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【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及動物模型,具體涉及一種小鼠氣道類器官模型的構建方法。
技術介紹
1、由于圍產期醫療條件的改善,早產兒的數量一直在增加,約占全球新生兒的11%。盡管如此,存活的早產兒通常面臨相當大的呼吸挑戰,包括支氣管肺發育不良、感染后癥狀加劇、住院率和持續時間增加,以及對生長和發展的負面影響。早產打亂了呼吸系統發育的自然進程,導致持續到兒童期的不利呼吸結果。盡管導致這些不利呼吸結果的基本機制尚未完全理解,氣道上皮內的固有異常可能在其中起了一定作用。
2、近期關于氣管上皮的研究主要集中在疾病和感染模型上,而只有少數研究檢查了氣道上皮的發育。關于早產兒與足月兒氣道中的功能性細胞(包括杯狀細胞和俱樂部細胞)的差異以及與早產兒對呼吸系統疾病的易感性的關聯,目前尚無共識。然而,分泌細胞失衡與許多疾病有關,包括肺炎、氣道阻塞和進行性間質性肺病,這可能與未成熟氣道的脆弱性的根本原因有關。
3、為了揭示早產氣道的差異和潛在機制,實驗模型從20世紀90年代的死亡嬰兒的尸檢樣本發展到現代動物模型,如小鼠、大鼠、綿羊和猴子。然而,90年代的尸檢樣本與當代嬰兒的差異顯著,并且它們的可用性有限。通過支氣管鏡活組織檢查從新生兒中獲取人類樣本由于倫理問題而具有挑戰性。像綿羊和猴子這樣的大型動物需要高育種成本和延長的培養時間。直接使用小動物,如早產小鼠,一旦與母親分離,很難維持生存,這使得在實驗干預后跟蹤連續的身體變化變得不可能。
4、為此,本專利技術旨在提供一種小鼠氣道類器官模型的構建方法,以解決上述問題。
【技術保護點】
1.一種小鼠氣道類器官模型的構建方法,其特征是:所述方法包含以下步驟:
2.如權利要求1所述的一種小鼠氣道類器官模型的構建方法,其特征是:所述氣道類器官培養基包括AdDF+++、1×B27、5mM煙酰胺、1.25mM?N-乙酰半胱氨酸、500ng/mL?R-Spondin1、25ng/mL重組人FGF7、100ng/mL重組人FGF10、100ng/mL重組人Noggin、5μMY27632、500nM?SB202190和500nMA-8301;
3.如權利要求1所述的一種小鼠氣道類器官模型的構建方法,其特征是:所述消化液由400U/mL膠原酶I、0.25mg/mL蛋白酶E、10μMY27632和10U/ml?DNAse?I組成。
【技術特征摘要】
1.一種小鼠氣道類器官模型的構建方法,其特征是:所述方法包含以下步驟:
2.如權利要求1所述的一種小鼠氣道類器官模型的構建方法,其特征是:所述氣道類器官培養基包括addf+++、1×b27、5mm煙酰胺、1.25mm?n-乙酰半胱氨酸、500ng/ml?r-spondin1、25ng/ml重組人fgf7、100ng/m...
【專利技術屬性】
技術研發人員:劉洋,劉瀚旻,李英納,楊文豪,謝亮,石芳,楊凡,
申請(專利權)人:四川大學華西第二醫院,
類型:發明
國別省市:
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