示反應中所涉及的化學品的特性。在一些示例中，受控反應會改變電荷、導電性或一些其他電特性，因此電子系統可用于檢測。在其他示例中，受控反應會產生熒光，因此光學系統可用于檢測。
技術實現思路
1、本文公開了一種用于在懸浮液中在聚集狀珠群體被捕獲在流通池表面上之前富集它們的方法。該方法使得文庫模板接種能夠以子泊松比在懸浮液中進行，這導致單克隆聚集狀珠，同時減輕收率損失，否則收率損失可能以如此低的接種比發生。為了減輕收率的損失，該方法利用標記的引物來引發聚集。結果，經標記的珠被聚集，而未標記的珠保持不聚集。標記經特別選擇為結合對的一個成員。結合對的另一個成員涂覆在另一個非磁珠上，該另一個非磁珠在聚集后被引入懸浮液中。標記使得聚集狀珠能夠與非聚集狀珠分離。
【技術保護點】
1.一種富集方法，所述富集方法包括：
2.根據權利要求1所述的富集方法，其中從所述懸浮液中的所述多個磁珠生成聚集狀磁珠和非聚集狀磁珠的所述混合物包括：
3.根據權利要求1所述的富集方法，其中所述多個經涂覆的非磁珠以大于1:1至300:1范圍內的磁珠:經涂覆的非磁珠比率添加到所述懸浮液中。
4.根據權利要求1所述的富集方法，其中從所述第一擴增子進行所述5’-標記的第二擴增子的去雜交包括向所述懸浮液中引入堿性溶液，所述堿性溶液使所述5’-標記的第二擴增子從所述第一擴增子變性，并且溶解所述多個經涂覆的非磁珠的至少一部分。
5.根據權利要求4所述的富集方法，其中所述堿性溶液是氫氧化鈉水溶液。
6.根據權利要求4所述的富集方法，其中所述懸浮液和所述堿性溶液在約18℃至約22℃范圍內的溫度下孵育約3分鐘至約10分鐘范圍內的時間。
7.根據權利要求1所述的富集方法，其中從所述第一擴增子進行所述5’-標記的第二擴增子的去雜交包括向所述懸浮液中引入甲酰胺。
8.根據權利要求7所述的富集方法，其中所述懸浮液和所述甲酰
9.根據權利要求1所述的富集方法，其中所述多個經涂覆的非磁珠被引入到包含約0.1％活性(w/v)至約0.5％活性(w/v)非離子表面活性劑的緩沖液中的所述懸浮液中。
10.根據權利要求1所述的富集方法，所述富集方法還包括在從包含所述珠上珠復合物的所述懸浮液中過濾出所述非聚集狀磁珠之前，將所述多個經涂覆的非磁珠和所述懸浮液孵育至多24小時。
11.根據權利要求1所述的富集方法，其中所述經涂覆的非磁珠是經涂覆的二氧化硅珠。
12.根據權利要求1所述的富集方法，所述富集方法還包括將所述單鏈聚集狀磁珠引入包括多個凹入部的流通池中，所述多個凹入部中的每個凹入部被配置為接納所述單鏈聚集狀磁珠中的一個單鏈聚集狀磁珠。
13.根據權利要求1所述的富集方法，其中：
14.一種富集試劑盒，所述富集試劑盒包括：
15.根據權利要求14所述的富集試劑盒，其中：
16.根據權利要求14所述的富集試劑盒，所述富集試劑盒還包括含多個凹入部的流通池，所述多個凹入部中的每個凹入部被配置為接納所述多個磁珠中的一個磁珠。
17.根據權利要求14所述的富集試劑盒，其中：
18.根據權利要求14所述的富集試劑盒，其中：
...【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】
1.一種富集方法，所述富集方法包括：
2.根據權利要求1所述的富集方法，其中從所述懸浮液中的所述多個磁珠生成聚集狀磁珠和非聚集狀磁珠的所述混合物包括：
3.根據權利要求1所述的富集方法，其中所述多個經涂覆的非磁珠以大于1:1至300:1范圍內的磁珠:經涂覆的非磁珠比率添加到所述懸浮液中。
4.根據權利要求1所述的富集方法，其中從所述第一擴增子進行所述5’-標記的第二擴增子的去雜交包括向所述懸浮液中引入堿性溶液，所述堿性溶液使所述5’-標記的第二擴增子從所述第一擴增子變性，并且溶解所述多個經涂覆的非磁珠的至少一部分。
5.根據權利要求4所述的富集方法，其中所述堿性溶液是氫氧化鈉水溶液。
6.根據權利要求4所述的富集方法，其中所述懸浮液和所述堿性溶液在約18℃至約22℃范圍內的溫度下孵育約3分鐘至約10分鐘范圍內的時間。
7.根據權利要求1所述的富集方法，其中從所述第一擴增子進行所述5’-標記的第二擴增子的去雜交包括向所述懸浮液中引入甲酰胺。
8.根據權利要求7所述的富集方法，其中所述懸浮液和所述甲酰胺在約55℃至約65℃范圍內的溫度下孵育約15分鐘至約30分鐘范圍內的時間。
9.根據...
【專利技術屬性】
技術研發人員：G·A·阿蒂奧利，T·蓋爾，A·拉羅薩，N·阮，W·托維，X·馮哈滕，
申請(專利權)人：因美納有限公司，
類型：發明
國別省市：
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