【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及無花果雄樹種質材料的苗木繁育領域，具體為一種無花果雄樹種質材料組培快繁的方法。
技術介紹
1、無花果屬于桑科榕屬，是雌性兩性異株的多年生木本物種。國內無花果栽培品種為單性結實，不經授粉就能完成坐果，獲得有活力種子的概率為零。無花果雄樹為無花果雜交提供花粉，通過雜交選育創新種質資源。由于國內雄樹及其授粉媒介等缺乏，除本團隊外未見無花果雜交育種的報道。申請人團隊經試驗分離播種國外無花果的種子后，國內首次獲得實生苗，并從中鑒定篩選出部分優良雄樹。
2、目前，國內無花果繁殖多采用扦插繁殖，由于材料來源少、繁殖率低、生根不良、費工費時，難以滿足當前雜交育種需要。采用組培快繁技術，能夠消除季節因素的限制，遺傳穩定，是保留無花果雄樹良種優勢的高效途徑，可實現無花果優良雄樹的快速繁殖。本專利技術實現無花果優良雄樹全年育苗，顯著提高繁殖系數，為國內無花果自主雜交育種奠定基礎。
3、現有技術中與無花果雄樹組培快繁類似的專利文獻雖有報道，但存在染菌率高、組培苗長勢弱等問題。在無花果離體快繁過程中，無花果不同品種，甚至相同品種不同外植體的組培再生體系并不兼用，且污染問題一直沒有得到有效解決，污染導致組培材料不能正常生長和發育。現有技術不能有效應用于無花果雄樹，無法達到理想效果。目前如果能夠找到一種適用于無花果雄樹組培快繁的方法，將會滿足無花果育種的迫切需求。
4、綜上所述，現有技術存在的問題是：無花果優良雄樹種質資源稀缺，國內尚未發現關于無花果雄樹種質材料組培快繁技術的報道；無花果組培快繁污染問題一直未
技術實現思路
1、1.解決的技術問題
2、本專利技術的目的在于解決上述現有技術存在的缺陷，提供一種無花果雄樹種質材料組培苗快繁方法。
3、2.技術方案
4、為實現上述目的，本專利技術提供如下技術方案：
5、(1)外植體的采集與處理：溫室大棚當年新芽嫩梢為外植體，采集外植體材料后，去掉葉片，依次清洗，修剪成帶腋芽莖段，防褐化處理和消毒處理，備用。
6、(2)初代培養：將上述的莖段剪成0.5～1.0cm，接種到初代培養基上，置于每天光照16h，光照強度2500lx，培養溫度26℃，直至誘導形成不定芽。
7、(3)增殖培養：將上述的長至1.0cm高的不定芽轉入增殖培養基上增殖培養，置于每天光照16h，光照強度3000lx，培養溫度26℃，30d轉接一次。
8、(4)生根培養：將上述高度約2.5cm的叢生芽分切并接種到生根培養基上生根培養，每天光照16h，光照強度3000lx，培養溫度26℃，培養至生根。
9、(5)煉苗移栽：將高約4.0～6.0cm的生根組培苗去瓶蓋置于自然光照下煉苗5～7d后，將組培苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由草炭和蛭石(3：1)混合成的基質中并定植于大田中。
10、其中，所述初代培養基用于無花果雄樹組培苗的初代培養，增殖培養基用于無花果雄樹組培苗的增殖培養，生根培養基用于組培苗生根培養，移栽基質用于組培苗生根達到移栽要求時移栽使用。
11、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(1)中采集外植體時需選擇連續3d以上的晴天。新芽為生長健壯、無病蟲害枝條頂端帶芽莖段。
12、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(1)中清洗的方法為：用洗潔精稀溶液浸泡10min，自來水沖洗干凈，然后置于5mg/l的戊唑·多菌靈溶液浸泡2h，自來水沖洗干凈，最后置于流水沖洗1h。
13、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(1)中修剪成帶腋芽莖段方法為：將新芽嫩梢剪成1.0～1.5cm左右的單腋芽莖段。
14、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(1)防褐化處理為：將單腋芽莖段置于4～8℃下1200mg/l維生素c溶液中浸泡30min。
15、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(1)消毒處理為：置于超凈工作臺上滅菌，75％酒精表面殺菌30s，無菌水沖洗3遍，2％naclo溶液浸泡振蕩7min，無菌水沖洗5遍。
16、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(2)中的初代培養基為：ms+6-ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂6g/l+頭孢噻肟鈉200mg/l，ph為5.8。
17、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(3)中增殖培養基為：ms+6-ba0.5mg/l+naa0.1mg/l+糖30g/l+瓊脂6g/l，ph為5.8。
18、進一步地，如上所述的無花果雄樹組培苗快繁方法，所述(4)的生根培養基為：1/2ms+iba1.0mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂6g/l，ph為6.0。
19、3.有益效果
20、與現有技術相比，本專利技術具備以下有益效果：本專利技術公開了一種無花果雄樹種質材料組培快繁的方法，本專利技術在外植體滅菌過程中使用維生素c，降低了無花果雄樹褐化率。在初代培養中首次使用戊唑·多菌靈、頭孢噻肟鈉降低了污染率。相對于現有技術，使用上述方案配合合適的快繁方法，可以在較短時間內獲得大量的無花果雄樹種質材料，開辟一條新的無花果雄樹種質材料繁育途徑，能夠加快無花果雄樹生根組培苗的生長，提高無花果雄樹組培苗的生根率、根系長度，提高無花果雄樹組培苗的成活率，加快無花果優良雄樹的繁育，具有顯著的進步性。
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1.一種無花果雄樹種質材料組培快繁的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)中采集外植體時需選擇連續3d以上的晴天。新芽為生長健壯、無病蟲害枝條頂端帶芽莖段。
3.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)中清洗的方法為：用洗潔精稀溶液浸泡10min，自來水沖洗干凈，然后置于5mg/L的戊唑·多菌靈溶液浸泡2h，自來水沖洗干凈，最后置于流水沖洗1h。
4.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)中修剪成帶腋芽莖段方法為：將新芽嫩梢剪成1.0～1.5cm的單腋芽莖段。
5.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹種質材料組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)防褐化處理為：將單腋芽莖段置于4～8℃下1200mg/L維生素C溶液中浸泡30min。
6.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)消毒處理為：置于超凈工作臺上滅菌，75％酒精表面殺菌30s，無菌水沖洗3遍，2％N
7.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(2)中的初代培養基為：MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L+頭孢噻肟鈉200mg/L，pH為5.8。
8.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(3)中增殖培養基為：MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+糖30g/L+瓊脂6g/L，pH為5.8。
9.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(4)的生根培養基為：1/2MS+IBA1.0mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6g/L，pH為6.0。
...【技術特征摘要】
1.一種無花果雄樹種質材料組培快繁的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)中采集外植體時需選擇連續3d以上的晴天。新芽為生長健壯、無病蟲害枝條頂端帶芽莖段。
3.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)中清洗的方法為：用洗潔精稀溶液浸泡10min，自來水沖洗干凈，然后置于5mg/l的戊唑·多菌靈溶液浸泡2h，自來水沖洗干凈，最后置于流水沖洗1h。
4.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)中修剪成帶腋芽莖段方法為：將新芽嫩梢剪成1.0～1.5cm的單腋芽莖段。
5.根據權利要求1所述的一種無花果雄樹種質材料組培快繁的方法，其特征在于，所述(1)防褐化處理為：將單腋芽莖段置于4～8℃下1200mg/l維生素c溶液中浸泡30min。
【專利技術屬性】
技術研發人員：喬峰，馮帥帥，姜婷婷，安萌萌，央宗，閆蓉，李愛花，韓葳，黃愛玲，李全希，張曉明，劉恬，譚德云，
申請(專利權)人：淄博市農業科學研究院，
類型：發明
國別省市：
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