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    一種載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維及其制備方法和應(yīng)用技術(shù)

    技術(shù)編號(hào):44480231 閱讀:5 留言:0更新日期:2025-03-04 17:47
    本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維的制備方法,該載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維由靜電紡聚氨酯微米纖維和納米細(xì)菌纖維素原位交織而成,所述的微納纖維表面遍布著通過多巴胺螯合固定的銅離子Cu<supgt;2+</supgt;;所述靜電紡聚氨酯微米纖維的直徑為0.4~1.1μm,所述納米細(xì)菌纖維素的直徑為55~60nm。將本發(fā)明專利技術(shù)所述的制備方法制備得到的所述微納纖維用于心瓣膜基質(zhì)材料。本發(fā)明專利技術(shù)先制備微納纖維后在微納纖維表面螯合Cu<supgt;2+</supgt;,通過仿生微納纖維結(jié)構(gòu)與纖維表面銅離子原位催化產(chǎn)生生理當(dāng)量NO二者共同作用,從而獲得具有優(yōu)異的抗凝血性能的載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)涉及一種載銅微納纖維,尤其涉及一種在微納纖維表面螯合銅離子的聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維心瓣膜基質(zhì)材料。


    技術(shù)介紹

    1、心血管疾病(cvd)目前是全球范圍內(nèi)的主要死亡原因,而瓣膜性心臟病(vhd)是近年來發(fā)病率較高的一類cvd。瓣膜置換術(shù)是嚴(yán)重心臟瓣膜病患者的主要治療手段,然而瓣膜置換材料在臨床應(yīng)用時(shí)會(huì)暴露一些不可忽視的問題,如在植入后的一段時(shí)間有一定幾率發(fā)生晚期血栓問題,因此,制備一種具有優(yōu)異抗凝血性能的心瓣膜基質(zhì)材料勢(shì)在必行。

    2、為此,研究人員付出了大量的心血研發(fā)具有優(yōu)異抗凝血性能的心瓣膜基質(zhì)材料。總體而言,結(jié)構(gòu)決定性能,解剖學(xué)研究表明心臟瓣膜是一種由致密的結(jié)締組織相互交織而成的結(jié)構(gòu)(以抵抗撕裂),且多由亞微米和納米纖維所組成。這預(yù)示著微納結(jié)構(gòu)本身就具有良好的抗凝血和促內(nèi)皮化能力。研究表明,微納纖維可以調(diào)控血漿蛋白行為,抑制凝血因子激活,大幅減少血小板黏附與激活,延長凝血時(shí)間,降低溶血率,微納結(jié)構(gòu)利于內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖。然而,僅構(gòu)建仿生微納結(jié)構(gòu),并不足以達(dá)到理想的快速促內(nèi)皮,抗凝血效果。

    3、另一方面,心血管介入材料表面的抗凝血修復(fù)策略主要是建立含有一定生物活性物質(zhì)的抗凝血活性表面,比如構(gòu)建no釋放涂層等。no釋放涂層的構(gòu)建可以通過表面負(fù)載具有原位催化能力的銅離子,從而催化內(nèi)源性s-亞硝基硫醇(rsno)以受控方式原位釋放一氧化氮(no)來模擬內(nèi)皮功能。產(chǎn)生的no將反饋給內(nèi)皮細(xì)胞以增強(qiáng)遷移/增殖,激活的no-環(huán)鳥苷酸單磷酸酯(cgmp)途徑進(jìn)一步抑制血小板粘附/激活。

    <p>4、在微納纖維方面,已經(jīng)有快速制備的方法,例如:公布號(hào)為cn108273130a,公布日為2018年7月13日的中國專利文獻(xiàn)中公開了一種三維微納纖維復(fù)合支架及制備方法,該支架由分布均勻的微米纖維素和納米細(xì)菌纖維素相互交織和貫穿的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)構(gòu)成。其制備過程主要包括:以靜態(tài)培養(yǎng)法制備的納米細(xì)菌纖維支架為基底,采用膜液界面培養(yǎng)法獲得一種微米纖維與納米纖維相互交織、均勻分布的三維微納纖維復(fù)合支架。

    5、銅離子與多巴胺等酚類化合物結(jié)合制備no釋放涂層的技術(shù)也被開發(fā),例如:公布號(hào)為cn115607728a,公布日為2023年1月17日的中國專利文獻(xiàn)中公開了一種長期催化釋放一氧化氮且抗凝血的涂層及其制備方法,該涂層以金屬基生物材料為基層,包括銳鈦礦型tio2納米管層、金屬離子層、多巴胺層和賴氨酸/肝素/硒代胱胺組合層,涂層的制備方法主要為:以金屬基生物材料作為陽極,采用電化學(xué)氧化的方法在其表面制備規(guī)則的tio2納米管層,熱處理后,再依次置于多巴胺溶液和賴氨酸/肝素/硒代胱胺的混合溶液中沉積反應(yīng),即得涂層。

    6、迄今為止,還沒有一種技術(shù),將微納纖維和銅離子涂層結(jié)合共同作用維持抗凝作用。


    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

    1、針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù),本專利技術(shù)提供一種可快速構(gòu)建的載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維的制備方法,本專利技術(shù)先合成聚氨酯,然后通過靜電紡絲制備微米纖維,再以膜液界面培養(yǎng),制備微納纖維,利用多巴胺溶液在纖維表面制備載銅涂層,將微納纖維和銅離子抗凝效果結(jié)合,成功制備具有優(yōu)異抗凝血效果的聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維心瓣膜基質(zhì)材料。

    2、為了解決上述技術(shù)問題,本專利技術(shù)提出的一種載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維的制備方法,該載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維由靜電紡聚氨酯微米纖維和納米細(xì)菌纖維素原位交織而成,所述的微納纖維表面遍布著通過多巴胺螯合固定的銅離子cu2+;所述靜電紡聚氨酯微米纖維的直徑為0.4~1.1μm,所述納米細(xì)菌纖維素的直徑為55~60nm。具體步驟如下:

    3、步驟1)靜電紡絲制備聚氨酯微米纖維膜:配置濃度為15~25%的聚氨酯紡絲液,通過靜電紡絲獲得孔隙為4.5±2.5μm的聚氨酯微米纖維膜;

    4、步驟2)制備聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維膜:采用膜液界面培養(yǎng)法制備厚度為1.5mm的細(xì)菌纖維素基底膜;然后,通過靜態(tài)原位培養(yǎng)獲得聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維膜;

    5、步驟3)微納纖維表面螯合cu2+:用ph為8.5的緩沖液溶解含銅化合物和多巴胺制備cu2+濃度為25~500μm的共混液,將步驟2中所得微納纖維膜浸漬在該共混液中,避光進(jìn)行表面反應(yīng)螯合cu2+,反應(yīng)時(shí)間為3~6h,攪拌速率100~300rpm;反應(yīng)結(jié)束后用去離子水沖洗3遍,冷凍干燥,得到載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維。

    6、進(jìn)一步地,本專利技術(shù)所述的制備方法,其中:

    7、步驟1)中,靜電紡絲的參數(shù)為:紡絲濕度為30~40%,紡絲溫度為20~25℃,紡絲溶液流速為0.010~0.012ml/min,紡絲電壓為10~15kv,接收距離為16~20cm,滾筒轉(zhuǎn)速為50~400rpm,紡絲時(shí)間為8h。所述紡絲溶液所用的有機(jī)溶劑為二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二氯甲烷中的一種。

    8、步驟2)中,通過靜態(tài)原位培養(yǎng)獲得聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維膜的過程是:將步驟1所得聚氨酯微米纖維膜超聲20~60min,然后鋪在細(xì)菌纖維素基底膜靜置3h;在聚氨酯微米纖維膜上加入細(xì)菌纖維素培養(yǎng)基,原位培養(yǎng)1~3天即可得到初始微納纖維膜;將維納纖維膜取出置于60~80℃去離子水中攪拌加熱,每隔1h換一次水,重復(fù)4~5次;加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的naoh溶液,純化至材料呈現(xiàn)純白色;最后用去離子水反復(fù)清洗至材料呈中性,除去基底膜獲得聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維膜。

    9、步驟3)中,所述含銅化合物為cuso4·5h2o和cucl2中的至少一種。

    10、步驟3)中,所述共混液中所述多巴胺的摩爾濃度為0.1~1mg/ml,優(yōu)選地,所述多巴胺的摩爾濃度為0.1mg/ml。

    11、本專利技術(shù)所述制備方法制備得到的載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維,其no釋放速率為3.90±0.85×10-10molcm-2min-1;力學(xué)性能測(cè)試的結(jié)果是拉伸強(qiáng)度為5.63±0.66mpa,楊氏模量為8.40±0.87mpa,斷裂伸長率為271.8±45.2%;所述生物相容性評(píng)價(jià)第五天細(xì)胞增殖cck-8值為2.63±0.13,溶血實(shí)驗(yàn)和靜態(tài)凝血結(jié)果包括溶血率為0.20±0.06%,血漿凝血酶原時(shí)間(pt)為52.47±1.71s,血漿凝血酶時(shí)間(tt)為58.57±0.71s,活化部分凝血活酶時(shí)間(aptt)為106.74±1.41s。

    12、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本專利技術(shù)的有益效果是:

    13、本專利技術(shù)制備所得的載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維由微米纖維與納米纖維相互交織而成,先制備微納纖維后在微納纖維表面螯合cu2+,通過仿生微納纖維結(jié)構(gòu)與纖維表面銅離子原位催化產(chǎn)生生理當(dāng)量no二者共同作用,從而獲得具有優(yōu)異的抗凝血性能的載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維。所述的良好抗凝血性能和促內(nèi)皮性能是仿生微納纖維結(jié)構(gòu)與纖維表面銅離子原位催化產(chǎn)生生理當(dāng)量no二者共同作用的結(jié)果,本專利技術(shù)的微納纖維可以用于心瓣膜基質(zhì)材料。

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    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

    1.一種載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維的制備方法,其特征在于,該載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維由靜電紡聚氨酯微米纖維和納米細(xì)菌纖維素原位交織而成,所述的微納纖維表面遍布著通過多巴胺螯合固定的銅離子Cu2+;所述靜電紡聚氨酯微米纖維的直徑為0.4~1.1μm,所述納米細(xì)菌纖維素的直徑為55~60nm。

    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,具體步驟如下:

    3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟1)中,靜電紡絲的參數(shù)為:紡絲濕度為30~40%,紡絲溫度為20~25℃,紡絲溶液流速為0.010~0.012mL/min,紡絲電壓為10~15kV,接收距離為16~20cm,滾筒轉(zhuǎn)速為50~400rpm,紡絲時(shí)間為8h。

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,步驟1)中,所述紡絲溶液所用的有機(jī)溶劑為二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二氯甲烷中的一種。

    5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟2)中,通過靜態(tài)原位培養(yǎng)獲得聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維膜的過程如下:

    6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟3)中,所述含銅化合物為CuSO4·5H2O和CuCl2中的至少一種。

    7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟3)中,所述共混液中所述多巴胺的摩爾濃度為0.1~1mg/mL。

    8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法,其特征在于,步驟3)中,所述共混液中所述多巴胺的摩爾濃度為0.1mg/mL。

    9.一種根據(jù)權(quán)利要求1-8任一所述制備方法制備得到的載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維,其特征在于,所述微納纖維的NO釋放速率為3.90±0.85×10-10molcm-2min-1;力學(xué)性能測(cè)試的結(jié)果是拉伸強(qiáng)度為5.63±0.66MPa,楊氏模量為8.40±0.87MPa,斷裂伸長率為271.8±45.2%;所述生物相容性評(píng)價(jià)第五天細(xì)胞增殖CCK-8值為2.63±0.13,所述溶血實(shí)驗(yàn)和靜態(tài)凝血結(jié)果包括溶血率為0.20±0.06%,血漿凝血酶原時(shí)間(PT)為52.47±1.71s,血漿凝血酶時(shí)間(TT)為58.57±0.71s,活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)為106.74±1.41s。

    10.一種載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維的應(yīng)用,其特征在于,將如權(quán)利要求9所述的微納纖維用于心瓣膜基質(zhì)材料。

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    【技術(shù)特征摘要】

    1.一種載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維的制備方法,其特征在于,該載銅聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維由靜電紡聚氨酯微米纖維和納米細(xì)菌纖維素原位交織而成,所述的微納纖維表面遍布著通過多巴胺螯合固定的銅離子cu2+;所述靜電紡聚氨酯微米纖維的直徑為0.4~1.1μm,所述納米細(xì)菌纖維素的直徑為55~60nm。

    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,具體步驟如下:

    3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟1)中,靜電紡絲的參數(shù)為:紡絲濕度為30~40%,紡絲溫度為20~25℃,紡絲溶液流速為0.010~0.012ml/min,紡絲電壓為10~15kv,接收距離為16~20cm,滾筒轉(zhuǎn)速為50~400rpm,紡絲時(shí)間為8h。

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,步驟1)中,所述紡絲溶液所用的有機(jī)溶劑為二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二氯甲烷中的一種。

    5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟2)中,通過靜態(tài)原位培養(yǎng)獲得聚氨酯/細(xì)菌纖維素微納纖維膜的過程如下:

    6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟3)中,所述含銅化合物為...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:張全超凌少強(qiáng)黃志武時(shí)建康國立萬怡灶應(yīng)志莉李守財(cái)
    申請(qǐng)(專利權(quán))人:華東交通大學(xué)
    類型:發(fā)明
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